CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在口腔鳞状细胞癌中的表达情况.方法应用免疫组化SP法检测42例原发口腔鳞状细胞癌患者的癌组织和20例口腔良性肿瘤患者正常黏膜上皮组织中Foxp3的表达,采用χ2检验进行统计学分析.结果 Foxp3阳性的CD4~+CD25~+调节性T细胞在口腔鳞状细胞癌中的表达显著高于正常口腔黏膜组织,差异具有显著统计学意义(P0.01).Foxp3蛋白表达与肿瘤分化程度相关,在高、中分化组为63.64%,低分化组为100%,差异具有统计学意义(P0.05).且其阳性率与肿瘤TNM分期相关,Foxp3蛋白表达在Ⅲ~+Ⅳ期阳性率为88.24%,在Ⅰ~+Ⅱ期表达的阳性率为60%(P0.05).Foxp3蛋白表达与患者年龄、性别、淋巴结转移未见明显相关性(P0.05).结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞在口腔鳞状细胞癌中的大量浸润与肿瘤的发生、发展、浸润、转移密切相关,可能是导致口腔鳞状细胞癌患者不能进行有效抗肿瘤免疫的重要原因之一.     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在肺癌患者外周血中的表达

目的探讨肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及其与临床病理因素的关系。方法用流式细胞术检测60例肺癌患者和60例健康对照者的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量变化。结果肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于正常组（P〈0．05）,其变化与病理分期和是否有转移有关（P〈0．05）,而和性别、家族史、病理类型和肿瘤体积等无关。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可能在肿瘤免疫中发挥重要作用,导致和促进肺癌的发生和转移。     

正常来源CD4+CD25+细胞在小鼠肺癌模型中的抗肿瘤作用

CD4+CD25+细胞是一群具有免疫抑制活性的T细胞,又称为调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs).肿瘤发生中Tregs会抑制T细胞的活化,促进肿瘤的发生、发展,而正常生理来源的Tregs回输后产生的免疫调节作用是未知的.为探讨正常生理状态下Tregs的免疫调节作用,利用小鼠肺癌模型和细胞移植...     

观察雷公藤多甙联合舒利迭治疗哮喘的临床疗效及探讨其治疗机制

观察雷公藤多甙(TP)联合舒利迭(SERETIDE)与单纯吸入舒利迭对哮喘患者的治疗效果,并比较两种治疗后患者外周血中CD+4CD+25调节性T(Treg)细胞的变化.选取西京医院呼吸内科门诊已确诊为哮喘的患者42例,随机分成甲、乙两组.甲组给予舒利迭(沙美特罗替卡松)吸入治疗,乙组给予舒利迭吸入治疗联合服用雷公藤多甙片治疗.采用流式细胞技术检测患者治疗前后外周血中CD+4CD+25Treg细胞,同时测定哮喘患者肺功能并填写ACQ评分表.结果甲乙两组哮喘患者治疗前外周血中CD+4CD+25 Treg细胞占CD+4T细胞的百分比分别为1.45±0.56,1.44±0.58(P＞0.05)无显著性差异.甲乙两种方法治疗4周后哮喘患者外周血中CD+4CD+25Treg细胞占CD+4T细胞的百分比分别为5.35±0.54,6.97±0.87 (P<0.05);FEV1 占预计值百分比分别为98.8±13.8,103.6±16.8(P<0.05),ACQ评分表平均得分0.81±0.5,0.28±0.3(P<0.05).发作期患者外周血CD+4CD+25 Treg细胞百分率与FEV1呈显著正相关(r=0.598 2,P<0.01).雷公藤多甙片联合舒利迭可有效治疗哮喘的发作,疗效明显优于单纯吸入舒利迭.     

