贝类凝集素的特性与功能

综述了贝类凝集素的特性与功能.凝集素是一类非免疫来源的具有多价构型的热敏糖蛋白,广泛存在于贝类血淋巴细胞和生殖细胞的细胞膜表面、胞浆内和胞浆外的体液中,能够与特异性糖基化合物作可逆的非共价结合.基于对异源性物质或细胞膜表面糖基的特异性识别与结合功能,贝类凝集素在生命体中发挥着识别并凝集限制异物作用、激活免疫系统溶细胞作用、生殖细胞间相互粘附的桥梁作用、与共生生物之间(如肠道益生菌)的物质与能量转换作用.贝类凝集素可诱导表达,但在不同的条件下其凝集活性有很多差异性.贝类凝集素凝集活性还受金属离子、环境温度、盐度、pH值等外界因子及发育阶段、健康状况等内部因素影响.     

凝集素的寡糖链结构分析及临床应用综述

描述凝集素的寡糖链制备,糖链结构分析的各种手段,介绍各种凝集素在肿瘤诊断、治疗等医学中的应用。     

响应面法优化正红菇菌丝体产胞内凝集素培养条件

采用响应面法对液体深层培养的正红菇(Russula vinosa)菌丝体产胞内凝集素的培养条件进行了优化.通过单因子实验确定最适碳源和氮源为淀粉和酵母膏,在此基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其产胞内凝集素的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的淀粉、酵母膏、装液量3个因素,通过最陡爬坡实验及响应面分析法确定了产凝集素的最适条件:ω(淀粉)3.04%,ω(酵母膏)0.3%,ω(KH2PO4)0.2%,ω(MgSO4)0.1%,装液量73mL,转速250r/min,初始pH5,发酵时间5d.在此条件下,菌丝体产胞内凝集素的总活力可达72127.3u,与初始培养条件下的凝集素总活力相比提高了1.88倍.     

过氧化物酶体增殖物活化受体与促炎介质（综述）

近年来发现，核受体超家庭成员-过氧化物酶体增殖物活化受体（peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs）是一组转录因子，它与某些促炎介质，如：白三烯B4及肿瘤坏死因子等有密切关系，这类受体与相应配体结合活化后，将有助于感染性疾病的治疗。对PPARs的结构和功能，配体的一般特性以及PPARa、PPARγ对促炎介质的调节作一综述。     

Phaseolus lunatus Linn vel aff的种子中A型血专一性凝集素的研究

用亲和层析法从Phaseolus lunatus Linn vel aff的种子中纯化出一种对人类A型血专一的凝集素.该凝集素的粗浸提液都只对A型血细胞凝集,而对B、O型绝不凝集.当纯化的凝集素浓度为0.98μg/mL时,即能凝集A型血细胞,GalNAc、对硝基苯酚-β-D-吡喃半乳糖苷能抑制其凝集作用;酚—硫酸法测得凝集素含有3.8％的中性糖;该凝集素是一个促有丝分裂原,其细胞转化为67.9％;它的分子量为56500,有两种亚基,分子量分别为17200和14600.凝集素分子中亮氨酸和缬氨酸含量较高,分别为9.83和9.64,而酸性氨基酸含量远比碱性氨基酸为高.     

韭菜凝集素的纯化及部分性质的研究

用葡聚糖凝胶柱层析法从韭菜的叶片组织分离出一种对新鲜兔红细胞有强烈凝集作用的凝集素，ＰＡＧＥ鉴定和高碘酸－Ｓｃｈｉｆｆ试剂反应均显单一条带。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明该凝集素含有３个亚基，其相对分子质量分别约为３１０００、２４０００和２１０００。韭菜凝集素具有一定的热稳定性，在酸、碱处理中该凝集素对碱处理较酸处理稳定，氨基酸组成分析表明韭菜凝集素含有１４种氨基酸，其中半胱氨酸含量较高。     

荧光淬灭作用研究黄精凝集素Ⅱ微环境与构象的关系

淬灭剂CsCl、KI、丙烯酰胺对黄精凝集素Ⅱ(Polygonatum cyrtonemaHua.LectinⅡ,PCLⅡ)内源荧光淬灭研究表明它们对凝集素分子的淬灭属动态淬灭机制.综合3种淬灭剂对黄精凝集素Ⅱ的淬灭效果,黄精凝集素Ⅱ中Tyr和Trp对中性淬灭剂丙烯酰胺的可接近程度分别达到88.5%和74.07%,而对阴离子淬灭剂KI为55.5%和66.7%,对阳离子淬灭剂CsCl均只有25%.表明黄精凝集素Ⅱ发射荧光的氨基酸残基大部分是位于分子表面疏水袋中,少部分埋藏于分子内部疏水环境中,且所有发荧光氨基酸所处微环境带正电荷的比例比带负电荷的比例大近一倍.     

