抗禽流感iRNA提取及其部分免疫活性的研究

为了比较不同方法抽提抗禽流感iRNA的含量、纯度,以及了解iRNA对小鼠的免疫活性,本研究就抗禽流感iRNA提取及其部分免疫活性进行了研究。结果表明:酚-氯仿抽提与Trizol reagent试剂盒抽提的效果差异不显著,所得到的iRNA含量和纯度较高,而冷热酚法抽提的效果则明显不及酚-氯仿法与Trizol reagent试剂盒;小白鼠腹腔注射提取的iRNA制剂,小白鼠生长良好,10 d内未见小白鼠有死亡,由此说明iRNA对小白鼠是安全的;禽流感HI试验及ELISA试剂盒检测iRNA免疫小白鼠血清抗体,结果为阴性,由此说明抽提的iRNA不能诱导机体产生体液免疫。     

香花槐各组织总RNA提取方法的改良和优化

为探索香花槐各组织总RNA提取的最佳方法,以实验苗圃中的香花槐为实验材料,在比较了Trizol试剂法和常规CTAB法的基础上,建立了香花槐不同组织的最适提取方法.改良CTAB法利用高质量浓度的β-巯基乙醇和合适质量浓度的聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)来防止RNA提取过程中多酚的氧化,然后增加苯酚/氯仿抽提次数来去除香花槐叶片和茎皮过多蛋白质.改良Trizol试剂法在根皮中加PVP研磨成白色粉末,可以有效地防止反应液褐化.各组织优化方法经琼脂糖凝胶电泳检测,所提取的总RNA的28S、18S条带清晰明亮,无降解;其A260nm/A280nm值为2.0,表明提取的总RNA质量较好.     

微波提取水杉黄酮工艺研究

采用正交试验方法,确立了微波法提取水杉黄酮的提取工艺条件.结果表明,最优提取条件为乙醇浓度80%,提取时间5min,固液比120 g/mL,此时黄酮得率为1.601%     

正交设计法优化槐花中总黄酮的提取工艺

目的优选出槐花提取的最优工艺。方法以槐花中所含总黄酮含量为评价指标,采用L9(34)正交试验法,从药材的粉碎度、碱的种类、提取次数这3个因素中筛选出槐花提取的最优工艺。结果综合各种因素,槐花最佳的提取工艺条件为C1B3A1,即将槐花粉碎成粗粉,用石灰水调p H8,提取3次。结论本方法可为提高槐花中总黄酮的提取率提供依据。     

苏铁总黄酮提取工艺研究

本文研究苏铁中总黄酮的最佳提取工艺.利用UV测定苏铁总黄酮的含量,以苏铁总黄酮含量为检测指标,在单因素试验基础上,采用正交试验法评价乙醇浓度、提取时间和液料比对苏铁总黄酮提取工艺的影响.结果显示正交试验法确定最佳提取工艺为乙醇体积分数为80%,液料比为6:1,提取时间为45min,提取次数为3次;苏铁总黄酮平均质量分数为19.36%.结论说明采用正交试验法直观、方便、准确,能有效提高苏铁总黄酮的提取效率,此方法可使中药提取工艺优化具有良好的预测性.     

大型海藻龙须菜蛋白提取及双向电泳体系的优化

本文以龙须菜为材料,比较了尿素/硫脲法,改良丙酮沉淀法,Trizol法3种不同蛋白质提取方法;并从胶条长度及pH范围,上样量,分离胶浓度等因素探讨了双向电泳技术体系的优化.结果表明:采用Trizol法辅以超声破碎提取龙须菜总蛋白效果优于尿素/硫脲法和改良丙酮沉淀法;同时,采用pH 4-7,11 cm胶条,上样量为800μg,分离胶浓度为12%的双向电泳条件可获得背景清晰,分辨率好的二维电泳图谱.该体系也可以为龙须菜属和江蓠属其他海藻的蛋白质双向电泳分析提供参考.     

