草鱼前体脂肪细胞原代、传代培养及鉴定(动物科学)

建立草鱼（Ctenopharyngodon idellus）前体脂肪细胞的培养体系，体外重现草鱼脂肪细胞的增殖分化过程。实验采用油红O染色法对脂肪细胞进行鉴定；采用倒置显微镜（NIKON）和CCD对细胞进行观察摄像；选用的健康草鱼体重为I800-900 g；利用体外组织培养技术在温度为28℃，CO2浓度为5%，血清浓度为20%，pH值为7.0 - 7.2的条件下，以DMEM/F12培养基对来源于草鱼腹腔的脂肪组织进行原代培养；单层的原代培养细胞达到瓶底面积的70%-80%且汇合时，对细胞进行传代培养。研究发现在本实验条件下，培养48 h后组织块周围有梭形细胞迁出；3 d后细胞数量增多，多为梭形和多边形；培养8 d后大部分细胞融合；细胞内脂滴可被亲脂的油红O着色，证明为脂肪细胞。对融合后的细胞进行传代培养，可传至第4代；传代第3 d 可形成致密单层；第8 d胞质内含有大量脂滴。研究初步确立了较为适宜的草鱼前体脂肪细胞离体培养体系。

The Primary and Subculture and Identification of Grass Carp Preadipocyte from Adipose Tissue