大豆（G．max）胰蛋白酶抑制剂SBTi－A_2新类型Ti~x的纯化及其性质研究

用丙酮脱脂、稀酸处理、硫酸铵盐析和ＤＥＡＥ－５２纤维素柱层析等方法从大豆（Ｇ．ｍａｘ）中分离纯化得一种新类型胰蛋白酶抑制剂Ｔｉｘ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示Ｔｉｘ与已知的大豆蛋白酶抑制剂Ｔｉａ的相对分子质量均为２１０００，且Ｎ－末端均为ＡｓＰ；亲和电泳分析显示Ｔｉｘ与Ｔｉａ均可与胰蛋白酶完全结合；ＢＡＥＥ法测定显示出Ｔｉｘ对胰蛋白酶活性的抑制略小于Ｔｉａ；两者经ＣＮＢｒ裂解后电泳分析得到相同带型；纯化样品的氨基酸组成分析显示Ｔｉｘ比Ｔｉａ多了两个碱性氨基酸，因而Ｔｉｘ带有更多的正电荷．研究结果初步证明Ｔｉｘ是Ｋｕｎｉｔｚ类型中一种新的胰蛋白酶抑制剂．     

嗜热脂肪芽孢杆菌中一株对分解代谢物不敏感突变型的α-半乳糖苷酶的纯化及其性质

棉子糖广泛存在于植物界,在甜菜储藏过程中含量逐渐增加。在以甜菜为原料的制糖工业中棉子糖的存在妨碍蔗糖结晶。文献报导用微生物来源的α-半乳糖苷酶处理甜菜糖蜜水解棉子糖,可以提高蔗糖得率和结晶的质量。不少真菌和细菌能产生α-半乳糖苷酶,例如赤色被包霉、红曲霉、杜邦青霉菌、泡盛酒曲霉、大肠杆菌、脂肪嗜热芽孢杆菌、卡尔斯伯酵母菌以及我国黑龙江应用微生物研     

中国多年生野生大豆Glycine亚属rbcS基因的结构和系统发生的研究

用PCR法从我国多年生野生大豆Glycine亚属的烟豆 (GlycinetabacinaBenth .)和多毛豆 (短绒野大豆GlycinetomentellaHayata)的总DNA中扩增到Rubisco小亚基基因 (rbcS) ,2个基因的顺序分析结果表明它们包含了 5 37bp长的编码区 ,其编码的 178肽的Rubisco小亚基前体由 5 5个氨基酸组成的前导肽和 12 3个氨基酸组成的成熟肽组成 .基因内有 2个内含子 .比较Glycine亚属内烟豆和多毛豆之间的rbcS间碱基同源性为94 5 % ,差别主要存在于内含子中 ;Soja亚属的G .soja和G .max之间该基因同源性高达 99 7% ,而Glycine亚属和Soja两亚属之间rbcS同源性则为 84 8% .从这 2个亚属内 4个种的rbcS成熟肽 12 3个氨基酸顺序可知 ,同一亚属内 2个种之间仅有 2～ 3个氨基酸不同 ,而Glycine亚属和Soja亚属之间差异增大至 5～ 6个氨基酸 .系统进化树分析也表明Glycine亚属与Soja亚属在进化过程中分离较早 ,这从分子水平上为大豆属的分类研究提供了科学的依据 .     

与小麦高分子量谷蛋白基因探针杂交的阳性克隆分离及基因在重组子上的定位

将经San 3A部分酶切后的小麦总DNA片段克隆到λCharon40载体上构建了小麦基因文库.以两个人工合成的同源于小麦高分子量(HMW)谷蛋白基因的片段对此基因库进行筛选,获得了两个阳性克隆,推测其中一个包含了HMW谷蛋白全部的基因顺序.两个克隆的部分限制性内切酶位点已被确定.在Southern杂交中,用位于基因编码区内的寡核苷酸片段作探针,将阳性部分定位在一定的酶切片段上.     

栽培和野生大豆核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶的结晶及其大小亚基等电聚焦分析

栽培大豆和野生大豆叶片的蛋白抽提液经硫酸铵盐析、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０柱层析以及浓缩透析等步骤,分别得到核酮糖－１,５－二磷酸羟化酶（简称Ｒｕｂｉｓｃｏ）的结晶．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ酶标抗体技术鉴定证实为Ｒｕｂｉｓｃｏ．用ＩＥＦ－ＰＡＧＥ方法分析这２种不同进化类型大豆的Ｒｕｂｉｓｃｏ 大小亚基,发现其具有高度同源性     

大豆KUNITZ型胰蛋白酶抑制剂的稳定性及抗虫性研究

大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂（SBTi-A2)存在于种子中，2种kunitz型胰蛋白酶抑制剂Ti^a和T^1d得到纯化，并对它们的pH稳定性和温度稳定性进行了比较研究，而且通过人工饮料喂养鳞翅目昆虫棉铃虫来研究SBTi-A2的抗虫性，结果显示，棉铃虫的幼虫喂食含有Ti^a的人工饲料后，表现出生长延缓、体重减轻、羽化率降低、死亡率增加，由此显示了SBTi-A2作为生物农药及利用转基因方法使作用提高抗虫性的应用前景。