内皮抑素与角膜新生血管相关研究进展

内皮抑素是目前已知最强的内源性血管生成抑制因子,它对以肿瘤血管为代表的活跃增殖的血管内皮细胞有强烈的选择性抑制作用,且无毒性、无耐药性,角膜新生血管形成与肿瘤新生血管类似,内皮抑素已成为治疗角膜新生血管性眼病的一种潜力药物.该文将结合内皮抑素的结构特点,围绕其抑制新生血管生成的作用机制,着重对其可能用于角膜新生血管发生及治疗方面的相关研究进展作一综述.     

半夏凝集素基因的克隆

利用RACE－PCR技术从半夏花序中克隆出半夏凝集素的全长cDNA,通过比较半夏同其他天南星科植物的凝集素基因序列和推测的氨基酸序列,发现半夏凝集素基因编码一具有信号肽的前体蛋白,半夏凝集素同其他天南星科植物凝集素一样,为具有3个甘露糖专一结合盒的凝集素。     

中国菜豆凝集素序列的亲缘性分析

菜豆凝集素可专一与寡糖结合,是其发挥凝血及杀虫功能的主要原因。将菜豆凝集素序列和其他豆科凝集素进行序列对比,发现菜豆凝集素与豇豆凝集素序列相似度最高。对不同国家产地凝集素序列进行对比分析,发现菜豆凝集素高度保守,高度相似氨基酸残基达到74%,中国株菜豆凝集素序列与马来西亚株菜豆凝集素相似度最高,进化树分析显示中国株菜豆凝集素其亲缘性追溯为发源于美洲(美国),经东南亚(马来西亚)传入中国,这与菜豆传入中国的历史相符合。     

绿豆凝集素的分离纯化和若干性质的研究

以猪甲状腺球蛋白—ABSE—交联琼脂为亲和吸附剂,通过比较简便而经济的方法,对绿豆外源凝集素进行了纯化。所获得的外源凝集素在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示一条蛋白带,其亚基分子量约为40,000。此外源凝集素对半乳糖和木糖有相当强的专一性。对此外源凝集素的某些其它性质进行了研究。     

白附子凝集素的亲和纯化及其理化性质的研究

用鸡卵类粘蛋白—Sepharose作亲和吸附剂,以线性离子梯度洗脱后,活性部分进一步于Sepharose 6B 凝胶过滤,所得凝集素制品经连续PAGE(pH8.9和pH 4.3)以及Disc—SDS—PAGE鉴定,均呈单一蛋白带,用SDS—PAGE和凝胶渗透色谱测其分子量分别为22,500和24,000.凝胶等电聚焦测其pI为4.6,氨基酸组成分析表明该凝集素富含Asp,而含硫氨基酸甚少,DNS—聚酰胺薄膜层析分析其N—未端氨基酸残基为Ala.紫外吸收光谱表明该凝集素在pH7.5、0.1M PBS下,其吸收波峯在275nm,低谷在250nm.酚-硫酸法测其总糖量为7.5％.凝集素浓度低至每毫升1微克时,对免红细胞仍有凝集作用.     

不同海藻凝集素对鲤免疫活性物的诱导作用

以条斑紫菜（Porphyra yezaensis）和裙带菜（Undaria pinnatifida）的凝集素作为免疫增强剂，来研究它对鲤免疫活性的诱导作用．实验结果表明，投喂和灌喂凝集素后，鲤血清中凝集素、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、溶菌酶活性与对照组相比都有提高，其中投喂条斑紫菜凝集素组比投喂对照组依次提高3．0倍、0．8倍、3．9倍、1.0倍；投喂裙带菜凝集素组比投喂对照组依次提高1.0倍、0．4倍、3．0倍、0．7倍，灌喂裙带菜凝集素组比灌喂对照组依次提高3．0倍、0．3倍、1．8倍；灌喂条斑紫菜凝集素组比灌喂对照组依次提高3.0倍、0．7倍．由此可看出：两种凝集素都可以作为一种免疫添加剂激活鲤的免疫系统，对鲤的非特异性免疫功能具有明显的增强作用．其中投喂条斑紫菜的效果更好．     

121份菜豆品种资源的植物凝集素含量分析

菜豆鲜荚中含有多种抗营养因子,其中菜豆凝集素为最主要的毒性因子,摄入不当会导致食物中毒。以121个菜豆品种商品荚为试验材料,测定其植物凝集素含量,分析评价其遗传变异,扩大极低和极高菜豆凝集素水平的筛查范围。结果表明:121个菜豆品种的凝集素含量水平差异极显著(P<0.01),变异系数为98.34%。121个菜豆品种植物凝集素含量变幅为0.005~1.330 mg/g,均值为0.412 mg/g,品种频率分布曲线主峰明显,呈近似正态分布,但是两尾偏长,说明有极低和极高菜豆凝集素含量的品种分布。筛选出低菜豆植物凝集素的品种3份,为低毒菜豆遗传改良和合理利用提供技术支持。     