CD8、Foxp3和CD1a在口腔潜在恶性病变中的表达及临床意义

目的:利用组织微阵列技术从组织学层面上探究细胞毒性T细胞(CD8),调节性T细胞(Foxp3)和树突状细胞的表面标记(CD1 a)在口腔潜在恶性病变(OPMDs)组织中的表达情况,评估CD8、Foxp3和CD1 a在人口腔黏膜上皮异常增生过程中不同阶段的表达规律及其临床意义.方法:采用免疫组织化学染色(IHC)技术检测加拿大英属哥伦比亚大学病理数据库里OPMDs患者的62例口腔黏膜组织标本[17例上皮增生、21例口腔扁平苔藓(OLP)、15例上皮轻度异常增生(D1)、9例上皮中度异常增生(D2)]中CD8、Foxp3和CD1 a的表达情况,回顾性分析CD8、CD1 a与Foxp3表达量同组织病理分型、各临床因素间的关系.结果:从D1发展到D2的上皮组织内,CD8和CD1 a的阳性表达率均增加,在上皮下组织内,病变从D1发展到D2时,CD8、Foxp3和CD1 a的阳性表达率均有不同程度的上升.临床因素相关性分析结果显示:CD8+与年龄、性别、部位、吸烟饮酒史均无相关性,Foxp3+与性别相关,定位于上皮内的CD1 a+与病变部位相关,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:在评估OPMDs恶性转化潜能中,CD1 a、Foxp3与CD8这3项指标具备一定的临床评估价值.     

孕鼠免疫激活对其子鼠调节性CD4~+CD25~+T细胞分化及功能影响的初步研究

CD4~+CD25~+T细胞是一种重要的调节性T细胞,在机体免疫反应中发挥着重要作用,探明孕鼠感染细菌对其子鼠调节性T细胞分化和功能的影响具有一定的生物学意义。用LPS介导的孕鼠免疫激活模型来模拟孕妇细菌感染.发现50μg/kg LPS诱导妊娠12.5 d的C57BL/6孕鼠产生大量的炎症细胞因子IL-6和TNF-α.孕鼠免疫激活导致成年LPS子鼠脾脏CD4~+CD25~+调节性T细胞增多。在实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型中成年LPS子鼠出现免疫耐受.免疫组LPS子鼠的外周淋巴结中CD4~+CD25~+调节性T细胞增多。该工作为后继深入探讨孕鼠免疫激活是如何调控成年LPS子鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达和功能奠定了一定的基础.     

体外激活CD8~+T细胞表达CD69及γ-干扰素的研究

目的 :研究正常人外周血CD8+T细胞体外活化表达早期活化标志CD69分子及γ -干扰素 (IFN -γ)的规律 方法 :以佛波醇酯 (PDB) +离子霉素 (Ion)或植物血凝素 (PHA)体外活化人外周血单个核细胞 (PBMC) ,利用流式细胞术分析CD8+T细胞表达CD69及IFN -γ的情况 结果 :PDB +Ion和PHA活化CD8+T细胞CD69的表达率 ( % )分别为 78.4± 5.3和 2 7.4± 4 .4 ( x±s) ,明显高于对照组 ( 1.5± 0 .6) (P <0 .0 5) 当monensin存在时以PDB +Ion及PHA刺激 4h后IFN -γ阳性CD8+T细胞的百分比分别为 2 9.7± 6.5及 5.9± 1.8,均明显高于对照组 ( 0 .7± 0 .2 ) (P <0 .0 5) ,其中前者表达率高于后者 (P <0 .0 5) 结论 :PDB +Ion和PHA均可刺激CD8+T细胞表达CD69以及IFN -γ ,前者的刺激作用明显强于后者     

调衡方抗荷瘤小鼠Lewis肺癌转移的实验研究

探讨了调衡方对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移的作用及其机制.将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL小鼠右腋皮下建立Lewis肺癌模型,灌胃给药12 d后观察肺表面转移率;常规石蜡切片HE染色,观察肺内转移灶的数量和大小;并采用免疫组化等方法检测肺组织中CD4+、CD8+T细胞量及血清中恶性肿瘤特异性生长因子(tumor specific growth factor,TSGF)的水平.结果显示调衡方在25、50 g/kg剂量下,可增加荷瘤小鼠肺组织中CD4+、CD8+T细胞量,对外周血中TSGF的水平及瘤块的增长有显著地抑制作用.研究结果显示诃衡方通过抑制小鼠外周血TSGF的水平及增加CD4+、CD8+T细胞量,从而抑制肿瘤细胞的侵袭转移.     

