卵源性多价抗蝮蛇毒IgY的制备及检测

采用短尾蝮(Gloydius brevicaudus)、乌苏里蝮(Gloydius ussuriensis)、岩栖蝮(Gloydius saxatilis)、原矛头蝮(Protobothrops mucrosquamatus)和菜花原矛头蝮(Protobothrops jerdonii)5种蛇毒的混合物制备类毒素,免疫20~22周龄莱航母鸡并收集鸡卵,用冻融法、水稀释法和PEG法提取卵黄多价抗蝮蛇毒IgY,并用酶联免疫法和蛋白印迹法对所得IgY效价进行检测.结果表明:母鸡在免疫期间产下的鸡卵中,均存在可有效中和上述5种蛇毒的卵黄抗体IgY,且诱导量随免疫强度的提高而增加;不同方法所得有效抗体的含量存在一定差异,且同一提取法所得抗体对不同蛇毒的交叉中和能力也不同,这可能与动物对5种蛇毒的免疫应答存在差异有关.     

国产六种小型蝰科毒蛇蛇毒免疫原性比较

以国产小型蝰科毒蛇短尾蝮（Gloydius brevicaudus）、岩栖蝮（Gloydius saxatilis）、乌苏里蝮（Gloydius ussuriensis）、山烙铁头（Ovophis monticola）、原矛头蝮（Protobothrops mucrosquamatus）和竹叶青（Trimeresurus stejnegeri）蛇毒为对象，用国产商用抗蝮蛇毒血清和抗五步蛇毒血清分别检测这6种蛇毒的免疫原性。间接ELISA和western blot两种方法的检测结果表明：6种蛇毒有共同的抗原组分，且在免疫反应中大部分组分表现出免疫原性；同种蛇毒和抗血清之间显示出最高的免疫结合强度；近缘物种间的免疫结合强度更接近；随着抗体浓度的升高，免疫结合强度增加。抗蝮蛇毒血清对短尾蝮、乌苏里蝮和岩栖蝮蛇毒的免疫中和效价高于抗五步蛇毒血清；两种抗蛇毒血清中和山烙铁头、原矛头蝮和竹叶青蛇毒的效价相近。