| 定点突变提高豆豉纤溶酶的酶活力和底物特异性的研究 |
| |
| 引用本文： | 崔堂兵,郭勇,罗文华,舒薇.定点突变提高豆豉纤溶酶的酶活力和底物特异性的研究[J].自然科学进展,2008,18(7):826-832. |
| |
| 作者姓名： | 崔堂兵 郭勇 罗文华 舒薇 |
| |
| 作者单位： | 1. 华南理工大学生物科学与工程学院,广州,510640
2. 华南农业大学分析测试中心,广州,510640 |
| |
| 摘 要： | 以pBE—DFE质粒为模板，采用反向长距离PCR技术对豆豉纤溶酶(Douchi Fibrinolytic Enzyme，DFE)基因进行定点突变，使位于酶的底物结合区第156位的谷氨酸和第166位的甘氨酸分别替换为丝氨酸和丙氨酸，使临近酶的底物结合区的第169位甘氨酸残基替换为丙氨酸，获得了三个突变体E156S,G166A和G169A.将含突变基因的表达载体转化枯草杆菌WB800，构建了豆豉纤溶酶基因突变体的表达菌株WB800(E156S)；WB800(G166A)和WB800(G166A).将3种表达菌株进行液体发酵培养，结果发现发酵上清液中纤溶酶的纤溶活性为460,790和900U/mL，分别是未突变酶活性(660U/mL)的70%，115%和136%；3种突变酶对合成底物的H-D-Val-Leu-Lys-pNA的酰胺水解活性是未突变酶的17%，125%和121%.
|
| 关 键 词： | 豆豉纤溶酶 定点突变 酶活力 特异性 定点突变 豆豉纤溶酶 酶活力 底物特异性 水解活性 酰胺 合成 酶活性 纤溶活性 上清液 液体发酵培养 发现 结果 菌株 表达载体 基因突变体 枯草杆菌 转化 突变基因 残基 |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《自然科学进展》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《自然科学进展》下载免费的PDF全文 |
|
