双歧杆菌介导的福氏志贺菌Bb-ipaB疫苗的构建

目的:构建福氏志贺菌重组双歧杆菌Bb-ipaB疫苗。方法:以福氏志贺菌DNA为模板扩增福氏志贺菌ipaB基因,双酶切后克隆到pGEX-1λT质粒上,构建重组质粒pGEX-ipaB,电穿孔法将该质粒转化入Bb,构建福氏志贺菌重组Bb-ipaB疫苗。结果:成功扩增出分子量约为1 711 bp的ipaB基因,双酶切证实基因成功插入pGEX-1λT中,并成功转化入双歧杆菌,构建rBb-ipaB疫苗。结论:成功构建福氏志贺菌重组rBb-ipaB疫苗,为该疫苗的进一步研究奠定了基础。     

铝灰渣提取物对大鼠消化系统的毒性作用

为探索铝灰渣提取物(AAE)对大鼠消化系统的毒性机制,将64只SPF级Wistar大鼠按性别体重随机分为4组,设AAE高、中、低剂量组(染毒剂量分别为15.6,7.8,5.2 mg·kg-1)和对照组(超纯水),连续灌胃14 d.观察各组大鼠一般状态,检测血清TNF-α和NO含量、胃肠组织DAO含量和MPO活性,观察大鼠胃肠平滑肌细胞的组织形态.结果显示,与对照组比较,灌胃第7 d和第14 d,AAE各剂量组大鼠2 h内排便量明显增多,均出现稀便、不定形软便;AAE各剂量组大鼠血清TNF-α和NO含量显著增高,胃和结肠组织DAO含量和MPO活性均显著增高,呈剂量依赖性; AAE对大鼠胃肠黏膜和胃肠平滑肌细胞组织形态学影响大,表现为胃肠黏膜溃疡,萎缩和炎性细胞浸润.研究显示灌胃AAE对大鼠消化系统有一定的毒性作用.     

保肝颗粒对大鼠酒精性肝损伤的早期干预作用

观察保肝颗粒对大鼠酒精性肝损伤的早期干预作用。将144只大鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯组、保肝颗粒低、中、高剂量组,给药1 h后除空白组外,其余各组按10 mL/kg灌胃50 %乙醇,1 h后重复灌胃50 %乙醇一次,空白组灌胃等体积蒸馏水,连续6 d。于实验开始的第2、3、4、6 d每组分别随机处死大鼠6只,腹主动脉取血,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、α-谷胱甘肽-S-转移酶(α-GST)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)、精氨酸酶1(Arg-1)、嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)水平;肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果表明,与空白组比,模型组大鼠血清AST、ALT、ALP、TBIL、TNF-α、IL-6、α-GST、GLDH、Arg-1、PNP水平明显升高(P<0.05, P<0.01),肝组织MDA水平明显升高、SOD水平明显降低(P<0.05, P<0.01);与模型组比,保肝颗粒可以明显降低血清AST、ALT、ALP、TBIL、TNF-α、IL-6、α-GST、GLDH、Arg-1、PNP的水平,提高肝组织中SOD的活性,降低MDA的含量(P<0.05, P<0.01)。说明保肝颗粒早期干预大鼠酒精性肝损伤有较好的保肝作用。     

藏药五味沙棘口服液对实验性慢性支气管炎大鼠模型的防治作用研究

为观察五味沙棘口服液对实验性慢性支气管炎动物模型的防治作用,初步探讨其作用机制,采用改良烟熏法复制大鼠慢性支气管炎模型,分为7组,按设计剂量分别灌胃给药,连续21d,末次给药后第2d取样,测定各组大鼠血清、肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)中内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-8)、丙二醛(MDA)的含量.取部分肺组织进行病理学观察.结果显示模型组大鼠血清、肺组织及BALF中TNF-α、IL-8、ET-1、MDA含量均较正常组明显升高(P0.01),NO含量则明显低于正常对照组(P0.01).治疗组(除五味沙棘口服液低剂量组)大鼠血清、肺组织及BALF中TNF-α、IL-8、ET-1、MDA含量较模型组明显降低(P0.01或P0.05),NO含量则明显高于模型组(P0.01或P0.05),改善肺组织病理损伤.藏药五味沙棘口服液在一定程度上可治疗慢性支气管炎,且对肺组织具有一定的保护性.其作用机制可能与它增强肺组织自由基清除能力、改善机体功能状态、抑制炎性细胞因子的释放有关.     

