马立克氏病毒感染的鸡肝脏肿瘤中热应激蛋白108含量的增高及其基因序列分析和表达的研究

从马立克氏病毒(MDV)引起的鸡肿瘤肝脏组织中纯化热应激蛋白(hsp)108,蛋白浓度测定结果显示,MDV感染后的鸡肝脏hsp108蛋白含量明显升高,约为正常鸡肝脏hsp108的4倍,发现鸡肝脏组织中hsp108含量在发生肿瘤后显著升高.经酸释放得到与hsp108结合的多肽,高压液相层析后没有发现MDV特异性多肽;对hsp108进行了基因序列分析,MDV感染引发的鸡肿瘤肝脏组织的hsp108与正常鸡肝脏组织的hsp108氨基酸完全相同,没有发生变异;克隆了鸡肝脏hsp108基因,将其在大肠杆菌中表达,纯化后与一个已知的乙肝病毒抗原表位进行体外组装,结果显示重组hsp108蛋白可以和乙肝病毒抗原肽在体外特异性结合,具有多肽结合活性     

猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因原核表达产物的检测应用

利用猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的原核表达产物,分别建立了检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的间接ELISA方法及乳胶凝集试验．对200份血清样品分别应用建立的间接ELISA方法和乳胶凝集试验,及由IDEXX公司生产的EUSA检测试剂盒进行抗体检测,结果显示,乳胶凝集试验及间接ELISA方法与IDEXX公司试剂盒相比,检出符合率分别达78％和91％．建立的乳胶凝集试验还需改进,而N蛋白-ELISA方法具有良好的特异性和敏感性,是一种有应用前景的检测方法．     

表达鸡传染性支气管炎病毒SD/97/01株S1蛋白的重组杆状病毒的构建

采用BAC－TO－BAC杆状病毒表达载体体系构建了表达鸡传染性支管炎病毒（IBV）呼吸型毒株SD／97／01S1蛋白的重组杆病病毒，含SD／97／01株S1基因原重组质粒p MDSD9701S1用BamHI和SalI双酶切后，回收的片段并克琶杆病病毒转座载体pFASTBACHTa中多角体基因启动子的下游，筛选出重组转座质粒pFASTSD9701S1U并转化大肠杆菌DH10BAC后,获得重组穿梭质粒rBacmidSD9701S1，用重组穿俊质粒DNA转染昆虫Sf9细胞，获得了含SD／97／01S1基因的重组杆状病毒rAcSD9701S1，重组病毒感染Sf9细胞后，用SDS－PAGE、Westernblot和IFA对细胞表达产物进行检测和分析。结果表明：构建的重组杆状病毒能够在昆虫细胞中表达SD／97／01的S1蛋白，该蛋白具有天然蛋白的抗原性。