IFN-α治疗对慢性丙型肝炎患者CD8~+T细胞亚群Tim-3表达水平的影响

为探讨应用IFN-α治疗和未治疗的慢性丙型肝炎患者外周血CD8+T细胞亚群细胞频数及各亚群上Tim-3表达的变化。采用流式细胞术检测IFN-α治疗和未治疗的慢丙肝患者外周血中CD8+T细胞及各亚群频数及膜表面Tim-3表达水平的方法;q T-PCR检测血清中HCV-RNA水平;Spearman相关性分析CD8+T细胞频数、Tim-3表达与HCV-RNA之间的相关性。结果显示,慢丙肝患者外周血CD8+T细胞频数较健康对照组、IFN-α治疗组显著降低(P0.01)。初始T细胞明显增加(P0.01)。TCM、TEM细胞分布频率降低(P0.01)。经IFN-α治疗后,CD8+T细胞百分率上升(P0.05),初始T细胞数量下降(P0.01),TCM、TEM细胞频数均升高(P0.01)。三组人群TEMRA细胞频数无统计学差异。与健康对照组、IFN-α治疗组相比,慢丙肝患者CD8+T细胞及各亚群Tim-3表达水平均有上调(P0.05)。经抗病毒治疗后,CD8+T细胞、Naive细胞、TEM细胞、TEMRA细胞亚群Tim-3表达明显降低(P0.05),TCM细胞亚群中Tim-3表达也有降低,但无统计学差异。Spearman相关性分析发现:慢丙肝患者外周血CD8+T细胞百分率与病毒载量呈反比(r=-0.3775,P0.01),而Tim-3表达水平与病毒载量正相关(r=0.6230,P0.0001)。由此可知,HCV感染慢性化时可出现CD8+T细胞亚群分布异常及各亚群Tim-3过表达。IFN-α通过调节各CD8+T细胞亚群分化状态,及下调各群细胞表面Tim-3的表达,促进HCV免疫清除。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD45RA+,CD45RO+T淋巴细胞亚群的特点及临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4 CD45RA ,CD4 CD45RO ,CD8 CD45RA 和CD8 CD45RO T淋巴细胞亚群的特点及其与肝病病情的关系.方法采集46例轻中度慢性乙型肝炎患者、58例重度慢性乙型肝炎患者和30例健康人的外周抗凝血,应用流式细胞技术三色荧光分析法对其外周血中CD4 CD45RA ,CD4 CD45RO ,CD8 CD45RA 和CD8 CD45RO T淋巴细胞亚群进行检测.结果轻中、重度慢性乙型肝炎患者与正常人相比,其外周血中CD4 ,CD8 T细胞均无明显改变;CD8 CD45RA T细胞均明显降低,CD8 CD45RO T细胞均明显增高,而CD4 CD45RA ,CD4 CD45RO T细胞均无明显改变;重度慢性乙型肝炎患者与轻中度慢性乙型肝炎患者相比,CD8 CD45RA T细胞明显降低(P<0.05),CD8 CD45RO T细胞明显升高(P<0.05).结论乙型肝炎慢性化过程中,CD8 CD45RO T细胞起重要作用且与慢性乙型肝炎患者病情的进展呈正相关;检测CD4 CD45RA ,CD4 CD45RO ,CD8 CD45RA 和CD8 CD45RO T淋巴细胞亚群比检测CD4 和CD8 T细胞亚群能使我们更加正确、充分、全面地了解慢性乙型肝炎的发病机制和预后,从而有效地指导临床治疗.     

Phenotypic analysis of the medullary-type CD4-CD8+ thymocytes in mice

Phenotypic analysis of the medullary-type CD4-CD8+ (CD8SP) thymocytes has revealed phenotypic heterogeneity within this cell population. The phenotype of mature peripheral CD8+T cells is TCRαβ+CD3+Qa-2+HSA-3G11-6C10-, whereas in the medullary-type CD8SP thymocytes, 20% are Qa-2+; 33%, HAS-; 30%, 3G11-; and 70% are 6C10-. The disparate expression patterns of these four cell surface markers suggest that medullary-type CD8SP thymocytes may undergo phenotypic maturation process. According to the distribution of these four cell surface markers, six subgroups of CD8SP thymocytes have been identified. The precursor-progeny relationship along with developmental pathway is postulated as follows: 6C10+HSA+3G11-Qa-2-(r) 6C10+HSA+ 3G11+Qa-2-(r) 6C10-HSA+3G11+Qa-2-(r) 6C10-HSA-3G11+Qa-2-(r) 6C10-HSA-3G11Qa-2-(r) 6C10-HAS-3G11-Qa-2+, the cells in the last subgroup exit the thymus and home into periphery.     