氢吗啡酮对炎性痛大鼠脊髓 ERK1 / 2 信号通路的影响

摘要:目的 探讨氢吗啡酮对炎性痛大鼠脊髓 ERK1 / 2 信号通路的影响。 方法 选择 SPF 级雄性大鼠 30 只,随机分为 3 组,正常组、模型组和氢吗啡酮组;检测各组大鼠热痛阈和机械痛阈;ELISA 检测血清中 TNF-α、IL-6 和 IL-10的含量;Western blot 检测各组大鼠脊髓中 ERK1 / 2 和 p-ERK1 / 2 蛋白表达水平;qRT-PCR 法检测各组大鼠脊髓中ERK1 / 2 mRNA 表达水平。 结果 与正常组相比,模型组大鼠血清炎症细胞因子 TNF-α 和 IL-6 含量明显增高,IL-10 含量明显降低,且术侧后肢热痛 阈 显 著 缩 短 及 机 械 痛 域 明 显 降 低,差 异 均 有 统 计 学 意 义 ( P < 0. 05) ;脊 髓 中ERK1 / 2 mRNA 表达水平、ERK1 / 2 及 p-ERK1 / 2 蛋白表达水平均显著升高,差异有统计学意义( P< 0. 05) 。 注射氢吗啡酮后,与模型组相比,大鼠血清 TNF-α 和 IL-6 含量显著降低而 IL-10 含量显著升高,热痛阈显著延长及机械痛域明显升高,差异均具有统计学意义( P<0. 05) ;氢吗啡酮组 ERK1 / 2 mRNA 表达水平、ERK1 / 2 和 p-ERK1 / 2 蛋白表达水平均明显降低( P<0. 05) 。 结论 氢吗啡酮可有效改善弗氏完全佐剂诱导的大鼠炎性疼痛,其抗炎镇痛机制与降低大鼠机体炎性因子的产生,并抑制 ERK1 / 2 信号通路的活化有关。     

草鱼胆中毒大鼠致急性肾损伤TNF-α动态水平测定

目的：研究血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）在不同时间段鱼胆中毒大鼠体内的变化及其与鱼胆中毒后急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）发生和发展的关系。方法：健康SD大鼠30只（雌雄各半）,采用ELISA测定20只不同时间段鱼胆中毒大鼠与10只正常对照大鼠的血清TNF-α水平,比较鱼胆中毒大鼠血清TNF-α与正常对照大鼠血清TNF-α的水平。结果：①草鱼胆中毒大鼠肾组织病理改变主要在肾小管,表现为变性、坏死并且随时间延长病变越严重;②鱼胆中毒大鼠血TNF-α较正常对照组明显升高,其升高程度与时间成正比。结论：鱼胆中毒的发病机制与血清TNF-α密切相关,血清TNF-α参与了鱼胆中毒后AKI的发生与进展。鱼胆中毒时间越长引起中毒的程度越重,血清TNF-α升高就越明显。     

两种方法建立大鼠骨性关节炎模型中软骨细胞变化比较

为了比较常规手术法及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)干预法构建大鼠骨性关节炎模型的差异,探寻骨性关节炎前期动物研究中简捷有效的模型建立方法。通过选取36只SPF级SD大鼠雄性随机分为健康对照组(control group)、假手术组(sham-operated group)、手术组(operated group)和TNF-α干预组(TNF-αgroup),4周后取材,培养提取的各组原代软骨细胞,采用MTT比色法检测不同处理后对软骨细胞活力的影响;红胞调之原位检测(TUNEL)法检测软骨细胞凋亡率;蛋白印迹法(western blot)检测炎症因子MCP-1、MMP9及ICAM1的表达水平变化。结果表明:四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测提示经各组不同方法处理后软骨细胞活力未见明显改变,TUNEL法检测结果提示:各组之间相比较统计分析后,与对照组比较,手术组和TNF-α干预组软骨细胞凋亡率较高(P 0. 01),手术组和TNF-α干预组两者之间无显著差异(P 0. 05);与假手术组相比,手术组和TNF-α干预组处理后,软骨细胞凋亡率显著升高(P 0. 01);对照组与假手术组、手术组和TNF-α干预组之间分别比较,软骨细胞凋亡率无明显变化(P 0. 05)。Western blot结果表明:分别与对照组和假手术组相比较,手术组和TNF-α干预组软骨细胞MCP-1、MMP9及ICAM1表达水平增高(P 0. 01),手术组和TNF-α干预组之间各指标改变无统计学差异(P 0. 05)。可见给予TNF-α干预可促使软骨细胞凋亡率及炎症因子指标增高,其对软骨细胞的影响与手术组相似,可成为一种简捷有效的大鼠骨性关节炎模型建立方法。     

