黄喉鹀、黄雀巨细胞核和层状核的听觉传入联系及反馈环路

本文用HRP顺、逆行追踪方法,研究黄喉鵐、黄雀延髓巨细胞核(NM)及层状核(NL)的听觉传入联系。将HRP微电泳入NM,在同侧听神经、上橄榄核和双侧丘脑内侧螺旋核等处见到逆行标记细胞及纤维。将HRP微电泳入NL,密集的标记细胞分布于双侧NM等处。结果表明,听神经传入巨细胞核,经换元后投射至双侧层状核,巨细胞核还接受上橄榄核和丘脑内侧螺旋核的传入投射。因此,在低位脑干内形成巨细胞核→层状核→上橄榄核→巨细胞核的听觉反馈环路。     

霍乱毒素结合辣根过氧化物酶逆行追踪大鼠幽门括约肌神经纤维

目的:胃幽门括约肌是胃肠动力调控的重要装置和结构,探讨胃幽门括约肌神经纤维的来源,特别是内源性神经元的支配,更好地了解幽门括约肌神经支配与胃肠功能的相互关系.方法:采用霍乱毒素结合辣根过氧化物酶(CB-HRP)逆行神经通路追踪法显示幽门括约肌神经纤维的分布与胞体定位.结果:幽门括约肌处以及胃前壁、胃大弯侧壁肌内均可观察到HRP标记的阳性神经元胞体.小肠、迷走孤束核复合体出现HRP阳性标记细胞.在胃肠壁内观察到HRP标记细胞中的VIP或NO双重标记的存在.结论:幽门括约肌以及胃肠内固有的肠神经系统及外源性自主神经均参与对括约肌调控的神经机制.     

周围神经损伤与修复

本文介绍了周围神经损伤的病因、病理改变、分类以及影响神经修复效果的因素。强调目前临床诊断周围神经损伤的依据是Seddon和Sunderland分类,治疗周围神经损伤主要是借助于显微外科技术尽早修复,神经的修复应无张力下进行。应采用端端吻合修复。自体神经移植仍然是临床治疗长距离损伤的重要手段;当不能采用自体神经移植时,可以应用同种异体神经移植或自体组织移植;可生物降解、人工合成的神经导管在实验中表现出广阔的应用前景。     

小鼠同种异体及异种神经移植后脾脏T淋巴细胞亚群的变化

目的通过化学法萃取的去细胞异体及异种神经移植后,观察移植免疫排斥过程中小鼠脾脏T细胞总数与亚群变化,探讨周围神经缺损修复的可行性。方法BALB/c小鼠随机分成假手术组、新鲜自体神经移植组、新鲜同种异体神经移植组、新鲜异种神经移植组、化学去细胞同种异体神经移植组和化学去细胞异种神经移植组,每组32只。分别在神经移植术后3、71、4、28 d,每组各取8只小鼠脾脏,淋巴细胞分离液获取淋巴细胞,计数。用荧光标记的CD3+、CD4+、CD8+、CD25+单抗作用后,流式细胞仪检测T淋巴细胞及其亚群百分数,Stata7.0统计软件进行统计处理。结果在7 d1、4 d、28 d各时间点上,化学去细胞神经同种异体和异种神经移植组CD3+、CD4+、CD8+、CD25+阳性T细胞百分率与假手术对照组、自体神经移植组相比无显著差异(P>0.05),而新鲜同种异体及异种神经移植组在相同时间点上的CD3+、CD4+、CD8+、CD25+阳性T细胞百分率与假手术对照组、自体神经移植组相比则有明显增高,差异显著(P<0.05)。结论新鲜同种异体周围神经移植后的排斥属于急性排斥反应。化学去细胞处理的同种异体神经的免疫原性等于或接近于自体神经,要明显低于新鲜同种异体神经移植。     

