不同试剂盒提取质粒中内毒素水平的比较

目的比较几种不同质粒提取试剂盒提取质粒中内毒素水平。方法选用6种市售商业化试剂盒:QIAGEN质粒小提试剂盒Plasmid Mini Kit(12123),QIAGNE无内毒素质粒大提试剂盒EndoFree PlasmidMaxi Kit(12362),康为世纪高纯质粒中提试剂盒(CW0502),A厂家无内毒素质粒中提试剂盒,B厂家无内毒素质粒小提试剂盒,C厂家无内毒素质粒小提试剂盒(BSC01S2D)。分别提取质粒DNA,应用鲎试剂显色基质法和凝胶法检测所提质粒中内毒素水平。结果6种试剂盒提取质粒得率、A260/A280及A260/A230值均较好,但内毒素水平各不相同,其中各厂家标明无内毒素试剂盒提取质粒中内毒素水平相对较低,QIAGEN无内毒素质料大提试剂盒提取的质粒中内毒素小于0. 125 EU/μg。结论6种质粒提取试剂盒使用时应根据实际情况进行选择。     

基因工程中的载体

基因载体是指将基因或其它核酸物质运载到细胞中的工具.其化学本质可以是蛋白质或多肽、核酸、脂类、糖类、其它有机分子或它们的复合物.载体系统在生物技术中具有不可或缺的作用.     

改进的细菌转化试验方法

本文对“细菌转化实验方法”进行了改进。用改良碱酶法制备的质粒DNA(PBR322)作供体,转化经氯化钙处理的受体菌E.Coli C600,使后者获得抗氨苄青霉素和抗四环素的特性。改进后的转化方法操作简便,不受设备限制。     

五种药剂对美洲斑潜蝇Liriomyza sativae的毒力测定

美洲斑潜蝇是近年来传入我国的一种检疫性害虫,给疏菜、花卉生产造成了很大损失。本文采用液浸法对豇豆上的美洲斑潜蝇室内子一代幼虫进行了毒力测定.结果表明,毒死蜱、杀虫双、氯氰菊酯、毒杀土、制潜灵对美洲斑潜蝇的LC_(50)分别为:272.02、254.46、109.16、85.76、32.42ppm。制潜灵的毒性最强、毒杀土、氯氰菊酯次之,毒死蜱、杀虫双较差。     

结构不对称杀虫剂丙硫磷复配制剂的研制与应用

测定不同配比的氟氰菊酯与丙硫磷复配制剂（简称氯丙制剂）对褐棘蛾和马尾松毛虫幼虫的触杀毒力、共毒系数和增效配比,加工成不同比例的氯丙复合乳油,对两种供试昆虫进行了防治效果检验。结果表明,以有效成分间１：７的比例配制的氯丙复剂增效明显,成本较低,具有较理想的防治效果。     

胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND4倍剂量免疫接种效果之影响

为了研究用IBD疫苗进行鸡胚免疫的可行性，探讨了胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND4倍剂量免疫接种效果的影响．将IBD中等毒力疫苗接种18日龄鸡胚，出壳后采用4倍剂量ND疫苗进行免疫，通过抗体水平、免疫细胞数量及功能和免疫保护力等的检测，结果表明：胚期接种IBD中等毒力疫苗对雏鸡4倍剂量免疫仍具有免疫抑制作用．     

中华哲水蚤线粒体DNA COI基因序列分析

采用苯酚-氯仿-异戊醇(25：24：1)提取、异丙醇沉淀、酒精洗涤、TE缓冲液保存方法提取了采自胶州湾青岛海域的中华哲水蚤基因组DNA；以相应引物经PCR扩增得到线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ亚基基因(mtCOD)片段；PCR产物采用化学法进行质粒重组(载体pGEM—T Easy Vector)、热休克转化重组质粒至大肠杆菌感受态细胞(JM109)、氨苄LB培养基扩大培养；测序．结果表明。中华哲水蚤线粒体COI碱基大小为710bp(国际基因库索引号AY665663)。其碱基组成A、C、G、T含量分别为24．23％、19．15％、22．54％和34．08％；G C含量为41．69％。A T为58．31％．     

苦豆子、铁棒锤生物碱对菜青虫的毒力测定

苦豆子、铁棒锤生物碱对菜青虫毒力测定的结果表明，苦豆子、铁棒锤生物碱对菜青虫均有较好的胃毒作用，用致死中量表示苦豆子生物碱LD50＝30．07μg/g，铁棒锤生物碱LD50＝38．83μg/g．室内触杀作用试验和田间防效试验表明，苦豆子生物碱有效剂量为2000μg/mL、600μg/mL和铁棒锤生物碱有效剂量为2000μg／mL时，对菜青虫有很好的防治效果，在施药后72h，校正防治效果可速80％-90％，且仍呈逐渐增大趋势(活虫数逐渐减少趋势)．     

八肋游仆虫信息素在大肠杆菌中的表达

信息素在八肋游仆虫接合生殖过程中起着重要的诱导配对作用，为了进一步研究其诱导机制，根据已知的基因序列，应用PCR技术，扩增信息素G3基因，并将该基因插入表达载体pGEX-6P1中，构建了重组表达质粒pGEX-6P1-G3．重组菌在37℃下，经1．0mmol／L IPTG诱导，12％SDS-PAGE分析，在37kDa处出现明显的特异目的带。