血清miRNA提取方法的优化

利用正交试验法优化血清miRNA的提取方法,为进一步研究血清miRNA作为生物标记物提供方法学基础.本文以hsa-miRNA-223-3p,hsa-miRNA-483-5p和hsa-miRNA-16为检测目标,通过比较Trizol法和Trizol+酚/氯仿法的miRNA提取效率和qPCR检测结果,应用正交试验选择出最优实验方案.结果表明血清miRNA的最优提取方法为:血清用DEPC水4倍稀释,离心条件为4℃,12 000r·min-1,离心时间为10min,Trizol法提取.     

我国新生牛血清~(60)Coγ-射线照射技术的研究现状

新生牛血清是医药生物技术产品重要的原辅材料,其质量是生物制品质量保证的重要环节,国内的新生牛血清用60Coγ-射线照射已有多年,但还没有形成统一的操作规范和技术标准.文章对我国新生牛血清60 Coγ-射线照射的现况进行了分析总结,同时呼吁有关部门加强监督管理和技术指导,使60Coγ-射线照射技术在新生牛血清中得到更规范的应用.     

2型糖尿病患者检测血清硫氧还蛋白相互作用蛋白与唾液酸的临床价值

目的探讨血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin interacting protein,TXNIP)诊断与其他血液学指标联合诊断2型糖尿病的价值及临床意义.方法回顾性分析2型糖尿病患者(270例)与同时期健康体检者(73例)血清TXNIP水平(ELISA法)、一般临床资料和相关血液学指标.结果 2型糖尿病组血清TXNIP与唾液酸(SA)水平显著高于健康对照组(P0.01).ROC曲线分析结果显示:血清TXNIP与SA单独诊断2型糖尿病的线下面积AUC分别为0.606(敏感度0.815,特异性0.438,约登指数0.253,P=0.003)与0.646(敏感度0.632,特异性0.616,约登指数0.248,P=0.000).TXNIP联合SA、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、收缩压等联合诊断2型糖尿病的线下面积AUC=0.749(敏感度0.494,特异性0.903,约登指数0.397),差异具有统计学意义(P=0.000).结论血清TXNIP检测可对2型糖尿病诊断提供一定的参考价值,同时为预防和治疗2型糖尿病的分子生物学靶点提供了方向.     

中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中主要酶类活性的抑制作用

【目的】探究中华眼镜蛇(Naja atra)血清对自身蛇毒中主要酶类活性的抑制作用。【方法】不同稀释倍数的中华眼镜蛇血清与蛇毒于37℃孵育30min后,检测蛇毒中磷脂酶A2、透明质酸酶、乙酰胆碱酯酶、L-氨基酸氧化酶和5′-核苷酸酶活性的变化情况。【结果】中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中磷脂酶A2和5′-核苷酸酶具有明显的抑制作用:当血清稀释2倍时,可以使蛇毒磷脂酶A2活性降低28.44%(p<0.001);当血清稀释8倍时,可以使蛇毒中5′-核苷酸酶活性活性降低23.44%(p<0.001)。中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中的透明质酸酶、乙酰胆碱酯酶和L-氨基酸氧化酶均无抑制作用。【结论】中华眼镜蛇血清中存在蛇毒磷脂酶A2和5′-核苷酸酶的抑制剂,该结果为后期蛇毒抑制剂的筛选提供了理论依据。     