黄雀(Carduslis sipnus)耳蜗核的传入投射—HRP法研究

将辣根过氧化物酶(HRP)微电泳入黄雀的两对耳蜗核——巨细胞核和角状核,观察其逆行标记细胞的分布;将HRP 微电泳入上橄榄核和注入耳蜗,观察顺行标记纤维或终支在耳蜗核中的分布。结果表明,巨细胞核和角状核主要接受耳蜗纤维和丘脑螺旋状内侧核等的传入,此外,巨细胞核还接受其上位核团上橄榄核的传入,后者可能是低位脑干中的听觉反馈回路。巨细胞核和角状核接受不同的传入投射,说明这两对耳蜗核可能司不同的功能。     

黄喉鹀延髓舌下神经核发声控制中枢的神经联系

用辣根过氧化物酶(HRP)顺、逆行追踪技术,研究鸣禽类黄喉(巫鸟)延髓舌下神经核气管鸣管部(nXIIts)的中枢联系。向该核内微电泳入HRP后,发现在中脑背内侧核(DM)及端脑古纹状体粗核(RA)等处有密布的逆行标记细胞;在舌下神经气管鸣管支有标记纤维。结果表明,延髓舌下神经核气管鸣管部接受中脑背内侧核和端脑古纹状体粗核的传入投射;由它发出的轴突组成舌下神经气管鸣管支。因此,黄喉(巫鸟)的舌下神经核气管鸣管部是延髓内发声控制的基本运动神经核团。     

皮瓣在手外伤及畸形修复术后的临床护理

我院干1988年4月以来应用皮瓣修复手外伤及疤痕李绪畸形，共25例。手指离断伤13例，应用双V—Y皮瓣修复。指腹缺损伤7例。应用指掌例前移皮瓣修复6例。应用合指背感觉支及指固有动脉的手指中节f7侧离状皮瓣修复1例。先天性近节指间关节屈挛绩三例（8指）。应用“4V－Y”皮瓣，正畸形。担损及虎口部软组织缺损伤1例，应用部分超薄型前臂逆行岛状皮瓣修复，利m超技部分修复拇指妖组织缺损处。虎口疤痕挛缩略形2例。应用前臂逆行烧动脉岛状神经出瓣f’／复，应川L背皮瓣移植修复大鱼际缺损骨外露1例。术后皮瓣全部成活，外形美观，功能良好，…     

褐云玛瑙螺(Achatina fulica Frussac)嗅触神经中枢内神经元的分布

用辣根过氧化物酶轴突逆行追踪技术,研究了褐云玛瑙螺嗅触神经中枢内神经元的分布。结果表明,神经元分布于脑神经节、口球神经节和足神经节中。脑神经节和口球神经节内的神经元主要分布于同侧,足神经节内的神经元则平均分布于左右两侧。嗅触神经中枢内的神经元多数属于中、小型,只有少数属大型神经元。     

乌鳢尾部神经分泌系统组织化学和HRP法研究

采用辣根过氧化物酶(HRP)法结合乙酰胆碱酯酶(AChE)和单胺氧化酶(MAO)组化方法,对乌鳢尾部神经分沁系统进行了研究。结果如下: 1.在尾部脊髓中可以观察到一些HRP标记的神经分泌细胞和HRP标记末梢。有些标记末梢终止于脊髓中央管,少量终止于腹面脊膜。尾垂体中也有许多HRP标记末梢。2.神经分泌细胞细胞体中的HRP颗粒在电镜下呈圆形、短管状和哑铃状。3.神经分泌细胞体显示AChE活性,并定位于核膜、粗面内质网上。4.神经分泌细胞体周围尚显示MAO活性。     

面神经缺损修复动物模型的应用

临床上面神经缺损的常见原因为面部严重外伤、颞骨骨折和腮腺肿瘤术后,如果缺损距离较长难以通过游离减张进行缝合时,多采用神经移植的方法。为了修复面神经缺损,人们通常采用各种动物来模拟临床实际情况进行研究,并取得了一定的进展。选择标准化的面神经缺损动物模型对于面神经缺损修复的研究很重要。     

