rhB工程菌在不同浓度氨苄青霉素选择压力下平板和摇瓶100代稳定性考察

rhB工程菌平板和摇瓶在不同浓度氨苄青霉素选择压力下 ,培养传代 10 0代 ,经各项检测表明 :rhB表达水平、质粒性状及其遗传稳定性和染色特性、菌体形态等理化特性均与原代菌无差异 ,且无支原体及其他微生物污染 ,可作为生产用菌株 .     

重组pET30a/hsBLyS质粒在BL21(DE3)菌株中的稳定性观察

将构建的含有pET30a/hsBLyS重组质粒的BL21 (DE3)菌种,在含硫酸卡那霉素的平板培养基划线连续传代至 100代 100代次菌种经显微观察,为典型的革兰氏阴性大肠杆菌,生化特性没有改变 提取0、50、100代质粒DNA限制性内切酶切割检查,酶切图谱没有改变,DNA测序未见hsBLyS基因变异 传代前后菌种诱导表达hsBLyS,表达水平和hsBLyS生物学和免疫学活性均无明显差异     

重组pEBOa／hsBLyS质粒在BL11（DE3）菌株中的稳定性观察

将构建的含有pET30a/hsBLyS重组质粒的BL21(DE3)菌种,在含硫酸卡那霉素的平板培养基划线连续传代至100代.100代次菌种经显微观察,为典型的革兰氏阴性大肠杆菌,生化特性没有改变.提取0、50、100代质粒DNA限制性内切酶切割检查,酶切图谱没有改变,DNA测序未见hsBLyS基因变异.传代前后菌种诱导表达hsBLyS,表达水平和hsBLyS生物学和免疫学活性均无明显差异.     

斜面传代法保藏食用菌种的方法改进

在通用的斜面传代保藏法的基础上,研究了增加培养基的装量,在培养基中加入缓冲剂和把棉塞换为无菌胶塞对菌种保藏的影响,结果表明,这三种措施都可以使保藏的菌种在较长的时间内保持原有的优良特征和活性,延长了斜面传代法保藏菌种的保藏时间,减少了移植传代的次数。     

钩端螺旋体的保存方法

钩端螺旋体引起的钩体病是一种严重人兽共患传染病，在医学微生物学教学与科研中经常使用钩端螺旋体菌种，钩端螺旋体按常规方法保存一般每月传代１次，超过这时间易于死亡，频繁传代，费时费力，也增加钩端螺旋体菌种污染机会。目前在国内多数单位无特殊设备情况下，能否长期保存钩端螺旋体，具有重要意义。我们通过对３种途径保存方法进行比较，经过多年的实践，培养钩端螺旋体传代时间延长至９０ｄ，而安瓶封闭保存至少达到６年以上。１材料与方法 按以下顺序配置无血清的柯氏培养基，其成分为国产蛋白陈 ０．４ ｇ、ＮａＣ１ ０．７ ｇ…     

福建霞浦海区刺激隐核虫虫株鉴定及生活史观察

分离患"白点病"的大黄鱼(Pseudosciaena crocea)鱼鳃上的刺激隐核虫(Cryptocaryonirritans),提取基因组DNA,PCR扩增rDNA-ITS-1基因并进行序列分析.结果显示:该虫的rDNA-ITS-1序列与刺激隐核虫PYH4.12株及Chiayi虫株完全一致,表明福建霞浦流行的"白点...     

实验用近交系小型猪WZSP表皮干细胞建系的初步研究

目的将五指山猪(Wuzhi Shan Pigs,WZSP)表皮干细胞传至15代以上,初步建立实验用近交系小型猪WZSP表皮干细胞系。方法采集WZSP耳组织,通过中性蛋白酶消化获得表皮细胞,再通过0.25%胰酶 0.02?TA消化制成单个表皮细胞悬液,接种在Ⅳ型胶原包被的培养瓶内,采用无血清条件培养基培养,0.25%胰酶消化传代。对所培养表皮干细胞进行AKP染色鉴定。结果表皮干细胞能够快速粘附在Ⅳ型胶原上,呈克隆状生长,已传至15代以上,传代间隔为7 d左右;取第5代细胞进行AKP染色呈阳性。结论在本实验条件下,建立ESCs细胞系是可能的,经鉴定,所培养细胞具有干细胞基本特性。     

斜面传代法保藏食用菌菌种的方法改进

在通用的斜面传代保藏法的基础上，研究了增加培养基的装量，在培养基中加入缓冲剂和把棉塞换为无菌胶塞对菌种保藏的影响，结果表明，这三种措施都可以使保藏的菌种在较长的时间内保持原有的优良特征和活性，延长了斜面传代法保藏菌种的保藏时间，减少了移植传代的次数 .     

甲型肝炎病毒(H2株)在三种细胞中的感染性滴度比较

本文用恒河猴胚肾传代细胞（ＭＥＫ）、人胚肺成纤维二倍体细胞（ＫＭＢ１７和２ＢＳ）对ＨＡＶ－Ｈ２株感染性滴度进行了初步研究,结果显示Ｈ２株在ＭＥＫ上感染性滴度（ＣＣＩＤ５０／ｍＬ）最高,ＣＣＩＤ５０／ｍＬ比ＫＭＢ１７,２ＢＳ平均ＣＣＩＤ５０／ｍＬ高１．２８ｌｏｇ和１．５９ｌｏｇ．经统计学分析,Ｐ＜０．０５,有显著性差异,证实ＭＥＫ对Ｈ２株最敏感．ＭＥＫ可能是测定ＨＡＶ感染性滴度和繁殖ＨＡＶ较理想的细胞