海星棘皮用作饵料添加成分养牙鲆的研究

测定了罗氏海星棘皮的组成成分，并用脱毒处理后的海星进行了毒理实验。海星棘皮干粉中含有10种必须微量元素，脂质含量为6．31％，蛋白质含量为55．01％，10种必需，半必需氨基酸占所含氨基酸总量的49．82％，将脱毒处理后的海星棘皮烘干粉碎成粉末，掺入牙鲆饵料－冰冻小杂鱼中，制成颗粒状饵料喂养牙鲆，牙鲆生长率，增重及成活率皆显著提高。     

氯霉素在牙鲆体内的药代动力学及残留消除规律研究

采用高效液相色谱法测定牙鲆体内氯霉素的药物浓度,非房室模型统计矩原理分析药动学数据.结果表明:1)单次口服剂量为80 mg·kg-1的氯霉素,药物在牙鲆体内的药-时曲线呈明显双峰现象:第一次达峰时间Tmax(1)出现在2.00 h,鳃、肝、肾、血、肌的第一次达峰浓度Cmax(1)依次为15.01、11.80、10.35、8.56、5.21μg·mL-1;第二次达峰浓度Cmax(2)小于第一次的浓度Cmax(1),第二次达峰的时间Tmax(2)出现在8.00 h,药-时曲线下面积(AUC):肾、鳃、肝、血、肌分别为176.87、133.77、118.77、65.33、50.36μg·mL-1·h.消除半衰期(T1/2)为4.89-10.39 h,平均滞留时间(MRT)为8.67-17.05 h,说明氯霉素在牙鲆体内吸收较迅速,但滞留时间较长.2)连续5 d口服剂量为40 mg·kg-1的氯霉素,药物消除半衰期(T1/2)为39.40-115.50 h,说明口服氯霉素在牙鲆体内消除缓慢,残留较严重,其中以肾脏和肝脏组织中残留最明显.     

以mRNA差异显示法分离牙鲆白化相关基因的初步研究

以正常和白化牙鲆表皮组织总RNA为模板,用Oligo d(T)13M(M分别为A、C、G)3种锚定引物和26种差异显示随机引物组合进行差异显示,PAGE凝胶电泳后,用新型高灵敏度核酸荧光染料SYBR GREEN I显示差异DNA条带,得到区分度较好的差异表达图谱,共分离49条牙鲆白化相关DNA片段,片段长度260～800bp左右,经克隆测序后将可作为新的ESTs进行同源序列比较.     

微波消解-原子吸收光谱法测定牙鲆肌肉中K、Na、Ca、Mg、Zn的含量

用微波消解牙鲆样品,用原子吸收光谱法测定牙鲆肌肉中钾、钠、钙、镁、锌的质量浓度.结果表明,微波消解时间短,操作简单,消化过程试剂用量少,减少环境污染.原子吸收光谱法测定牙鲆肌肉中的这几种元素,方法快速简便,加标回收率为82%~103.2%,相对标准偏差(RSD)≤2.7%,测定结果准确.     

不同饵料系列对漠斑牙鲆苗种培育效果的影响

报道了不同饵料系列对漠斑牙鲆苗种成活率和生长率的影响.32.0万粒的受精卵经57 d培育,共获得全长2.7～5.5 cm的鱼苗16.6万尾.在仔鱼开口后自始至终加投配合饵料的饵料系列组(B组)的成活率比在35日龄才开始驯化配合饵料的饵料系列组(A组)的成活率高.初孵仔鱼至变态伏底时A、B组的成活率分别为58.9%和88.7%,从变态伏底始至出苗时全长平均为3.84 cm的A、B组幼鱼的成活率分别为79.0%和83.6%,从初孵仔鱼至出苗时的A、B组的总成活率分别为46.5%和72.4%,而两组的生长率差异不大.     

牙鲆贫血症病毒分离株的特性

用CHSE－214细胞，从患贫血症的牙鲆肾脏组织分离出一株病毒。电镜揭示为无囊膜、6面体、粒子直径约60nm；理化特性表明：病毒复制不受IUdR、BVdU的影响，对氯仿、乙醚不敏感性，热（60℃，30min）、酸（pH3．0，3h）中稳定；可被抗IPNV－Sp、Ab和VR－299株血清中和，其中抗Sp株血清的ND50为1:2560;病毒能在5～30℃增殖，最适为15～25℃；在盐度0．8～2．0％的培养液中，生长无明显差别；在16种鲑科和非鲑科鱼类细胞上，15℃培养1～4d出现CPE；感染细胞丫啶橙染色显示为黄绿色；用BirnavirusYAV株引物，PCR检出该病毒。结果提示该病毒株应属dsRNA的Birnavirus。     

