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抗人FXYD3单克隆抗体的制备与初步鉴定
引用本文:马焕先,高丽杰,张爱群,周宁新.抗人FXYD3单克隆抗体的制备与初步鉴定[J].科学技术与工程,2011(25).
作者姓名:马焕先  高丽杰  张爱群  周宁新
作者单位:1. 解放军总医院肝胆外科,北京,100853
2. 解放军总医院野战外科研究所,北京,100853
3. 第二炮兵总医院肝胆胃肠病研究所,北京,100088
摘    要:【摘要】目的 制备抗人FXYD3单克隆抗体(McAb)并鉴定其生物学特性。方法 以固相合成法获得的FXYD3合成多肽与载体蛋白KLH偶联后免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗人FXYD3 McAb。用ELISA 、Western Blot、免疫组化技术对抗人FXYD3 McAb的亚型、效价、亲和力及特异性进行鉴定。结果 筛选出两段较好的优势抗原表位,分别为NDLEDKNSPFY和KFGQKSGHHPGETPPLITPGSA获得四株可稳定分泌抗人FXYD3 McAb的杂交瘤细胞株02A12C4、02F1E8、02E6B10与03A10E11,亚型鉴定重链均为IgG1,轻链为kappa链。间接ELISA法测定效价均在为1∶104以上。其中02F1E8效价为1∶105以上,亲和常数为3.11?08 L / mol。免疫组化分析显示了FXYD3均匀分布于肝癌细胞与人胰腺癌Bxpc-3细胞系细胞的胞膜上。结论 成功制备了四株抗人FXYD3 McAb,其中02F1E8纯度好、效价高及特异性强。为进一步研究FXYD3在肿瘤组织及细胞系中的表达及临床意义奠定了基础。

关 键 词:离子通道调节子  FXYD3  杂交瘤细胞  单克隆抗体
收稿时间:5/19/2011 5:13:10 PM
修稿时间:5/30/2011 8:00:21 AM

Preparation and preliminary identification of monoclonal antibody against human FXYD3
ma huan xian,gao li jie,zhang ai qun and zhou ning xin.Preparation and preliminary identification of monoclonal antibody against human FXYD3[J].Science Technology and Engineering,2011(25).
Authors:ma huan xian  gao li jie  zhang ai qun and zhou ning xin
Institution:2Institute of Field Surgery,Chinese PLA General Hospital,2Institute of Field Surgery,Chinese PLA General Hospital,The Second Artillery Hospital of PLA
Abstract:
Keywords:Ion transport regulator  FXYD3  Hybridoma  Monoclonal antibody
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