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1.
带HSV—tk基因的重组腺病毒杀伤离体肺癌细胞的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
带有单纯疱疹病毒脱氧苷激酶基因的泉病毒结合ganciclovir(GCV)对分很强的杀伤作用。在感染复数(M。O。IMultiplicityof Infection)达到1000时对人体肺腺癌细胞A549的杀伤几乎达到100%。四种人体肺癌细胞株(A549,LAX,SPC,SKY)对带HSV-tk的泉病毒(ADV/RS-tk)的杀伤作用表现出不同的敏感性。但杀伤效果有很大差别;就A549而言,GC 相似文献
2.
建立缺陷型重组腺病毒载体介导的胸苷激酶基因治疗系统(Adtk/ACV),进行离休和活体治疗大鼠C6脑胶质瘤研究.将质粒pAdtk与pJM17共转染腺病毒包装细胞──293细胞,同源重组后制备纯化的Adtk并以PCR证实;Adtk对离休C6细胞的杀伤作用随着Adtk滴度和ACV剂量增加而增强,并有旁观者效应,而未转染C6细胞和AdLacZ转染C6细胞均未被杀伤;扫描电镜下见Adtk/ACV处理的细胞呈明显病理改变;ACV可有效杀伤Adtk/C6细胞.在大鼠脑立体定向仪引导下于右额叶接种2×106个C6细胞,分别于第3,6,8和10天原位注射Adtk,同时腹腔注射ACV(100mg/(kg·d-1)),3d组、6d组、8d组大鼠成活期在90d以上,组织学检查未发现肿瘤细胞.10d组成活期(28.5±4.6)d,而C6未治疗组和AdLacZ/ACV治疗组成活期分别为(1.8±3.1)d和(14.0±2.2)d.本文建立的Adtk/ACV在离体和活体水平对大鼠C6脑胶质瘤有强烈的杀伤作用,效果确实,应用方便,ACV价格便宜,有潜在临床应用价值. 相似文献
3.
MAYewei ZHOUXiaoshan QIANXinlai ZHAOQingzheng YANGJun GAOXin LIYanchun LIUYuying WANGZheng 《科学通报(英文版)》2003,48(7):687-691
Adenovirus 5 type E1A as a tumor suppressor gene can inhibit tumor growth and enhance the censitivity of chemotherapy and radiotherapy.E1A have the ability to integrate into the host genome,resulting in long-time expres-sion that induces Rb gene inactivation and animal cells im-mortalization.This prompted us to select the E1A protein for treatment of cancer in order to overcome the limitations of E1A gene therapy.Thus,we firstly comstructed E1A eu-caryotic expression vector (pPIC9/E1A),transformated the pichia pastoris yeast cells(GS115) and screened the high-expressing recombinant strains.The positive yeast strains were cultured in the shake flask,and induced for 3d.The crude E1A protein was purified using two steps of col-umu chromatography on HiTrap Q and HiTrap SP.The pu-rified E1A protein was identified by SDS-PAGE and Western blot.E1A protein was mostly located at cellular unclear when Cheriot delivered E1A protein into cells.The analysis in vitro indicated that the E1A protein arrested LN686 cell cycle at G2/M phase,and significantly inhibited the growth of LN686 tumor cells.The current studies firstly provided an experimental basis to further develop E1A protein for tumor treatment. 相似文献
4.
重组GATA4腺病毒的构建及心肌细胞感染 总被引:1,自引:1,他引:0
利用AdEasy腺病毒表达系统构建了GATA4基因过表达腺病毒.编码大鼠GATA4基因的目的片段克隆入pAdTrackcmv质粒,pAdTtrackcmv-GATA4穿梭质粒经PmeⅠ线性化后转入含pAdEasy-1的BJ5183菌进行同源重组.pAdEsay-GATA4重组质粒经卡那霉素抗性筛选及PacⅠ酶切鉴定.pAdEsay-GATA4转入293A细胞进行包装,产生具有感染性的重组病毒.Ad-GATA4重组病毒感染HeLa及乳鼠心肌细胞,通过免疫印迹及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测GATA4表达及促心肌肥大效应.Ad-GATA4重组病毒感染乳鼠心肌细胞后,诱导心肌细胞表面积明显增加,ANF表达明显增强.结果表明,Ad-GATA4腺病毒成功感染心肌细胞并诱导了大鼠心肌肥大表型的出现. 相似文献
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6.
GFP标记的GDNF重组腺病毒载体的构建和体内外表达 总被引:2,自引:0,他引:2
通过构建绿色荧光蛋白(GFP)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)共表达的腺病毒载体,讨论其在治疗脊髓和脑有关神经系统疾病的潜在应用价值,了解腺病毒载体在大鼠体内的分布及在体外分泌外源基因产物能力,并对其生物安全性作了初步考察,为GDNF重组腺病毒载体在临床和基础研究中的应用作了一定准备. 相似文献
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构建重组腺病毒载体AdCMVp53,将wtp53分别导入PG(人肺巨细胞瘤细胞)、CAE(人结肠癌细胞)、HCT(人结肠癌细胞)、HeLa9人宫颈癌细胞)及BEL7402(人肝癌细胞)五种癌细胞中,测定AdCMVp53对癌细胞的半抑制浓度(IC50)和细胞生长曲线,分别不同组织癌组织对AdCMVp53的敏感程度。结果表明,AdCMVp53对癌细胞具有与病毒剂量相关的明显致死作用,但不同细胞对腺病毒 相似文献
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