GC/MS法测定尿中的8-羟基脱氧鸟苷

利用气相色谱/质谱(GC/MS)法测定尿中的8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)含量.根据MS的定性结果,强峰m/z 383对应的碱基 1(B 1)为8OHdG的特征离子峰.利用选择性离子扫描方式(SIM)进行定量分析,测定结果重复性较好,整个分析流程的系内相对标准偏差为4.23%,系间相对标准偏差为8.25%.该方法的检测限可达0.5 nmol/L,线性范围为5~10 000 nmol/L.分析尿样的相对标准偏差为5.12%,并测定了正常人和癌症病人尿中8OHdG的排放水平,癌症病人尿中8OHdG的排放水平明显高于正常人.     

血浆和尿液8-OHdG含量作为运动机能监控标志物的可行性分析

15名青年男子田径运动员在功率自行车上进行一次力竭运动,于运动前1d(Baseline)、运动前(Pre-Ex)、运动后即刻(Post-Ex)、运动后24h(Post-24h)、48h(Post-48h)和72h(Post-72h)分别测定肌肉酸痛强度,血浆、尿和淋巴细胞中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量以及血浆中肌酸激酶(CK)活性和丙二醛(MDA)含量,探讨8-OHdG作为运动机能监控标志物的可行性.结果显示,肌肉酸痛强度在运动后即刻明显升高(P0.01),24h达峰值(P0.01),72h恢复至正常水平;血浆CK活性在运动后24h开始升高(P0.01)并持续至72h(P0.01);血浆MDA含量和淋巴细胞8-OHdG含量均在运动后即刻显著升高(P0.01),24h恢复至安静水平(P0.05);血浆和尿液中8-OHdG含量在各时间点均无显著性变化(P0.05).血浆和尿液中8-OHdG含量在Baseline、Pre-Ex的两次测试间均无显著性差异,日间变异系数(CV)分别为72.8%(95%CI:57.2%~99.9%)和87.8%(95%CI:66.1%~130.5%).ELISA法测定8-OHdG的批内CV为2.25%~4.67%,批间CV为5.25%~7.12%.以上结果表明,虽然力竭运动可造成氧化应激、淋巴细胞DNA损伤和运动性肌肉损伤,但由于血浆和尿液中8-OHdG含量存在显著的日间生物节律变异,因此可能不是运动机能监控(DNA氧化损伤及过度疲劳)的敏感标志物.     

DNA主链构象与脱氧鸟苷组分构象相关性的喇曼分析

对小牛胸腺ＤＮＡ纤维样品溶解３ｈ内的空间构象变化过程进行了喇曼光谱分析，结果显示了表征脱氧鸟苷糖环折迭不同类型的６７２ｃｍ＾－１与６８３ｃｍ＾－１峰的同时存在，与ＤＮＡ分子主链不同特征峰的同时出现之间有着明显的联系。     

纳米氧化铜巯基乙胺修饰玻碳电极测定8-羟基-2'-脱氧鸟苷

制备了纳米氧化铜/巯基乙胺/玻碳电极(nano-Cuo/CA/GCE)电化学传感器.使用扫描电子显微镜、电化学阻抗图谱和循环伏安法对此修饰电板进行了表征,应用示差脉冲伏安法测定了8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-OH-dG).实验发现,8-OH-dG在nano-Cuo/CA/GCE上显示很强的电化学响应.在最佳实验条件下,测得的线性范围为0.40μM-44.0μM,检出限为0.07μM.实验结果表明此电极具有较好的抗干扰能力,并且被用于样品中8-OH-dG的测定.     

吸烟的重金属危害与DNA损伤

目的 探讨习惯性吸烟对血浆内重金属含量变化以及DNA损伤的影响.方法 湘南学院94名健康大学三年级男生,20名不吸烟者（对照组,C组）;74名吸烟者,按照吸烟数量分为E1组（≤20支/周）,E2组（＞20支/周）;测定每个大学生血浆内汞、镉、铅及8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的含量,并比较了组间有无差异.结果 C组,E1组,E2组血浆中：①汞含量分别为0.022±0.016、0.036±0.018、0.058±0.013 μmol/L;镉含量分别为0.012±0.008、0.020±0.010、0.031±0.013 μmol/L;铅含量分别为0.209±0.028、0.251±0.018、0.272±0.032 μmol/L,三组之间差异均有统计学意义（P 〈 0.01）;②8-OHdG分别为204.23±28.48、354.84±36.13、517.15±19.74 μg/L,三组之间差异有统计学意义（P 〈 0.01）;③吸烟者吸烟指数与血浆中镉、铅及8-OHdG的含量均呈正相关（r分别为0.646、0.520、0.743,P 〈 0.05）.结论 习惯性吸烟能够导致机体重金属的集聚性中毒,并且伴有机体DNA的损伤.随着吸烟量与吸烟时间的累积,这种有害效应的危险性也将显著增大.     

简易合成天然修饰核苷2'-脱氧古鸟苷

该文用改良的Pinner反应(通过加乙酰氯到甲醇中产生HCl,取代直接通HCl气体),将7-氰基-7-脱氮-2'-脱氧鸟苷(dPreQ₀)转化为7-甲脒基-7-脱氮-2'-脱氧鸟苷(2'-脱氧古鸟苷,dG⁺),产率为92.59%,其化学结构经核磁共振、高分辨质谱分析确证.优化了关键中间体dPreQ₀的合成纯化工艺.采用改良的Pinner反应,以2-氨基-4-氯吡咯并[2,3-d]嘧啶为起始物,通过7步反应制备dG⁺的总反应产率达到33%.dG⁺及其中间体的合成方法对其规模化合成具有重要意义,也为生物技术的发展提供支持.