一类具有饱和感染率的病毒动力学模型的全局稳定性

研究了一类HIV感染的病毒动力学模型,得到了病毒消除与否的阀值--基本再生数R0,证明了病毒消除平衡点和疾病平衡点的存在性及全局渐近稳定性.     

外源性透明质酸减少R5-HIV对CD4~+T细胞感染的研究（英文）

目的探讨外源性透明质酸(HA)是否可以降低巨噬细胞嗜性(CCR5依赖,R5)人类免疫缺陷病毒(HIV)对CD4+T细胞的感染性。方法首先用TZM-bl细胞和未受刺激的CD4+T细胞检测,以评估外源性透明质酸(HA)能否降低R5-HIV的感染性。用透明质酸酶去处理未受刺激的CD4+T细胞,研究内源性HA对R5-HIV感染性的影响。最后,同时测量外源性和内源性透明质酸(HA)对R5-HIV对CD4+T细胞粘和力的影响。结果 (1)100μg外源性HA处理能够显著降低R5-HIV感染TZM-bl细胞和未受刺激的CD4+T细胞(P<0.001)。(2)透明质酸酶处理可增强HIV的感染性,但是如果加上100μg外源性HA可以逆转透明质酸酶的处理(P<0.001)。(3)100μg外源性HA可以减少R5-HIV对CD4+T细胞的粘和力,透明质酸酶处理可以提高R5-HIV对CD4+T细胞的粘和力(P<0.001)。结论外源性HA减少R5-HIV对未受刺激的CD4+T细胞的感染性,而透明质酸酶处理可以提高R5-HIV对CD4+T细胞的粘和力,能增强R5-HIV对CD4+T细胞的感染性。     

Construction and expression of retroviruses encoding dual drug resistance genes in human umbilical cord blood CD34+ cells

A series of retroviral vectors encoding human mdr1 gene alone as well as in combination with either human mgmt gene or human mutant Ser31-dhfr gene are engineered. The resultant retroviruses are used to transduce human umbilical cord blood CD34+ cells. It has been shown that expression of dual drug resistance genes in transduced cells confers a broad range of resistance to both kinds of corresponding drugs. These data suggest a rationale for the use of such double chemoresistance gene constructs in an in vivo model in which transduced hematopoietic cells will acquire multiple protection against the cytotoxic side effects of combination chemotherapy and may have future application in chemoprotection of normal tissues, thus killing tumor cells more effectively.     

补肾和解复方对再障患者CD34+细胞造血干/祖细胞调节作用的实验研究

目的:探索补肾和解方对再障患者CD34 造血干/祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用.方法:采用免疫磁珠法(MACS)分离纯化再障患者骨髓CD34 细胞,造血细胞半固体和液体培养体系加入不同度补和解方制剂,检测对CD34 造血干/祖细胞增殖,形成祖细胞集落的提高率,并用流式细胞仪检测液体培养后细胞表面标记的变化.结果:补肾和解复方制剂(5～100μg.mL)能提高BFU-E、CFU-E、CFU-GEMM集落产率,补肾和解复方制剂50μg/mL是液体培养刺激CD34 细胞体外增殖的最佳浓度.补肾和解复方制剂诱导细胞14天后,细胞表面表达CD334 细胞随补肾和解复方制剂的浓度升高而增加,在补肾和解复方制剂的浓度升高而增加,在补肾和解复方制剂100μg/mL时以CD15 细胞数最高,CD71 细胞和G-A 细胞数仅在50μg/mL高于未加补肾和解复方制剂的对照组.结论:补肾和解复方制剂不但能促进再障患者CD34 造血干/祖细胞的增殖,并且能诱导定向分化,具有类生长因子和协同生长因子的作用.     