不同浓度虫茶对SD大鼠的胃损伤预防效果评价

对购买的一种虫荼进行SD大鼠胃损伤预防效果评价.通过动物模型分析,研究其胃损伤的预防效果.通过酶联免疫法测定各组大鼠血清中IL-6和TNF-α细胞因子水平,观察到1000 mg/kg灌胃浓度的虫茶组大鼠的IL-6和TNF-α细胞因子水平低于低浓度组和对照组.通过解剖观察到1 000 mg/kg灌胃浓度的虫茶(90.8％胃损伤抑制率)具有最强的胃损伤抑制效果.并且观察大鼠的胃液量和胃液pH值,发现1 000 mg/kg灌胃组大鼠的胃液分泌量和pH值分别低于和高于低浓度组和对照组.实验中,高浓度灌胃浓度的虫茶具有更强的胃损伤抑制效果.综合分析得出,一定浓度的虫茶具有良好的胃损伤预防效果.     

安神方颗粒对CUMS大鼠递质代谢与炎症反应的影响

目的:探讨安神方颗粒对慢性应激抑郁模型大鼠行为学以及递质代谢和炎症反应的影响.方法:30只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、安神方颗粒组,每组10只;除空白组外,其余各组大鼠进行2周的慢性温和不可预知应激(CUMS)刺激;在后续3周进行CUMS 1 h前,安神方颗粒组每天给予安神方颗粒质量分数40 g/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃.观察各组大鼠治疗前后的体质量变化;运用强迫游泳(FST)和糖水偏好实验(SPT)评估大鼠抑郁行为的变化;通过ELISA法检测大鼠海马组织中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,并通过Western blotting和免疫荧光检测大鼠海马BDNF和GABA_ARα2表达情况.结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量增加缓慢(P 0. 01),FST累积不动时间明显延长(P 0. 01),糖水偏好值减少(P 0. 01),海马BDNF和GABA_ARα2表达水平下降(P 0. 01);与模型组比较,安神方颗粒组大鼠体质量增长较快(P 0. 01),FST累积不动时间明显缩短(P 0. 01),糖水偏好值升高(P 0. 01),海马组织中炎症因子IL-1β和TNF-α的含量降低,BDNF和GABA_ARα2表达水平上升(P 0. 01).结论:安神方颗粒可能参与干预炎症因子IL-1β和TNF-α上调海马组织BDNF和GABA_ARα2的表达,从而发挥抗抑郁的作用.     

急性低氧暴露下大鼠脑组织的病理学改变及脑IL-6、TNF-α的表达变化

目的探讨在模拟高原环境中,急性低氧暴露大鼠脑组织的病理学改变及IL-6、TNF-α的表达变化。方法SD大鼠50只雌雄各半,实验分5组。分别是常压对照组,急性低压低氧暴露1 d组、2 d组、3 d组以及7 d组,暴露后测定大鼠脑干湿重比,脑组织中TNF-α、IL-6含量及病理学改变。结果与正常对照组相比,暴露1 d组、2 d组、3 d组大鼠脑干湿重比、脑组织中IL-6、TNF-α升高(P0.05)。暴露7 d组脑组织含水量、脑组织中IL-6、TNF-α均显著低于暴露3 d组(P0.05)。病理结果显示正常对照组脑组织细胞形态结构及组织间隙正常,暴露3 d组脑组织分子层、锥体细胞周围、血管周围、脉络丛以及脑膜下水肿,暴露7 d组脑组织分子层水肿较3 d组减轻。结论在模拟海拔5 km低压低氧环境中,SD大鼠的脑组织的病理学改变以及干湿重比、TNF-α、IL-6因子含量均在3 d时显著改变和升高,但随着暴露时间的延长,损伤程度有所降低,这和平原人群进入高原后所产生的低氧习服机制相同。故该研究所选择观察的SD大鼠脑组织的形态学改变以及检测脑组织中TNF-α、IL-6含量改变可作为急性高原病模型是否成模的判定指标。