溶解氧含量变动对褐牙鲆幼鱼生长及其相关生化指标的影响

【目的】以褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)幼鱼为对象,研究其在不同溶解氧条件下的生长及生长指标的变化,探讨褐牙鲆幼鱼血浆激素的内分泌调节机制,为深入研究鱼类适应溶解氧变动环境的机制提供资料。【方法】采用实验生理生态学方法,研究水体溶解氧含量变动对褐牙鲆幼鱼生长、生长激素GH的分泌、类胰岛素生长因子IGF?Ⅰ的分泌、RNA/DNA比值以及糖原含量的影响。【结果】低溶氧(2mg/L-S2、4mg/LS4)胁迫的10d内,褐牙鲆幼鱼生长受到明显抑制,但低溶氧胁迫导致的生长减缓可在溶解氧含量恢复至对照组(7.5mg/L-S7.5)水平后10d内获得完全补偿。胁迫期间,血浆GH和IGF?Ⅰ的含量在不同处理组间没有显著差异,在恢复的第10天,S7.5的GH含量显著高于S2及S4,其他不同处理组的血浆GH和IGF?Ⅰ含量未出现显著差异。胁迫和恢复期间不同处理组的肝脏RNA/DNA比值均未出现显著差异。低溶氧处理的肌肉RNA/DNA比值在胁迫期间显著低于对照组,但在恢复生长的第20天显著高于对照组。胁迫结束时,低溶氧处理的肝糖原含量显著低于对照组,而在恢复期间的第10天和20天时高于对照组,随后恢复至对照组水平。不同处理组的肌糖原含量在胁迫和恢复期间均未出现显著差异。在恢复阶段的第10天,GH含量出现显著差异,其含量与生长速率呈负相关关系,而RNA/DNA含量在实验期间与褐牙鲆幼鱼的生长未表现出明显相关性。【结论】受短期低氧胁迫的褐牙鲆幼鱼能够在恢复正常溶氧后短期内获得完全补偿生长,但相关生化指标未表现出与生长变化的显著相关性。     

溶解氧水平对褐牙鲆幼鱼能量代谢和氧化应激的影响研究

【目的】查明溶解氧含量下降对褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)幼鱼能量代谢及氧化应激的影响。【方法】测定褐牙鲆幼鱼在溶解氧由7.4mg/L下降至0.9mg/L过程中耗氧率、排氨率、氧氮比以及氧化应激指标的变化。【结果】随着溶解氧含量(DO)降低,褐牙鲆幼鱼耗氧率呈"U"型变化,氧氮比呈倒"U"型变化,褐牙鲆幼鱼肌肉中丙二醛(MDA)含量增加,尽管肌肉和肝脏中过氧化物歧化酶(SOD)酶活性有增强的趋势,但由于体内产生过多的活性氧自由基,使得脂质过氧化反应增强,脂质过氧化物增多,机体仍表现出氧化损伤。【结论】褐牙鲆幼鱼的能量代谢指标和部分氧化应激指标对溶解氧含量下降有明显反应,可作为判断溶解氧含量是否对褐牙鲆产生胁迫及调控养殖水体溶解氧含量的依据。     

Occurrence, Development and Histochemical Characteristics of Lymphocystis in Cultured Japanese Flounder （Paralichthys olivaceus）

Occurrence and development of lymphocystis cells in flounder Paralichthys olivaceus, and some his-tochemical features are studied using light and electron microscopy and histochemical methods. Fibrob-lasts engulf virus particles forming phagocytosis vacuole in the cytoplasm. The infected cells proliferate and turn round and hypertrophied; basophilic inclusion bodies, Feulgen-positive, are present in the cyto-plasm, and a hyaline capsule, containing acid ploysaccharide and protein, appears outside cell mem-brane. The mature lymphocystis cells possess numerous virus particles (200～220nm in diameter with a central core 120～140nm) and high electron-dense inclusions with budding virious at the surface in the cytoplasm, and show margination of chromatin. Moderate electron density particles (70～80nm in diame-ter) fill out perinuclear cistema and arrange in crystalloid arrays in nucleus, liberated into the cytoplasm by rupture of nuclear membrane. No virus particles are observed in nucleus. Therefore, inclusion bodies are the sites of virus assembly and maturity, while replication processes of lymphocystis virus are involved in both nuclear and cytoplasmic phases. Besides, strongly basophilic link-like structures are present be-tween adjacent cells or through connective tissue, and virus particles are observed in somewhere of the capsule, thus where may be the spread route of virus from one cell to another or to the environment. The senile lymphocystis cells release virus bv the runture of cells.     

牙鲆fibrinogen β基因的克隆及表达分析

 通过mRNA差异显示发现一个鳗弧菌刺激后在牙鲆肝脏中表达量显著增加的片段,结合RACE技术得到了该差异片段1 856 bp的全长cDNA,包含一个1 479 bp的开放阅读框,编码的蛋白质含有fibrinogen β的C末端签名序列。同源性分析表明其氨基酸序列与鱼类以及哺乳类的fibrinogen β都具有高度的相似性,因此可断定此基因为牙鲆的fibrinogen β基因(GenBank登录号为EF581895)。RT-PCR分析表明,在注射鳗弧菌后,该基因在肝脏、肾脏、脾脏、腮、肠、心脏中的表达量呈现逐渐增加的趋势。推测其可能在鳗弧菌侵染中,起到了促进伤口愈合的作用,或通过和其他细胞因子结合在防御细菌的侵染中发挥免疫调节作用。