脐血单个核细胞和CD34+细胞体外扩增造血干/祖细胞

考察了脐血单个核细胞(MNC)和CD34+富集细胞在SCF+IL-3+IL-6+FL+Tpo细胞因子组合下的体外扩增特性.实验发现CD34+富集细胞具有很高的扩增潜力,通过3周培养总细胞扩增了(883.2±322.4)倍,而MNC仅扩增了(53.3±6.2)倍.对比细胞集落生成和CD34+细胞的扩增发现,MNC的集落密度由最初的(270.9±54.9)CFCs/105cells上升至第7天的(1 496.3±417.7)CFCs/105cells,CD34+细胞百分比则由最初的(0.99±0.18)%上升至第7天的(4.4±1.9)%,而CD34+富集细胞在培养过程中,虽然集落总数和CD34+细胞总数始终呈上升趋势,但是其集落密度和CD34+细胞百分比则始终呈下降趋势.在两种起始细胞培养中,CFU-GM(粒细胞-巨噬细胞集落形成单位)在集落中的含量逐渐增加,BFU-E(爆式红细胞集落形成单位)含量则逐渐降低.在3周的短期培养中,MNC可以得到更多的集落形成细胞(CFC)和CD34+细胞.     

慢性热应激对猪肠道CD3^＋T细胞表达的影响

以猪肠道CD3＋T细胞为研究对象,旨在观察慢性热应激对猪肠道黏膜免疫功能的影响。12头小型猪随机平均分成热应激组和常温对照组两组。人工气候室内,热应激组模拟夏季炎热气候,气温从26～39℃24h循环变温,在39℃时维持4h;常温对照组在24℃下饲养。试验持续10d,热应激10d后39℃高温持续期结束剖杀试验猪,取其十二指肠中段、空肠及回肠中段进行固定、石蜡切片、免疫组织化学染色,观察十二指肠、空肠及回肠中CD3＋T细胞数量的变化。结果显示：实验猪十二指肠黏膜上皮层、固有层及十二指肠肠腺均呈CD3强阳性,与对照组相比,CD3阳性面积系数显著上升（P〈0.05）;空肠和回肠黏膜上皮层的CD3阳性细胞数量也显著增加（P〈0.05）,而固有层中的CD3阳性细胞数量则无明显变化,增加的幅度小于十二指肠。慢性热应激中实验猪肠道结构严重受损,消化吸收功能严重下降,而肠道CD3＋T细胞的增多,可能是机体肠道黏膜免疫功能的一种代偿性增强反应。     

关于CD45RA/CD45RO分子的功能研究

CD45RA和CD45RO是白细胞共同抗原的两种异型.CD45RA 和CD45RO T淋巴细胞在表型、功能等各方面均不同,了解其亚群的变化可能有助于了解许多疾病的发病机制、临床状态及预后.     

慢性乙型肝炎患者外周血CD45RA+,CD45RO+T淋巴细胞亚群的特点及临床意义

目的 探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4＋CD45RA＋，CD4＋CD45RO＋，CD8＋CD45RA＋和CD8＋CD45RO＋T淋巴细胞亚群的特点及及其与肝病病情的关系．方法 采集46例轻中度慢性乙型肝炎患者、58例重度慢性乙型肝炎患者和30例健康人的外周抗凝血，应用流式细胞技术三色荧光分析法对其外周血中CD4＋CD45RA＋，CD4＋CD45RO＋，CD8＋CD45RA＋和CD8＋CD45RO＋T淋巴细胞亚群进行检测，结果轻中、重度慢性乙型肝楚患者与正常人相比．其外周血中CD4＋，CD8＋T细胞均无明显改变；CD8＋CD45RA＋T细胞均明显降低，CD8＋CD45RO＋T细胞均明显增高，而CD4＋CD45RA＋，CD4＋CD45RO＋T细胞均无明显改变；重度慢性乙型肝炎患者与轻中度慢性乙型肝炎患者相比，CD8＋CD45RA＋T细胞明显降低（P〈0．05），CD8＋CD45RO＋T细胞明显升高（P〈0．05）．结论乙型肝炎慢性化过程中，CD8＋CD45RO＋T细胞起重要作用且与慢性乙型肝炎患者病情的进展呈正相关；检测CD4＋CD45RA＋．CD4＋CD45RO＋．CD8＋CD45RA＋和CD8＋CD45RO＋T淋巴细胞亚群比检测CD4＋和CD8＋T细胞亚群能使我们更加正确、充分、全面地了解慢性乙型肝炎的发病机制和预后，从而有效地指导临床治疗。