蒙古口蘑菌丝体凝集素性质初步研究

通过液体摇瓶培养蒙古口蘑菌丝体,用磷酸盐缓冲液浸提,得到菌丝体的凝集素粗提物.分析表明:蒙古口蘑菌丝体凝集素对牛血和羊血都能凝集;D-果糖、β-葡萄糖、半乳糖和木糖对菌丝体凝集素均具有抑制作用;弱酸或弱碱性浸提液有利于凝集素的提取;菌丝体凝集素具有一定的热稳定性,直到60℃以后凝集红细胞的活力才丧失;其凝集活性对Ca2+、Mg2+、Mn2+和Fe3+这四种离子有不同程度的依赖.     

双壳贝类血清中凝集素凝集性能初步研究

在多种贝类血清中发现有可凝脊椎动物血细胞的因子－－凝集素。栉孔扇贝血清中的凝集互可凝集鸡、鹌鹑、小鼠我种动物血细胞,但对鳝鱼细胞不发生作用。该凝集素具有较强的热稳定性。１００℃处理４５ｍｉｎ仍具有活性;并具有广泛的ＰＨ范围,中在ＰＨ３－１１进行凝集作用。但其活性可被ＥＤＴＡ强烈抑制,Ｄ－甘露醇和Ｌ－鼠李糖对其活性有明显抑制作用,Ｄ－木蕈也有轻微抑制作用。在栉孔扇贝细胞的细胞膜上未发现有凝集鸡血细胞     

葱莲凝集素基因的克隆

RACCE－PCR技术从葱莲叶片中克隆出葱莲凝集素的全长cDNA，通过比较葱莲同其它石蒜科植物的凝集素基因序列和推测的氨基酸序列，发现葱莲凝集素基因编码一具有信号肽的前体蛋白，葱莲凝集素同其它石蒜科植物凝集素一样为具有3个甘露糖专一结合盒的凝集素。     

国产大蒜凝集素基因的克隆与生物信息学分析

为了获得国产大蒜新的凝集素家族基因,根据NCBI数据库中已公布的大蒜凝集素基因序列设计引物,从国产大蒜的鳞茎中提取总RNA,采用RT-PCR技术分离克隆出一个大蒜凝集素基因,命名为ASA-C。ASA-C全长546 bp,包含1个471 bp的ORF,编码156个氨基酸的多肽。利用网站和分析软件对其进行生物信息学分析。结果 表明：ASA-C与已公布的同源二聚体大蒜凝集素ASAⅡ基因具有较高同源性;推测该基因编码多肽的N端有一典型跨膜结构域的信号肽,多肽序列上有3个甘露糖特异性结合凝集素共有基序（Q-D-N-V-Y）。多重序列比对以及系统进化树的结果 表明大蒜凝集素的保守性很强,这为进一步开发利用大蒜凝集素蛋白的功能奠定了基础。     

三种海藻凝集素对刺参组织免疫酶SOD、PO活性的影响

在基础饲料中分别添加质量分数为0.90%、1.80%、3.60%的裙带菜凝集素,1.36%、2.73%、5.45%的孔石莼凝集素,0.47%、0.94%、1.88%的萱藻凝集素,以基础饲料组为对照组,于投喂后第5、10、15、20天检测超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)活性.结果显示,各实验组的SOD、PO活性与对照组比较均有提高,且与对照组有显著性差异(P0.05)和极显著差异(P0.01).投喂1.80%质量浓度裙带菜凝集素组、1.36%质量浓度孔石莼凝集素组、1.88%质量浓度萱藻凝集素组效果最佳.海藻凝集素可作为刺参免疫增强剂使用,建议其适宜添加量为:1.80%裙带菜凝集素、1.36%孔石莼凝集素和1.88%萱藻凝集素.     

三种海藻凝集素对刺参组织免疫酶SOD、PO活性的影响

在基础饲料中分别添加质量分数为0.90%、1.80%、3.60%的裙带菜凝集素,1.36%、2.73%、5.45%的孔石莼凝集素,0.47%、0.94%、1.88%的萱藻凝集素,以基础饲料组为对照组,于投喂后第5、10、15、20天检测超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)活性.结果显示,各实验组的SOD、PO活性与对照组比较均有提高,且与对照组有显著性差异(P<0.05)和极显著差异(P<0.01).投喂1.80%质量浓度裙带菜凝集素组、1.36%质量浓度孔石莼凝集素组、1.88%质量浓度萱藻凝集素组效果最佳.海藻凝集素可作为刺参免疫增强剂使用,建议其适宜添加量为:1.80%裙带菜凝集素、1.36%孔石莼凝集素和1.88%萱藻凝集素.