蛋白双酶（胰蛋白酶—木瓜蛋白酶）的固定化研究

以脱乙酰壳多糖为载体、戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的固定化条件及固定化双酶的动力学性质进行了研究。实验对比了交联剂的用量、交联的ＰＨ值、温度及载体与酶的比例等因素对固定化的影响。     

胰蛋白酶水解酪蛋白所得产物抗菌活性的研究

利用胰蛋白酶水解酪蛋白,并对水解产物进行了分离,得到产物1、2、3,比较不同水解度条件下各种产物的抗菌活性;摸索培养基起始pH值、水解产物添加量对抗菌活性的影响.结果表明在37℃、底物浓度为10%时,三种水解产物的抗菌活性均随着水解度的增大而增大,并最终趋于平缓,产物3的抗菌活性最好;培养基起始pH值为8.0时,30 mL培养基中水解产物添加量达到2 mL时,水解产物的抗菌效果有较大提高.     

蛋白双酶（胰蛋白酶─木瓜蛋白酶）的固定化研究

以脱乙酰壳多糖为载体，戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的固定化条件及固定化双酶的动力学性质进行研究．实验对比了交联剂的用量、交联的ｐＨ值、温度及载体与酶的比例等因素对固定化的影响．确定了固定化双酶的催化特性：最适ｐＨ７．５～８．１，最适温度是６０℃，Ｋｍ值是０．５２ｍｇ／ｍｌ，并对固定化双酶的热稳定性、固定化双酶的活性与固定化单酶的活性进行了比较．     

木瓜蛋白酶酶解豌豆蛋白挤出物产物自由基清除活性评价

以豌豆蛋白为原料,经过挤压处理得到挤出物.利用木瓜蛋白酶对其进行酶解,通过响应曲面实验对酶解条件进行优化设计.对酶解产物的抗氧化性质进行研究,得出如下结论:木瓜蛋白酶酶解最佳条件为加酶量12.1%(E/S)、温度60.6℃、pH 6.50、底物质量浓度0.071g/mL.在此条件下,DPPH清除率、·OH清除率预测值分别为98.3%、84.7%.经验证,得到最佳DPPH清除率、·OH清除率分别为98.2±0.21%、84.5±0.15%,所建模型预测准确可靠,酶解产物抗氧化性高.     

环状溴翁盐免疫活性初探

实验小鼠腹腔注射环状溴翁盐５ｍｇ／ｋｇ后，发现使脾抗体分泌细胞和循环抗体水平提高；腹腔巨噬细胞吞噬活性增强；外周血Ｔ淋巴细胞Ｅ－ＲＦＣ阳性率上升；并使被环磷酰胺损伤小鼠的免疫功能得以恢复。提示它具免疫增强活性。     

木瓜蛋白酶酶解辅助提取葛根中的有效成分研究

文章对木瓜蛋白酶酶解辅助提取葛根中的有效成分进行了研究。以葛根素及葛根总黄酮得率为指标,采用单因素实验法筛选了酶解时间、酶质量分数、酶解温度、酶解pH值等;采用综合加权评分法进行数据分析,以葛根素及葛根总黄酮得率为综合评价指标,对酶解时间、酶质量分数、酶解温度三个主要影响因素进行了正交试验的筛选。文章首次选用木瓜蛋白酶酶解的方法,对葛根中的有效成分进行了辅助提取,并确定了其最佳提取工艺条件。实验结果表明:酶解pH值为6,酶质量分数为2%,酶解温度为60℃,酶解时间为4h时,木瓜蛋白酶酶解辅助提取葛根中有效成分的效果为最佳。     

毛蚶及其酶解产物的功能性评价和比较

目的:对毛蚶及其胰蛋白酶水解产物进行功能性评价和比较。方法:通过正交实验优化胰蛋白酶水解条件,并对毛蚶水解产物和毛蚶进行蛋白含量、氨基酸成分和抗氧化活性的检测和比较。结果:通过胰蛋白酶的水解,毛蚶的营养价值和肽含量明显提高,并表现出更强的抗氧化活性。结论:胰蛋白酶处理过的毛蚶具有更明显的药用活性,为进一步研究后者的药用价值提供依据。     

β─环糊精对酪蛋白乳化活性的影响

β─环糊精通过与酪蛋白形成包接复合物，对其分子的空间构象、伸展性及疏水性产生调整。这些作用使得做为乳化剂的β─环糊精─酪蛋白色接复合物在Ｏ／Ｗ乳化体系中更有利于形成高度分散及稳定的分散相液滴。表现为乳化体系乳化活性的增加。     

水蛭的酶解及其产物抗凝血活性评价

以水蛭为原料,研究不同酶解因素(酶种类、酶用量、酶解时间、pH值、酶解温度、底物浓度)对水蛭酶解产物抗凝血活性的影响规律,优化水蛭的酶解技术参数,并对酶解产物进行活性评价;研究结果表明,优化后的酶解技术条件为,适宜的水解酶为胰蛋白酶,酶用量7000 U/g,酶解时间7 h,酶解pH 8.3,酶解温度50℃,底物浓度14%(w/w)。在该条件下得到的酶解产物抗凝血酶活性最高,达到640 U/g。     

酶解鱿鱼蛋白的制备

探讨了中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白、酶菠萝蛋白酶以及复合蛋白酶对鱿鱼蛋白的酶解效果.实验结果表明,在相同水解条件下,复合酶对鱿鱼蛋白的水解效果优于单酶,确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为水解鱿鱼蛋白的适宜水解酶,两种酶量的比例为1:1,正交实验得出最佳水解条件为:温度50℃、pH7、时间8 h、加酶量6 000IU/g.     

