F3重组毒素的克隆表达及纯化

以pEKH-F3质粒为模板,PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选,获得含有F3的PQE80L重组载体的克隆.提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板,PCR扩增绿脓杆菌外毒素A催化区,PE40.然后将PQE80-F3和PE40重组,得到表达PQE80L-F3-PE40载体.转化至大肠杆菌DH5a,BL21,表达融合蛋白F3-PE40.结果显示,大肠杆菌表达了融合蛋白F3-PE40,表达的融合蛋白量大概占菌体总体蛋白量的20%.通过质粒提取、PCR扩增构建F3-PE40表达载体转化大肠杆菌,成功地表达了融合蛋白F3-PE40,为大规模表达、纯化F3-PE40的进一步功能奠定了基础.     

绿脓杆菌MSHA茵毛株菌苗与白血病免疫应答反应

绿脓杆菌(MSHA)菌苗是一种具有广谱抗感染效果的免疫调节剂。我们观察了20例白血病患者多次疫苗主动免疫的免疫应答反应,14例病人血中广谱抗体效价升高,临床上有很好的治疗反应,6例抗体效价无变化,而临床症状加重,最后均死于败血症。上述结果提示白血病病人对疫苗的免疫应答反应,在白血病缓解中起着重要作用,对临床早期准确判断白血病患者的预后很有意义。     

绿脓杆菌败血症合并脑炎临床分析

通过1例绿脓杆菌败血症合并脑炎的病例分析，阐述了绿脓杆菌败血症和脑实质性炎症的临床特征、起病特点，探讨病毒性脑炎和细菌性脑炎的脊液、影像学方面的差异，提出了绿脓杆菌败血症合并脑炎的病变特征、脑脊液改变的特点及其需要进一步探索的问题。     

家蚕抗菌肽CM4组分杀菌机理的激光共聚焦显微镜观察

报道了家蚕抗菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的杀菌作用.用抗菌肽处理大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,与对照组相比,它们的OD值随时间明显下降,平板培养克隆数减少.以荧光素FITC标记抗菌肽作用于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌等细菌,用激光共聚焦扫描显微镜观察,发现抗菌肽迅速包围菌体,密集于细胞膜,损伤膜的完整性,出现大小不等的孔洞,菌体断裂,最后死亡.说明细菌膜结构是抗菌肽CM4攻击的首要靶位点.     

雏鸡绿脓杆菌病的诊治

某鸡场新入舍雏鸡第二天雏鸡突然发病，死亡率极高，剖检可见头、颈部皮下有大量黄色胶冻样渗出物，颅骨骨膜充血和出血，心包积液，肝脏表面有大小不一的出血斑点。有淡黄色清亮的腹水，经实验室镜检、分离培养、生化试验等检验确诊为绿脓杆菌病。经药敏试验选出高敏药物，控制了疫病的发展，通过对孵化场加强卫生消毒工作，杜绝疫病的继续发生。     

绿脓杆菌外毒素A与Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白嵌合表达质粒的构建及其免疫原性的研究

构建外毒素结构域Ⅰ a基因(EPA103)与Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白(HSV-2-gD)嵌合蛋白表达载体(pET-EgD),得到嵌合表达蛋白.利用外毒素结构域Ⅰ a基因表达蛋白的佐剂效应,以pET-EgD表达嵌合蛋白免疫Balb/c小鼠.结果显示:嵌合表达蛋白(pET-EgD)免疫小鼠,可在小鼠体内诱导产生抗HSV-2特异性抗体.嵌合表达蛋白(pET-EgD)具有较强的免疫原性,为开发研究Ⅱ型单纯疱疹核酸疫苗奠定了基础.     

气管切开合并绿脓杆菌感染的耐药性研究

本文选择对危重气管切开口呼吸道分泌物培养证实对为绿脓杆菌感染的３０例患者作为研究对象，采用纸片扩散法进行药敏试验，统计分析其耐药率，并对１６种常用抗生素做体外抗菌活性试验，结果表明；绿脓杆菌对喹诺酮类抗生物的耐药率在目前应用的抗生素中是最低的，另外本文从临床的角度对其治疗和护理工作做出了更深一步的研究提出了相应的整改方案，为今后的临床工作提供新的途径。     

REBD—1稀土制剂对烫伤感染的疗效观察

采用大白鼠背部造成30%面积Ⅲ°烫伤为烧伤动物模型,伤后在创面涂布绿脓杆菌,并随机分为3组。第1组接受 REBD-1霜剂(稀土烧伤药1型)局部涂布治疗;第2组用 SD 银霜剂涂布治疗;第3组用制备 REBD-1霜剂的基质涂布创面作为对照组。从涂布药物的第二天开始,第1组和第2组的创面仅出现少量渗出物。创面较干燥,基本无溃烂,创面细菌培养比第3组的菌量减少2～3个数量级。在第3或第4周开始结痂,创面至7～8周已全部愈合。应用 SD 银治疗的创面因有银的沉着而变为黑色,故第1组实验动物的创面外观较清洁。第1组动物的死亡率为10%,而第2组无动物死亡。第3组基质对照动物,自涂布绿脓杆菌第2 天开始,创面呈现炎症并有渗出物或化脓形成,细菌培养有大量绿脓杆菌存在,动物死亡率为70%,感染后12～14天为死亡高峰。     

PA菌毛株菌苗的应用研究

结合国内外近年来生物科学领域中的迅速进展以及个人多年研究多种菌毛株的经验,作者于1984年建成一株“绿脓杆菌MSHA菌毛株”。本菌毛株具有跨菌属的广谱免疫原性。使用此新型菌毛株,1985年制成“绿脓杆菌MSHA菌毛株菌苗”(简称PA菌毛株菌苗)。经基础实验研究、动物实验、志愿者人体验证及临床试用,均获得良好效应。