一个新C2H2型锌指蛋白的功能的初步研究

通过筛选人18周胎脑cDNA文库,得到一条编码332AA的全长新基因,生物信息学研究表明,该蛋白质序列有2个C2H2型锌指结构,其中1个锌指结构有RNA－binding蛋白特异锌指的特征,虽然同源比较发现与多种蛋白质精氨酸N端转甲基酶（protein arginine N-methyltransferase) 有一定的同源性,但新锌指蛋白不含转甲基酶的活性功能区域,属功能未知的基因,利用芯片研究功能未知基因的表达是一种较好的手段,通过代谢增强剂PMA（phorbol myristae acetate)刺激培养的血管内皮细胞,观察细胞受激活后新锌指蛋白基因的表达变化,结果表明新基因表达量提高了11倍以上,证实新基因属内皮细胞的极早期应答基因（Immediate early response gene,ERG)。     

人C2H2型锌指蛋白基因ZNF194全长cDNA的克隆

用一个含有锌指编码序列的人ｃＤＮＡ片段（Ｌ２￣９）作为探针杂交筛选人肝组织ｃＤＮＡ分子库，得到８个杂交阳性克隆，经测序和拼接后，将其整合为一条长１８３８ｂｐ和ｃＤＮＡ序列，该序列的２２１￣１６４２ｂｐ为一个完整的开放阅读框，编码了一个由４７３个氨基酸组成的蛋白质，１￣２２０ｂｐ为５′－ＵＴＲ，１６４３￣１８３８ｂｐ为３′－ＵＴＲ，在１８０１￣１８０６ｂｐ有一个加尾信号序列ＡＡＴＡＡＡ，３′端为１８     

水稻C2H2型锌指蛋白OsZAT12转化拟南芥功能的初步研究

摘要：植物C2H2型锌指蛋白是植物转录调节因子中的大家族,通过转录调控、翻译后调节和蛋白质间的相互作用在植物发育和环境胁迫中发挥关键作用. 本研究在水稻基因组中克隆到一个C2H2型锌指蛋白,命名为OsZAT12. 生物信息学分析显示OsZAT12全长597bp,其中不包含内含子,其蛋白质序列含有199个氨基酸,具有两个典型的C2H2锌指结构. OsZAT12蛋白定位于细胞核,在根中特异性表达.过表达拟南芥植株与野生型比较,其根变短,子叶的变绿率明显降低,植株矮小.初步推断OsZAT12可能影响植物生长发育尤其是根的伸长.     

大鼠小脑特异基因Zic的克隆、序列分析和初步表达

EST（AW055732）片段是SD大鼠脑内一特异表达基因cDNA的3‘-端片段,与小鼠和人的Zic基因同源。基于小鼠及人的Zic基因的同源序列,设计引物用PCR方法从SD大鼠中克隆得到该基因的编码区序列（rZic)。该基因编码一锌指蛋白,其锌指结构域与线虫的tra-1基因,果蝇的ci^D基因。人的Gli癌基因和果蝇的opa基因的锌指结构域高度同源,用RT－PCR方法分析了rZic基因在大鼠脑区分布状况。结果表明,rZic基因在小脑中高表达。将该rZic基因克隆至带有6个组氨酸的表达载体pET-32a( )中,用IPTG诱导rZic融合蛋白在大肠杆菌BL21菌株中表达,诱导后重组蛋白质占菌体总蛋白的20．8％。     

中国人群eNOS基因内含子13微卫星多态性的初步研究

目的：为研究ｅＮＯＳ基因内含子１３上的微卫星序列与妊高症的相关性。方法：采用ＰＣＲ－ＰＡＧＥ与银染相结合的方法，研究其多态性。结果：得到含有该微卫星序列的ＤＮＡ片段。结论：证实在中国人群中ｅＮＯＳ基因内含子１３上的确存在一个ＣＡ重复的多态性微卫星序列，从而为研究该位点与妊高病的相关性提供了技术支持和理论依据。     

人超氧化物歧化酶-过氧化氢酶融合基因的构建、表达及其产物的初步纯化和性质研究

尝试应用基因工程技术制备一种兼具人超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的双功能融合蛋白CAT-PTD-SOD,其中的PTD是序列为RKKRRQRRR的短肽.首先通过重叠PCR构筑CAT-PTD-SOD融合基因,然后把该基因转化进入大肠杆菌表达菌株Rosetta 2(DE3)菌株.通过SDS-PAGE、CAT和SOD活性分析以及分离纯化组分的分析确认该重组菌株能够表达CAT-PTD-SOD,其表达量可达总蛋白的8.9%,SDS-PAGE显示其分子量约为85 kD.可溶性实验发现该融合蛋白大部分以兼具SOD和CAT活性的可溶形式存在.抗H2O2能力实验表明CAT-PTD-SOD具有很好的抗H2O2能力,在0.033 mol.L-1、甚至0.067 mol.L-1的H2O2溶液中,其SOD活性20 min内无明显下降.     