无花果蛋白酶与木瓜蛋白酶酶学性质的比较

比较了无花果蛋白酶和木瓜蛋白酶的部分酶学性质, 二者均为巯基蛋白酶类, 且水解底物相似. 实验结果表明, 无花果蛋白酶比木瓜蛋白酶的适用性更广, 两者在反应温度范围上各有优点, 无花果蛋白酶的适宜pH值范围大于木瓜蛋白酶的适宜pH值范围; 在对底物的亲合性上, 无花果蛋白酶明显高于木瓜蛋白酶.     

催化共振散射光谱法测定木瓜蛋白酶活力

木瓜蛋白酶催化水解酪蛋白生成小分子氨基酸和肽,剩余底物酪蛋白与三氯乙酸结合形成粒径约为1740nm的缔合物微粒。该微粒在360、400、420、470、520nm处产生5个共振散射峰,其中最强峰位于470nm。在选定条件下,随着木瓜蛋白酶量的增加,体系中剩余酪蛋白浓度降低,470nm处的共振散射光强度,Ⅰ470nm降低。木瓜蛋白酶的酶活力在0．024～4．8 USP／mL范围内与470nm处的共振散射光强度降低值△Ⅰ470nm呈现良好线性关系,检出限为0．0083 USP／mL。该共振散射光谱法用于嫩肉粉中木瓜蛋白酶活力测定,结果满意。     

酪蛋白磷酸肽的制备及性质

用不同的蛋白水解酶水解牛乳酪蛋白,通过钙－乙醇沉淀法和离子交换法从水解产物中提取酪蛋白磷酸肽（ＣＰＰｓ）,并对ＣＰＰｓ进行体外化学分析及体内生物学功能鉴定,结果表明：用双酶法（胰蛋白酶和Ａｌｃａｌａｓｅ）制得的ＣＰＰｓ３（平均相对分子质量为４ ０６６,摩尔Ｎ／Ｐ为５．４８）在体外的持钙能力最强,连续喂食该样品的小鼠对钙的吸收明显提高（吸收率达５６％ ）。     

椰壳活性炭共价固载木瓜蛋白酶的研究

将椰壳活性炭进行可控氧化及硅烷偶联剂（APTMs）反应后,与戊二醛交联,成功地共价固载了木瓜蛋白酶．木瓜蛋白酶固载量为15mg／g,固载酶的最佳活性pH值为7．4,温度为50℃．与游离酶相比,固定化酶的温度、pH稳定性明显提高．溶液酶和固定化酶的Km分别为0．86mol／L和0．95mol／L,Vm分别为0．603和0．528mol·s^-1·g^-1．     

木瓜蛋白酶对壳聚糖的降解特性

研究木瓜蛋白酶催化壳聚糖降解过程中，温度、pH值、酶量、底物质量浓度以及脱乙酰度等条件对降解速率的影响，并通过计算机随机模拟试验，求出壳聚糖的脱乙酰度与GlcNAc-G1cN糖苷键相对含量的关系．结果表明，木瓜蛋白酶只选择性地降解GlcNAc-G1cN糖苷键，反应最适pH值和温度分别为4．5和45℃．     

用絮凝和超滤技术纯化木瓜蛋白酶

用无毒性的絮凝剂ｆｃ－１与无机助凝剂ｆｃ－２对木瓜乳胶水溶液预处理，然后用中空纤维超滤膜进行超滤浓缩，实验结果表明，用絮凝法预处理时，当絮凝条件为ｆｃ－１和ｆｃ－２各为０．２ｇ／Ｌ，ｐＨ为５．０￣５．５时，既解决了膜易污染的问题，又使木瓜酶得到了有效的纯化。在形成浓差极化－凝胶层的情况下，超滤速度随透出液体积和主体溶液浓度增大而减小，随料液错流速率的增大而增大，絮凝预处理有利于超滤速度的提高。     

两步法活化微晶纤维素及在固定木瓜蛋白酶中的应用

微晶纤维素经过两步活化,可在温和条件下实现木瓜蛋白酶固定化,用对甲基苯碘酰氯活化微晶纤维素后,与乙二胺反向载体引入有机胺基因,再用戊二醒处理所得的二次活化载体可在温和条件固定木瓜蛋白酶,所得固定化酶活力为103U／g载体,与溶液酶比较,热稳定性有明显提高。     

枯草杆菌蛋白酶水解大豆胰蛋白酶抑制剂的研究

采用改进的BAPNA法探讨了枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制的水解作用,通过实验了最适反应条件为：反应温度40－60,PH值7．5－8．5,酶活力大于等于40000units/mL以及40min的反应时间。     

固定化胰蛋白酶的制备及其性质研究

以EDTA-Sephadex G-50作载体,戊二醛为交联剂,对胰蛋白酶进行固定化.IR光谱结果显示:该项生化技术使胰蛋白酶得到了有效的固定,并且实现了较好的纯化,同时研究了固定化胰蛋白酶的一些性质,最适温度60℃,最适pH8.0,热稳定性,pH贮存稳定性以及对盐酸胍的稳定性均明显高于天然胰蛋白酶.