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His-猪生长激素融合基因在Bm-N细胞和蚕体内的表达与纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
用构建的带有His—Tag pgh融合基因的重组杆状病毒Bm—BacPAK6—pgh研究了Bm—BacPAK6—pgh在家蚕细胞(Bm—N)和蚕体内的表达,并对蚕体表达产物进行了纯化.SDS—PAGE电泳分析显示,重组病毒Bin—BacPAK6—pgh在Bin—N细胞、蚕体中得到了融合表达,Western blot分析表明,Bm—N细胞、蚕体中表达的融合蛋白与大肠杆菌表达的猪生长激素具有相同的抗原性.Bm-BacPAK6-pgh在Bin—N细胞内的表达始于24h,而蚕体中的表达始于72h,二者的表达峰分别在96h和120h.经40%饱和度硫酸铵盐析和Ni—NTA Agarose亲和柱二步纯化可获得SDS—PA(正电泳纯的具有抗原性的重组猪生长激素融合蛋白。 相似文献
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花粉症属于环境性疾病,凡有植物生长的地方,均可能有花粉症病人。我国地域辽阔,植被种类繁多,空气中致敏花粉亦极为多样。调查掌握我国各地方空气当中致敏花粉的类别及其在一年四季的出现规律,对防止花粉过敏症将是一个重要的基础工作。我国对花粉致敏的研究已有了初步规模,为我国花粉过敏病症等一些异常性疾病的流行病学的研究和临床诊治及预防提供了有价值的参考依据。 相似文献
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为研究牦牛BVDV E0蛋白的生物信息学及抗原性, 本研究对本实验室克隆并测序的牦牛病毒性腹泻病毒E0基因进行了生物信息学分析;同时用含有酶切位点、起始密码子、终止密码子的引物重新扩增E0基因, 并连接PMD18-T载体, 经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后, 将获得的E0片段克隆至PET-28A原核表达载体, 构建重组质粒并转入JM109.酶切、质粒PCR鉴定正确后转入rosetta(DE3)菌进行诱导表达.经SDS-PAGE检测结果显示目的基因获得了较高的表达, 表达的融合蛋白约33ku, 经western-blotting检测表明目的蛋白具良好的有抗原性. 相似文献
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一段长度为1327bp的庚型肝炎病毒cDNA在大肠杆菌BL21(DE3)AL菌株中得到表达。此cDNA被插入到噬粒pGEMD中,位于编码大肠杆菌RNA聚合酶σ^70-因子氨基端8个氨基酸残基的DNA序列的下游, 相似文献
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目的:初步摸索出一条适合工业化开发、高效的、可溶表达结核分枝杆菌MTB8.1蛋白的发酵工艺。方法:利用菌株pUC18/MTB8.1/DH10B为发酵株,通过对培养基组成和发酵参数进行系统研究,从而获得一全新的发酵工艺。结果:重组结核分枝杆菌MTB8.1蛋白通过本发酵工艺的表达,单位体积发酵液可溶性蛋白的产量大幅提高,每升发酵液纯化得到可溶性蛋白约30 mg左右。结论:初步摸索出一条较好的MTB8.1在大肠埃希菌系统中的可溶性表达的途径,为其工业化生产奠定了理论基础。 相似文献
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采用RT-PCR方法从新疆临床发病猪场采集的病料中扩增了CSFV流行株E2基因的主要抗原位点编码区,测定了15株CSFV的核苷酸序列。应用DNAstar计算机软件对6个地区6个代表株CSFV的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行了比较分析,结果表明:新疆6株CSFV流行株与猪瘟兔化弱毒株(C株)核苷酸序列的同源性为80.9%~82.8%,氨基酸的同源性为86.2%~88.3%,说明新疆CSFV流行株E2基因发生了部分变异,与疫苗株相比抗原性产生一定的差异。 相似文献
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