H2O2—Fe^2＋催化氧化法处理制药工业有机废水的初步研究

本文对采用H_2O_2—Fe~(2 )催化氧化法处理有机污染废水进行了初步探索.参照国内外相关课题,研究了H_2O_2用量,FeSO_4用量,pH值和氧化时间对处理效果的影响,选定了氧化处理操作条件,并对制药工业实排有机废水进行了小型处理实验,效果是今人满意的.     

活性氯—过氧化氢氧化光泽精发光的研究

通过研究光泽精—H_2O_2和光泽精—ClO~-—H_2O_2化学发光反应的动力学曲线、吸收光谱以及化学发光光谱,提出了光泽精—ClO~-—H_2O_2化学发光反应的机理.还就温度和反应试剂的浓度对化学发光强度的影响进行了试验和讨论.     

活性染料废水催化氧化脱色新方法研究

利用H2O2/Fe2＋光助催化氧化,对活性艳红X-3B的染液模拟废水及印染厂活性染料的实际废水进行脱色研究,讨论了影响因素和控制条件。研究结果表明,本方法对活性染料废水脱色有较好的效果。     

纳米氧化锡催化烯烃液相环氧化反应的研究

采用自制的纳米SnO2为催化剂,以环境友好的H2O2（30％）为氧源,考察其催化烯烃环氧化的反应效果．通过FT-IR取光谱、UV—Vis光谱、XRD和TEM对SnO2催化剂进行了表征．研究发现纳米SnO2对烯烃的液相环氧化具有非常好的催化效果,并以环己烯为例对反应条件做了相关探讨实验结果表明,在温度为50℃,H22Q与环己烯摩尔比为1．2时,烯烃转化率达到99．9％,环氧选择性高达98．1％．且催化剂循环使用9次催化活性没有发生明显变化．     

AtOSAK1在植物氧化胁迫响应中的功能研究

植物类蛋白激酶ABC1家族(Activity of bc1 complex)在植物生长发育及响应非生物胁迫中扮演着重要的作用。我们克隆并研究了ABC1家族中一个的基因AtOSAK1。半定量RT-PCR及启动子驱动GUS报告基因分析显示,AtOSAK1基因的表达无组织特异性,并且主要受甲基紫精(MV)的诱导表达。AtOSAK1-GFP亚细胞定位显示,AtOSAK1是一个定位在叶绿体中的蛋白。不同浓度MV处理条件下,过表达AtOSAK1植株的种子萌发率和存活率比野生型(Col-0)和突变体osak1高。这些研究表明,AtOSAK1基因参与了抗氧化胁迫的响应.     

水稻产量基因网络的初步研究

产量是作物育种的首要目标。采用多个品种、多个对照品种对其蛋白质组学进行了解析,iTRAQ分析表明,水稻叶片和幼穗中有数万个功能蛋白表达,按照表达强度和产量的关联程度,鉴定了33个对产量有重要贡献的蛋白质,其中淀粉合成酶、种子储藏蛋白是产量构成的重要成分,采用酶活性、产量形成对糖苷合成酶及其基因调控网络进行了验证,对重要农艺性状基因克隆、基因网络重构等进行了讨论。     

F-box基因FOF2在拟南芥盐和冷胁迫响应中的功能分析

FOF2为F-box蛋白家族成员,其生物学功能尚不清楚.采用实时荧光定量PCR和生理学实验相结合的方法,对FOF2基因的表达模式及其在拟南芥抗盐和冷胁迫响应中的作用进行了分析.研究发现,FOF2在拟南芥根、茎生叶和果荚中表达较高,并且其表达受盐和冷胁迫诱导.FOF2过表达株系对盐胁迫敏感,与野生型相比种子萌发率低、幼苗主根较短;相反,fof2突变体对盐胁迫的敏感性则减弱.FOF2过表达和缺失突变体种子萌发对冷胁迫无响应,但其主根在冷处理中分别比野生型短或者长.盐处理下,FOF2过表达株系中盐胁迫反应相关基因的表达量显著降低,fof2突变体中则升高;冷处理下,FOF2过表达株系中冷胁迫反应相关基因的表达量显著升高,fof2突变体中则降低.结果表明,FOF2在植物抗盐胁迫响应中起负调控作用,在抗冷胁迫响应中则可能起正调控作用.     