宫颈癌肿瘤标志物在新辅助化疗中的应用

目的了解新辅助化疗对宫颈癌肿瘤标志物水平的影响,探讨肿瘤标志物在新辅助化疗效果评估中的作用。方法回顾在武汉市中心医院妇产科接受化疗和宫颈癌根治术的40例患者的临床资料,通过腹部超声和磁共振检查确定在新辅助化疗前后肿块的大小;通过淋巴细胞的病理结果判断子宫周围淋巴结转移情况。比较两轮新辅助化疗及宫颈癌根治术前后肿瘤标志物水平(癌胚抗原、血清糖类抗原125、鳞状细胞癌抗原),评估新辅助化疗疗效和宫颈癌肿瘤标志物水平的相关性。结果宫颈癌肿瘤标志物水平在化疗和手术后都明显降低,差异有统计学意义(CEA:F=11. 07,P <0. 05;SCC-Ag:F=8. 84,P <0. 05;CA125:F=10. 18,P <0. 05)。新辅助化疗能减少局部晚期子宫颈癌患者的比例(χ2=7. 17,P <0. 05)。新辅助化疗后肿瘤缩小≥1 cm的的患者,其血清肿瘤标志物水平均低于肿瘤直径缩小<1 cm的患者,其中鳞状细胞癌抗原水平差异有统计学意义(t=2. 4,P <0. 05)。但是化疗后肿瘤标志物水平不能明显反映患者淋巴转移情况。结论新辅助化疗可显著降低肿瘤标志物水平,血清肿瘤标志物水平的变化是反映新辅助化疗有效性的指标。     

托伐普坦片治疗难治性心力衰竭的疗效分析

目的观察托伐普坦片治疗难治性心力衰竭的临床疗效分析。方法选取52例难治性慢性心衰患者,随机分为观察组与对照组。对照组采用常规抗心衰治疗,观察组在对照组治疗基础之上给予托伐普坦片口服,对比两组患者的心衰改善效果。结果持续治疗1周后,与对照组相比,观察组患者的心力衰竭症状和体征如呼吸困难、肺淤血、下肢水肿改善更明显;血清NT-proBNP下降、左室射血分数增加、血清钠离子浓度升高程度均优于对照组(均P <0. 05);同时患者血肌酐水平无明显升高(P> 0. 05)。结论在常规抗心衰治疗的基础上口服托伐普坦片治疗难治性心力衰竭临床效果较好,对肾功能无明显影响。     

光谱法研究辛伐他汀与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱、圆二、傅立叶变换红外光谱及三维荧光光谱等分子光谱法研究了在生理条件下,辛伐他汀（Sire）与牛血清白蛋白（BSA）的结合作用．结果表明,Sire对BSA的猝灭方式为静态猝灭．根据F6rster非辐射能量转移理论,计算了Sim与BSA结合部位与色氨酸残基的距离r=1．8nm．利用标记药物进行了结合位点的定位,确定了Sim结合位置是BSA的siteI．由圆二、红外及三维光谱可知,Sim对BSA二级结构的改变主要在肛折叠区,在与Sire结合反应过程中,BSA的微环境与构象都发生了变化;同步荧光表明,Sim与BSA的作用部位主要在色氨酸（Trp）残基周围．     

基于光诱导荧光的维生素K1检测方法研究

建立一种灵敏度高、选择性好的基于紫外光诱导荧光的维生素K1(VK1)检测方法.不发荧光的VK1经紫外光(254nm,15W)照射后可转变为具有很高荧光量子产率的光化产物,检测出其特征荧光峰在465nm处;当加入咪唑并经光诱导后,光化产物荧光特性发生变化,在330nm处又出现一新的较强荧光发射峰,两峰间的stokes位移长达135nm.同时发现,随着VK1浓度的增加,465nm处的荧光峰强度增加,而330nm处的峰强度反而减小.方法的检出限为0.003#g·mL-1(S/N=3),对1.0#g·mL-1 VK1溶液进行11次平行测定,相对标准偏差(RSD)为2.4%.该法用于注射液及人血清中VK1含量测定,回收率为97%~104%,结果令人满意.     

血清总胆红素与冠状动脉粥样硬化相关性的探讨

目的探讨血清总胆红素(TBIL)水平与冠状动脉粥样硬化的关系.方法根据178例冠状动脉造影的结果,将其分成正常组与疾病组,疾病组中依据冠状动脉狭窄程度和范围分成轻度狭窄组和重度狭窄组,根据临床、心肌酶学、心电图又将疾病组分为急性冠状动脉病变组和非急性冠状动脉病变组,将各组的血清TBIL进行比较分析.结果正常组血清总胆红素显著高于疾病组(P<0.01),血清TBIL水平与冠状动脉粥样硬化狭窄程度和范围呈负相关(P<0.01),急性冠状动脉病变患者血清总胆红素水平明显升高(P<0.01).结论血清总胆红素对冠状动脉可能有一定的保护作用.