紫茎泽兰中绿原酸提取工艺的研究

采用正交试验比较了水提、醇提和乙酸乙酯提3种提取法,确定了紫茎泽兰叶中绿原酸用乙醇提取效果最佳,其最优提取工艺参数为:乙醇体积分数50%,乙醇pH值为4,料液质量比为1∶10,回流时间4 h,温度70℃.所得绿原酸进一步经NKA-9型大孔树脂纯化后纯度为23.91%.     

凤眼莲总黄酮微波提取工艺的研究

对凤眼莲(Eichhornia crassipes)总黄酮的微波提取工艺进行研究,采用微波法,进行提取凤眼莲总黄酮的单因素试验,并在微波法的单因素试验基础上进行正交试验,研究最佳提取条件.结果表明微波法是提取凤眼莲总黄酮的快速方法,其最佳提取条件为微波时间-2min,乙醇浓度-50％,料液比-1∶80,微波火力-中低火.     

超声波法提取玉米须多糖的工艺研究

对超声波法提取玉米须多糖的工艺进行研究,通过单因素和正交实验法确立的最优提取工艺为超声温度60℃,固液比为30倍,超声时间60min,超声提取4次.超声波法可提高玉米须多糖的提取效率.     

一株抗植病放线菌的发酵条件优化及活性产物研究

从河西走廊敦煌地区盐碱土壤中筛选出一株对多种植物病原真菌均具有良好拮抗效果的放线菌DA4-3-12,对其最优发酵条件及稳定性进行探究,并对活性物质进行初步分离.采用平板涂布法确定最优培养基,琼脂扩散法筛选拮抗植病真菌菌株,单因素试验和正交试验确定其最优培养条件及稳定性,有机溶剂萃取法和大孔吸附树脂吸附法对活性物质进行初步分离并提高其抑菌活性.结果显示,菌株DA4-3-12为植病真菌拮抗放线菌,最优发酵条件为:发酵时间156h、接种量8%、装液量90/250 m L、起始p H 10.菌株在不同酸碱、紫外照射时间、温度、贮存时间条件下均表现出良好的稳定性.抑菌活性物质为脂溶性物质,有机溶剂氯仿及大孔吸附树脂HP-20均可对其进行初步分离.以上结果说明菌株DA4-3-12对植物病原真菌有良好的抑制效果,有较好的实际应用前景.     

从福尔马林固定的癌组织中提取RNA的方法

目的:寻求从福尔马林固定的癌组织中提取RNA的合理方法.方法:运用Trizol法从福尔马林固定的胃癌组织中提取RNA,用分光光度计测定RNA的产量和纯度;通过RT-PCR对不同长度的管家基因-actin进行扩增.结果:100 bp和300 bp的-actin均能顺利扩增出特异性条带,500 bp的-actin未能扩增.结论:用Trizol法从福尔马林固定的癌组织中提取RNA是可行的;进行RT-PCR时应尽量设计小片段引物(100~300 bp)以获得更好的扩增效果.     

一种低危害的基因组DNA和总RNA的提取方法

从生物组织里提取基因组DNA和总RNA是多数专业研究人员都需要操作的实验内容,但该实验的常规操作流程中却存在致病性微生物的感染风险和有毒有害试剂的危害.本文从选择安全的实验材料和改进低危的实验方法两个方面入手,提出了以盐藻为实验材料的基因组DNA和总RNA的新的实验提取方法,该方法有效避免了致病性微生物的感染风险,也避免了有毒、挥发性试剂苯酚、氯仿和Trizol的使用,对核酸提取实验操作的安全性提供了一定的保障,可供研究者选取实验方案时参考.     