内源抗环血酸对水稻叶片抗氧化胁迫的影响

本文以野生型（WT）水稻（Oryza sativa）品种中花11(ZH-11)和利用转基因技术已经构建获得的抗坏血酸合成关键酶GLDH基因的上调（超表达）株系GO-2及下调（干涉）株系GI-2的离体叶片为实验材料,用甲基紫精（MV）高光诱导的光氧化胁迫处理,研究内源抗环血酸对水稻叶片抗光氧化能力的影响。MV高光处理后,GO-2水稻叶片的超氧阴离子和过氧化氢含量明显低于ZH-11和GI-2。水稻叶片的膜脂过氧化加剧,可溶性蛋白发生了降解,其中GI-2受到的影响最大。叶绿素荧光相关参数的变化体现了超表达的优势。结果显示抗坏血酸含量高的超表达株系GO-2具有更强的抗氧化胁迫能力,而干涉型株系GI-2的抗氧化胁迫能力最差。本实验说明了内源抗坏血酸能明显增强水稻抗氧化能力。     

天津市居民对噪声社会反应的初步研究

随着经济和社会的发展，中国大城市中的噪声问题日益突出，因此用科学和国际化的研究方法来探讨城市居民所处的声环境及居民对噪声的社会反应有着现实的必要性．文中主要针对天津市的声环境和居民对噪声问题的认识及态度，对不同年龄层次和性别的市民进行了1000多份问卷调查，同时利用国际上推行的噪声主观评价方法初步建立了天津市居民对道路噪声社会反应的关系曲线．     

一个水稻抗纹枯病突变体的遗传分析及其基因的初步定位

高水平抗纹枯病突变体和高感纹枯病品种蜀恢881杂交构建分离群体,经F2分离世代的遗传分析,抗、感单株比例符合3 1(χc2=0.563,χ12,0.05=3.84),初步确定该突变体对纹枯病的抗性由一对显性主效基因所控制,命名为Rsb-2(t)。利用已合成的530对微卫星引物,对抗纹枯病突变体和蜀恢881进行多态性引物筛选,用多态性引物对上述F2分离群体的全部感病单株和部分抗病单株的DNA进行PCR分析,借助MAPERMAKER/EXP3.0软件,对其微卫星标记实验数据进行连锁分析,将Rsb-2(t)定位于第3染色体的p臂,发现RM218、RM251、RM4321和RM5748与Rsb-2(t)连锁,它们均位于着丝粒端,连锁距离分别为32.1 cM,41.1 cM,42.4 cM和49.7 cM。研究结果为进一步对该基因的精细定位奠定了基础。     

一个与人类待定肿瘤抑制基因同源的水稻基因的分离

从水稻基因文库中筛选到一个与人类待定肿瘤抑制基因QM同源的基因,命名为OSQM2．该基因片断长为3．1kb,编码一个具有184个氨基酸的高度碱性的蛋白质,与其他已知QM基因相比,该基因具有一个非常特殊的启动子,包含许多在植物中已发现的与抗逆有关的顺式作用因子,如：“G盒”,“DRE盒”,“MYC盒”等,故而该基因有可能是一个新的受环境胁迫因子诱导的基因,Southern杂交表明它以单拷贝形式存在于基因组中。     

福建省水稻气候生产潜力浅析

以福州、云霄、寿宁、龙岩四种县市为例,研究了福建省主要粮食作物水稳的生产潜力,运用光、温、水生产潜力计算法、迈阿密及瓦格尼根法三种计算方法对气候生产潜力进行测算,评定了水稻生产现有投入水平（仅处于中等投入水平）,分析了水稻生产态势及增产潜力,并探讨了可采取的对策和措施。     

干旱胁迫条件下植物渗透调节的研究

用P-V曲线技术研究了三种海滨木本植物在干旱胁迫条件下渗透调节的能力。结果表明经干旱处理植物水饱和时的渗透势和初始质壁分离时的渗透势都降低。而抗旱能力较强的桉属植物钝叶桉(Eucalyptus obtusifolia)和产胶桉(Eucazyptus gummifera)的ψ_x~(100)和ψ_x~0处于较低水平。与Epacris obtusifolia相比,它们在叶水势和土壤水势较低时,仍然可维持组织的紧涨和较高的叶导性。