盐地碱蓬Δ^1—二氯吡咯—5—羟酸合成酶基因（SsP5CS）的克隆及表达特性

从盐地碱蓬（suaeda salsa)中克隆了Δ^1-二氯吡咯－5－羟酸合成酶基因的cDNA片段（S.salsa Δ^1-pyrroline－5－carboxylate synthase gene,Ssp5CS),Southern杂交表明SsP5CS基因在盐地碱蓬基因组中只有一个拷贝；Northern杂交结果表明，不同盐处理（400mmol/L NaCl)时间下SsP5CS在盐地碱蓬叶中的表达量明显增加，同时盐胁迫条件下盐地碱蓬叶中的脯氨酸含量与对照组相比显著的增加， 并且其渗透调节能力也逐渐增强，推测SsP5CS基因可能在保护盐地碱蓬免受盐胁迫损伤的过程中起到重要作用。     

满江红鱼腥藻glnA基因上游调控区的克隆及其序列分析

以满江红鱼腥藻（Ａａｃ）提取总ＤＮＡ为模板,通过ＰＣＲ技术,扩增得到其谷氨酰胺合成酶基因（ｇｌｎＡ）上游区．经酶切得到４０９ｂｐ的片段,并将其连接到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡｋｓ＋上测序．将测序结果与Ａｎａｂａｅｎａ７１２０调控序列比较,有９８２％的同源性．在上游调控中也具有ｎｉｆｌｉｋｅ和Ｅ．ｃｏｌｉｌｉｋｅ启动子,值得注意的是,调节蛋白ＶＦ１的结合位点正好位于ｎｉｆｌｉｋｅ启动子上．所克隆的片段不但对蓝藻固氮、泌氨的基因调控研究具有意义,也对表达载体的构建具有实用价值．     

神经系统中的重要信使分子——NO

体内的ＮＯ是在ＮＯ合成酶催化下由精氨酸分解产生的。作为一种气体分子在神经系统中具有细胞间信使的作用。它主要通过谷氨酸递质的ＮＭＤＡ受体激活而生成，引起靶细胞ｃＧＭＰ升高，产生相应的生理效应。它介导了兴奋性传导，对小脑、海马等神经元上突触可触性和长时程增强作用产生重要影响。但ＮＯ过量产生或释放时可导致神经毒性。     

转基因满江红鱼腥藻细胞内颗粒体的变化

用透射电镜观察NPTⅡ(新霉索磷酸转穆酶Ⅱ eomycin phosphotransferase Ⅱ)在满江红鱼腥藻染色体gI-LA(谷氨酰氪合成酶基因)位点定点整合后藻细胞内颗粒体的变化．转基因后的满江红鱼腥藻细胞内的代谢发生了很大的变化，为了快速适应和自我调节这一变化．细胞内的储藏颗粒处在积聚与解积聚的动态转化过程中．通过了解储藏颗粒的结构变化，可为研究转基因藻细胞光合同氮及生理生化的变化提供物质结构方面的信息．     

噬夏孢欧文氏菌类crtB基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

噬夏孢欧文氏菌类胡萝卜素合成相关基因crtB,编码八氢番茄红素合成酶。利用PCR技术扩增出crtB基因,克隆进表达载体,构建表达质粒pET-15bcrtB。重组质粒转化大肠杆菌,构建工程菌株。经IPTG诱导,工程菌高效表达了重组八氢番茄红素合成酶,表达量占菌体总蛋白的40%。重组蛋白以包含体形式存在,包含体经洗涤、尿素溶解、复性并经镍离子树脂亲和层析、Superdex 75凝胶层析柱纯化,得到了电泳纯的重组八氢番茄红素合成酶,带有His-tag的该蛋白分子量为35 kDa,pI值为7.3。     

胸苷酸合成酶不同基因型在胰腺癌细胞表达与化疗敏感性的关系

本实验探讨胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TYMS)不同基因型在胰腺癌细胞中的表达水平与胰腺癌细胞化疗敏感性的关系.利用PCR及凝胶电泳分析不同胰腺癌细胞TYMS基因型,CCK-8试剂盒检测细胞的化疗敏感性,使用Real-time PCR及Western Blot分别检测TYMS mRNA与蛋白表达水平.结果发现5种人胰腺癌细胞TYMS基因5'-UTR串联重复序列形成3种基因型,分别是2R/2R,2R/3R与3R/3R.3R/3R基因型细胞TYMS mRNA表达水平较2R/2R及2R/3R明显增高,3R/3R细胞TYMS蛋白表达也明显高于2R/2R和2R/3R细胞.5-FU化疗敏感性检测显示3R/3R基因型细胞抑制率明显低于2R/2R,2R/3R,差别有统计学意义(P0.05).研究表明不同胰腺癌细胞株中TYMS各基因型的基因表达(mRNA及蛋白)量的高低直接影响其对5-FU的化疗敏感性.     

表达长喙田菁SrPCS4烟草的获得及Cd抗性研究

植物螯合肽(phytochelatins,PCs)在植物解除重金属的毒性方面具有重要作用,是以谷胱甘肽为底物,在植物螯肽合成酶(phytochelatin synthase,PCS)催化下合成的.作者已经克隆得到的长喙田菁(Sesba-nia rostrata)植物螯合肽合成酶SrPCS4 cDNA长为1035 bp,其ORF编码177个氨基酸,以pHANNIBAL及pART27为基础,构建了CaMV35S启动子驱动的SrPCS4基因植物表达载体pAM25,采用电击转化方法将pAM25导入根癌农杆菌EHA105,并通过改良叶盘转化方法用该菌株对烟草进行了转化,对转基因烟草进行了PCR与northern-blot检测,研究结果表明得到了表达该基因的烟草,但表达该基因的烟草不能够提高对Cd的抗性.     

研究发现治疗肥胖潜在靶点

美国研究人员8月2日报告说,他们在动物实验中发现,一种名为脂肪酸合成酶的物质是治疗肥胖症的潜在靶点。美国华盛顿大学医学院的研究人员发现,实验鼠摄入碳水化合物等食物后生成脂肪时,脂肪酸合成酶会发挥重要作用。他们利用转基因技术培育了脂肪细胞中不含脂肪酸合成酶的实验鼠,结果它们即便在日常摄入高脂食物也不会变胖。实验鼠体内有两种脂肪——白色脂肪和棕色脂肪,     

枯草杆菌TrpRS与小螺旋DNA的紫外光定点交联

为研究枯草杆菌色氨酰－tRNA合成酶（TrpRS）与小螺旋DAN的相互识别及其结构与功能的关系，人工合成了4种小螺旋DNA（其中3种在不同位点带有光化学交联试剂s^4T），纯化了枯草杆菌TrpRS，设计制作紫外交联仪，进行了TrpRS与小螺旋DNA的紫外光定点交联实验，优化了紫外交联条件，实验结果表明，小螺旋DNA分子中对应于tRNAT^rp73，72位的碱基与TrpRS有直接的相互作用，而对应于tRNA^Trp55位的碱基与TrpRS无直接的相互作用，紫外交联产物的量与紫外光照射剂量、TrpRS浓度、小螺旋DNA浓度呈正相关。     

氯磺隆的化学行为

氯磺隆是典型的乙酰乳酸合成酶抑制剂 ,在酸性条件下主要以中性分子形式存在 ,其水解反应是准一级的SN2 反应 ;在中性或碱性条件下 ,主要以阴离子形式存在 ,水解反应较慢 .在土壤中 ,除化学降解外 ,微生物降解也是氯磺隆另一重要环境归趋 ,而光化学降解并非氯磺隆环境归趋的主要方式 .