四种不同样品处理方法对人胎盘组织总RNA提取的影响

目的:比较四种不同样品处理方法对人胎盘组织总RNA提取的影响,为RNA提取时的组织处理方法提供实验依据。方法:将新鲜人胎盘组织按0.1g的重量分成相等的80份,按照随机原则分成4组,每组分别采取不同的处理方法后置于液氮罐中保存并于日后用Trizol法进行总RNA提取,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计对RNA的浓度和纯度进行检测,所得数据进行统计学处理。结果:(1)提取成功率P0.05,差异无显著性意义;(2)琼脂糖凝胶电泳总RNA样品较为完整,基本无降解;(3)纯度(OD260/OD280值代表)P0.05,差异无显著性意义;(4)浓度P0.05,差异无显著性意义。结论:尚无足够的证据证明,不同的处理方法对用Trizol法从人胎盘组织中提取总RNA有影响,在实际工作中我们可以采取较为简便、节约的方法。     

湘文一号抗虫棉幼叶总RNA提取技术研究

棉花抗虫Bt基因克隆技术第一步就是从抗虫Bt基因特异性表达的幼叶中提取总RNA,基因的表达可以在RNA产生的不同阶段进行调控,纯化完整的总RNA是进行基因表达研究和从cDNA克隆新基因的基础.对比分析了CTAB-licl法、改良异硫氰酸胍一步法、Trizol一步法和试剂盒提取方法4种RNA提取技术,经琼脂糖凝胶电泳谱带结果检验和紫外分光光度计检测,发现前2种方法很难提取到理想的RNA,而后2种提取的RNA完整性较好,但用RNA Out试剂盒提取的RNA更加适用于反转录cDNA.     

宇宙大爆炸及宇宙演化

 给出了宇观天体和微观粒子质量、半径的统一计算式,计算结果与实验基本相符．认为宇宙大爆炸是“超微黑洞”（即前宇宙）的大爆炸,否定了点大爆炸的传统观点．爆炸后的宇宙背景是光子热平衡态和引力束缚态共存的系统,平衡态占优势则宇宙必然膨胀．暗物质、暗能量的本质是什么？它们会怎样左右宇宙的命运？最后也阐明所谓的“大沙漠”区并非一无所有,它分布着三代费米子的超对称伴子——三代玻色型粒子成员．     

枸杞果实总RNA提取方法的比较研究

以枸杞果实为植物材料,比较研究Trizol试剂快速提取法、异硫氰酸胍法、TransZol plant试剂盒法、CTAB法和改良CTAB法提取枸杞果实RNA的可行性.结果表明,改良CTAB法能有效地抑制酚类物质、多糖及皂苷等次级代谢产物对RNA的影响,可从枸杞果实获得质量高、完整性好的总RNA;RT-PCR分析显示提取的...     

血清miR-25、miR-223和miR-373作为食管鳞癌生物标志物的评价

为了探讨血清miRNA作为诊断标志物的可行性,利用茎环引物进行qRT-PCR,检测了miR-25、miR-223和miR-373在正常人血清、食管鳞癌患者术前和术后第7 d血清、癌组织和癌旁组织的相对表达量.实验结果表明:术前食管鳞癌病人的3种血清miRNA相对表达量高于正常人和手术后第7 d病人,AUC分别为0.794、0.839和0.873,癌组织的这3种miRNA相对表达量高于癌旁组织.这3种miRNA在食管癌患者癌组织的高表达导致血清的这3种miRNA含量增高,因此这3种血清miRNA可以作为候选诊断标志物.     

沉积物中12种羟基多环芳烃的分析

建立了一种同时检测沉积物中12种羟基化多环芳烃代谢物(OH-PAHs)的方法。样品经冷冻干燥后,分别采用加速溶剂萃取(ASE)、固相萃取(SPE)及衍生化进行样品前处理,气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)进行分析测定。通过单因子优化后,12种代谢物的方法检出限(LODs)均达到ng·kg-1级别,并且重现性较好。通过加标回收的方法,在样品中加入12种代谢物至质量分数均为10 ng·g-1以评价方法的回收率,结果发现除了9-羟基菲较低外(39.5%),其余待测组分的回收率均在60%以上。所建立的分析方法最终被应用于检测珠江虎门河口沉积物中的12种羟基化多环芳烃,其中10种待测组分被检出,并且质量分数介于0.58(4-羟基菲)~2.4 ng·g-1(6-羟基屈)之间。