人肝癌细胞系HepG2生物学特性分析

人肝癌细胞系HepG2是进行抗癌药物检测及肝细胞生理性状研究的重要细胞系.充分了解该细胞系的生长增殖和遗传特性,对于细胞系的应用具有重要意义.本研究对体外连续传代培养的HepG2细胞,进行了生长曲线、分裂指数、染色体核型等生物学特性分析.结果表明:HepG2细胞在体外培养条件下,生长曲线呈典型的S形,群体倍增时间为24 h;分裂指数最高达4.5%;染色体数目为41～114,染色体众数为54～69(80%).     

利用PCR-DGGE技术分析微生态制剂在传代过程中的菌群变化

利用变性梯度凝胶电泳（denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE）技术,结合传统平板培养法对实验室研制的1种由乳酸菌和芽孢杆菌组成的微生态菌剂WS-401及其在连续转接培养过程中细菌种群组成的动态变化进行分析。WS-401原液的活菌数为2×107 cfu/mL,且细胞个体形态多样。将分离自原液的3株细菌进行DGGE分析,出现2种指纹谱带,对照标准的DGGE指纹图谱库和序列分析,分别被鉴定为蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）和嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）。将该菌剂分别在LB和MRS两种培养基中30℃或37℃连续转接5次,DGGE分析每次转接后培养物的菌群组成,结果发现,随着转接次数的增加,微生物菌群的种类减少,在LB培养基中转接5次后优势菌群只有蜡状芽胞杆菌,而在MRS培养基中转接后优势菌群为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和类干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）。由此说明,微生物的营养基质和培养条件对微生态制剂在传代过程中的菌群组成和动态变化有重要影响。     

浅谈微生物的纯培养

自然界中的各种微生物混杂生活在一起，即使取少量的样品也是许多微生物共存的全体。厌氧微生物的分离和培养有其特殊性，主要是采用各种方法使它们处于没有氧的环境或氧化还原电位的条件下进行的培养。需要用适应的方法将菌种进行长期保藏，以便随时使用。因此菌种保藏是微生物生物学工作者的基础工作。     

毛冠鹿一种新核型及C—带分析

采用原代和传代细胞培养技术对毛冠鹿－雌性胚胎肺细胞进行了染色体研究，结果表明：染色体众数为２ｎ＝４８，核型公式为２Ｍ＋２ＳＴ＋４４Ｔ；首次发现两条大型末端着丝粒染色体（无次缢痕），Ｃ－带显示该对染色体的异染色质丰富，约占臂长３／５。是毛冠鹿的又一种新核型，并就相关问题进行了讨论。     

原代HUVECs分离培养关键影响因素分析

内皮细胞与心脑血管病变和癌症发生密切相关,人脐静脉内皮细胞(HUVECs)是最佳的研究工具.针对影响原代HUVECs培养的主要因素提出解决办法,建立稳定可靠的原代HUVECs培养方法.方法是取自剖宫产手术的脐带,消化法分离HUVECs,M199培养传代.针对消化条件、培养液、培养瓶/板处理、传代时间、胰酶浓度等因素考察.结果表明培养瓶/板预先2%明胶包被,采用I型胶原酶分离消化,含10%胎牛血清的M199培养,24h后换液,细胞生长至紧密后传代,O.05%胰酶传代消化,取4～5代细胞用于实验.认为经过控制原代HUVECs培养的主要影响因素,建立了不易污染、纯活度高的原代HUVECs培养方法.     

中华鳖心肌有限细胞系的建立及其生物学特性

首次对中华鳖的心肌细胞进行了体外原代和传代培养获得成功。并对其细胞形态,生长速率等细胞生物学特性以及温度和ＰＨ值对细胞生长的影响进行了观察研究。     

体外传代培养对RPE细胞免疫活性的影响

目的 研究体外传代培养对人类视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelialium,HRPE)细胞免疫活性的影响.方法 采用流式细胞术检测原代及传代HRPE细胞(第1、2、3、4、5、6代)表面HLA-ABC、HLA-DR和ICAM-1表达的变化.结果 HRPE细胞基础性表达HLA-ABC,低表达HLA-DR和ICAM-1;体外传代培养时HRPE细胞HLA-ABC表达下调,表达量与传代代数呈负相关(阳性细胞率r=-0.924,P＜0.001;平均荧光强度r=-0.820,P＜0.001);体外传代培养时HRPE细胞ICAM-1表达上调,表达量与传代代数呈正相关(阳性细胞率r=0.914,P＜0.001;平均荧光强度r=0.828,P＜0.001).结论 HRPE细胞移植排斥反应主要是慢性排斥反应;应用体外传代培养HRPE细胞移植时可降低急性排斥反应的发生率,但增高慢性排斥反应的发生率.     

毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)一种新核型及C-带分析

采用原代和传代细胞培养技术对毛冠鹿一雌性胚胎肺细胞进行了染色体研究，结果表明：染色体众数为２ｎ＝４８，核型公式为２Ｍ＋２ＳＴ＋４４Ｔ；首次发现两条大型末端着丝粒染色体（无次缢痕），Ｃ－带显示该对染色体的异染色质丰富，约占臂长３／５．是毛冠鹿的又一种新核型，并就相关问题进行了讨论．     

不同部位角膜上皮细胞体外增殖性的对比研究

为观察角膜缘、角膜周连及角膜中央部上皮细胞体外增殖的规律，确定角膜干细胞以选取体外培养角膜上皮细胞的部位。应用溴代脱氧尿嘧啶（Ｂｒｄｕ，胸腺嘧啶的类似物）掺入ＤＮＡ合成，抗－Ｂｒｄｕ单克隆免疫荧光抗体记标记细胞法，在流式细胞仪（ＦＡＣＳｔａｒ＾ｐｌｎｓ）上检测体培养的每一代角膜中央部、周边部及角膜缘上皮细胞增殖的情况。结果显示从第一代开始，角膜缘→角膜周边→角膜中央部上皮细胞增殖率逐渐递减；角膜缘