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大肠杆菌F107菌毛A亚单位基因的克隆与鉴定 总被引:6,自引:0,他引:6
用PCR技术,从水肿病大肠杆菌临床分离株中扩增出F107A亚单位基因(fedA)的510bp的全序列。将该PCR扩增产物在BamHⅠ和EcoR Ⅰ位点克隆进pUC18质粒载体,并转化大肠杆菌TG1,再根据限制性内切酶酶切分析筛选出含有fedA的重组质粒pf107G。将重组质粒进行序列测定,结果表明,此重组质粒中的插入序列与发表的fedA是一致的,证明该重组质粒就是含有fedA基因的重组质粒。 相似文献
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表达鸡传染性支气管炎病毒SD/97/01株S1蛋白的重组杆状病毒的构建 总被引:4,自引:0,他引:4
采用BAC-TO-BAC杆状病毒表达载体体系构建了表达鸡传染性支管炎病毒(IBV)呼吸型毒株SD/97/01S1蛋白的重组杆病病毒,含SD/97/01株S1基因原重组质粒p MDSD9701S1用BamHI和SalI双酶切后,回收的片段并克琶杆病病毒转座载体pFASTBACHTa中多角体基因启动子的下游,筛选出重组转座质粒pFASTSD9701S1U并转化大肠杆菌DH10BAC后,获得重组穿梭质粒rBacmidSD9701S1,用重组穿俊质粒DNA转染昆虫Sf9细胞,获得了含SD/97/01S1基因的重组杆状病毒rAcSD9701S1,重组病毒感染Sf9细胞后,用SDS-PAGE、Westernblot和IFA对细胞表达产物进行检测和分析。结果表明:构建的重组杆状病毒能够在昆虫细胞中表达SD/97/01的S1蛋白,该蛋白具有天然蛋白的抗原性。 相似文献
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