大鼠坐骨神经切断后经皮低频高强度电刺激相应脊髓节段中GAP-43表达的变化

目的探讨成年Wister大鼠在坐骨神经切断后GAP-43于相应脊髓节段前角运动神经元内的表达变化.方法选取健康成年雄性Wister大鼠60只,将坐骨神经切断,随机分为实验组和对照组,实验组给予经皮低频高强度电刺激,分别于术后1,2,4,8,12,16周处死,取其L4~L6脊髓,利用免疫组织化学技术检测GAP-43在相应脊髓节段中的表达变化,并利用影像分析系统进行统计学分析.结果对照组:1周时前角细胞胞体内GAP-43有明显表达,4周时达到高峰,5~8周时逐渐下调,9~16周时GAP-43在前角细胞胞体内中仍有少量表达,并呈弱阳性.实验组:1周时前角细胞胞体内GAP-43有明显表达,2周时达到高峰,且在4~16周时在神经元中仍有表达,并呈阳性.结论坐骨神经切断可导致成年大鼠相应脊髓节段中前角运动神经元GAP-43表达明显增加,可证明在周围神经损伤后神经元的再生能力增强,但时效很短.而给予低频高强度电刺激疗法后,GAP-43的表达在时长和量上都有明显增加.     

降钙素基因相关肽在受损SD大鼠面神经运动神经元中的表达与定位

目的：研究降钙素基因相关肽（calcitonin gene—related peptide。CGRV）在面神经损伤后再生过程中面神经运动神经元中的表达变化．方法：健康SD大鼠分别行左侧面神经茎乳孔压榨术,术后饲养3、7、14、21、28、35d,取出脑干含面神经核团部分,用免疫组化及图像分析技术,观察面神经核中的CGRP在面神经再生中的变化．结果：CGRP分布于正常SD大鼠面神经各亚核。面神经损伤后3d。损伤侧的面神经核中CGRP比对照侧增强．图像分析CGRP灰度值与对照侧比较,差异显著（P〈0．05）;损伤后7d达最高峰（P〈0．05）,以后尽管显著表达但渐减．结论：损伤导致CGRP在面神经运动神经元中的表达增加,提示CGRP在面神经再生修复过程中发挥调理作用．     

bFGF对自体神经移植后神经再生和神经元相关性的影响

目的探讨bFGF对自体神经移植后神经再生和神经元相关性的影响。方法切断大白鼠右侧坐骨神经10mm,在原位作神经外膜缝合,实验组注射bFGF100u/d,共10d,对照组注射生理盐水10d,术后12周取材。光镜观察,并计数再生神经纤维和神经元的绝对值,得出恢复率以及用统计学方法得出它们的相关性。结果两组均可见再生神经纤维通过吻合口,并向远端延伸。两组神经再生率与脊髓前角运动细胞或者脊神经节细胞存活率的相关系数均非常接近1,但实验组和对照组的组间相关系数无显著性差异。结论周围神经再生率与相应的脊髓前角运动细胞或者脊神经节细胞存活率之间的正相关关系是固有的,不会随bFGF的使用而改变     

大白鼠坐骨神经再生轴突可塑性的研究——辣根过氧化物酶(HRP)示踪观察

用HRP逆行示踪法,对成年大白鼠两侧坐骨神经端端吻合术后,再生轴突可塑性作了研究。术后1—12月不同时间内,在吻合端左侧0.8cm处,再横断坐骨神经,放入HRP,存活2天,取材观察。结果表明:所有动物脊髓腰骶段两侧前角均出现HRP标记细胞。标记细胞数量随吻合术后时间增长而增加。左侧前角较右侧前角标记细胞多。说明受损的坐骨神经轴突能再生,各自进入对侧的坐骨神经,向脊髓方向延伸。但是,仅部分再生轴突能延伸过缝合处的组织痂。本实验提示再生轴突的可塑性,它受环境因素的影响。     

