| 深黄被孢霉Δ12-脂肪酸脱氢酶基因RNAi表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 丁丽娜,胡彬彬,林连兵,季秀玲,魏云林,张琦.深黄被孢霉Δ12-脂肪酸脱氢酶基因RNAi表达载体的构建[J].云南大学学报(自然科学版),2012,0(2):242-248. |
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| 作者姓名： | 丁丽娜 胡彬彬 林连兵 季秀玲 魏云林 张琦 |
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| 作者单位： | 昆明理工大学生命科学与技术学院生物工程技术研究中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31160016);云南省应用基础研究基金资助项目(KKSA201126005) |
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| 摘 要： | 深黄被孢霉是国内研究生产γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,GLA)和花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)等多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)的主要产油丝状真菌.前期的实验结果表明,深黄被孢霉M6-22具有潮霉素抗性,而且目前也没有关于深黄被孢霉营养缺陷型菌株的报道,限制了一些基于深黄被孢霉菌株进行遗传操作的研究.研究以红色荧光蛋白DsRED基因作为报告基因,构建能同时用于丝状真菌外源基因和RNAi表达载体pS-DsRED.通过PEG/CaCl2原生质体转化法将pS-DsRED导入深黄被孢霉M6-22中进行表达,成功获得产粉红色的阳性菌落,并在此基础上构建了深黄被孢霉Δ12-脂肪酸脱氢酶基因RNAi表达质粒pSREDMID12RNAi,为下一步目的基因的敲除和基因功能分析奠定了基础.
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| 关 键 词： | 深黄被孢霉 DsRED筛选标记 RNAi表达载体 Δ12-脂肪酸脱氢酶基因 |
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