Dog sciatic nerve gap repaired by artificial tissue nerve graft

The feasibility of repairing dog sciatic nerve damage by using a biodegradable artificial tissue nerve graft enriched with neuroregenerating factors is investigated. The artificial nerve graft was implanted to a 30 mm gap of the sciatic nerve damage in 7 dogs. The dogs with the same nerve damage that were repaired by interposition of the autologous nerve or were given no treatment served as control group 1 or 2, respectively. The observations include gross and morphological observations, immune reaction, electrophysiological examination, fluorescence tracing of the neuron formation and the number of the neurons at the experimental sites, etc. Results showed that 6 months after the implantation of the graft, the regenerated nerve repaired the damage of the sciatic nerve without occurrence of rejection and obvious inflammatory reaction in all 7 dogs, and the function of the sciatic nerve recovered with the nerve conduction velocity of (23.91±11.35)m/s. The regenerated neurons and the forming of axon could be observed under an electron microscope. This proves that artificial tissue nerve graft transplantation can bridge the damaged nerve ends and promote the nerve regeneration.     

Functional regeneration of respiratory pathways after spinal cord injury

Spinal cord injuries often occur at the cervical level above the phrenic motor pools, which innervate the diaphragm. The effects of impaired breathing are a leading cause of death from spinal cord injuries, underscoring the importance of developing strategies to restore respiratory activity. Here we show that, after cervical spinal cord injury, the expression of chondroitin sulphate proteoglycans (CSPGs) associated with the perineuronal net (PNN) is upregulated around the phrenic motor neurons. Digestion of these potently inhibitory extracellular matrix molecules with chondroitinase ABC (denoted ChABC) could, by itself, promote the plasticity of tracts that were spared and restore limited activity to the paralysed diaphragm. However, when combined with a peripheral nerve autograft, ChABC treatment resulted in lengthy regeneration of serotonin-containing axons and other bulbospinal fibres and remarkable recovery of diaphragmatic function. After recovery and initial transection of the graft bridge, there was an unusual, overall increase in tonic electromyographic activity of the diaphragm, suggesting that considerable remodelling of the spinal cord circuitry occurs after regeneration. This increase was followed by complete elimination of the restored activity, proving that regeneration is crucial for the return of function. Overall, these experiments present a way to markedly restore the function of a single muscle after debilitating trauma to the central nervous system, through both promoting the plasticity of spared tracts and regenerating essential pathways.     

辣根过氧化物酶在石墨电极上的固定化及其对H_2O_2的响应

基础电极的选择和酶、抗体、DNA等生物活性分子的固定化方法都是影响生物传感器性能的关键因素.以石墨电极(GE)为基础电极,基于辣根过氧化物酶(HRP)对H2O2氧化邻苯二胺(OPD)生成2,3-二氨基吩嗪(DAP)反应体系的高效催化作用,研究了HRP固定化技术.分别利用再生丝素、聚乙二醇、壳聚糖包埋固定HRP,并以HRP修饰GE为指示电极,通过电位法测定H2O2浓度,对不同的固定化方法进行评价.结果表明,利用再生丝素包埋法制备的HRP/GE电极对H2O2具有更好响应性能,其工作曲线斜率为54.97,检测下限为8.82×10-8 mol.dm-3,线性范围为3.53×10-7～8.82×10-4 mol.dm-3.所提出的HRP/GE具有制备简单、成本低廉、响应快、灵敏度高等优良性能,具有较好的应用前景.     

人发角蛋白桥接周围神经缺损的功能评价

目的通过在神经再生室内植入人发角蛋白,观察神经的功能恢复情况,为桥接周围神经缺损寻求新的替代材料。方法将18只新西兰兔的左侧坐骨神经切断,造成lOmm缺损,实验组用人发角蛋白桥接,对照组用空硅胶管桥接,术后检测坐骨神经功能指数、电生理、腓肠肌湿重,观察神经功能的恢复情况。结果8周时,试验组坐骨神经功能指数值优于对照组（P〈0．01）;12周时,试验组坐骨神经功能指数、潜伏期和神经传导速度及波幅明显好于对照组（P〈0．01）。结论人发角蛋白能促进兔坐骨神经功能的恢复是桥接周围神经缺损的理想材料。