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经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 H5N1亚型1.7kb HA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacA的蜜蜂蜂毒素分泌信号下游中,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTM DNA)共转染Sf9昆虫细胞。将重组杆状病毒感染HFive细胞,72h左右收获细胞,超声波裂解,SDS—PAGE结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得表达。蛋白胶薄层扫描分析显示:表达的HA蛋白占重组杆状病毒感染细胞总蛋白含量的17.1%。Western-blot 及血凝实验结果显示,表达的禽流感H5N1亚型病毒HA蛋白具有生物学活性。表达的H5 HA蛋白定量乳化后,皮下多点注射免疫SPF 级BALB/c雌性小鼠,免疫后产生了H5 HA特异抗体,并在三免前后达到并保持较高水平。用致死剂量的HPAIV H5N1攻击小鼠,免疫组小鼠提供了100%的保护力,而对照组小鼠先后发病且死亡:为研制禽流感H5N1亚型病毒亚单位疫苗,防制禽流感奠定了基础。 相似文献
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1 选地
1.1 地势
应该选择地势平坦、窝风向阳,一般坡度不超过5度的平缓地.要南向、西北向、西南向较好.…… 相似文献
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基于可视化原理对桥梁单桩荷载-沉降特性进行了探讨,对于竖向荷载作用下的桥梁单桩,采用了荷载传递法进行了分析。在Visual Basic 6.0集成环境下编制了单桩荷载-沉降可视化分析程序,该可视化程序不但可以模拟桩基加载过程,而且可以实时动态显示桩身各处位移、剪力、弯矩以及桩侧摩阻力和桩端阻力的变化过程,具有工程实际意义。 相似文献
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本文研究了5-(4-磺基-1-荼偶氮)-8-羟基喹啉在表面活性剂 OP 存在下与钴(Ⅱ)的显色反应的条件。试验结果表明,在 pH5. 6~6. 6的 KH_2PO_4-NaOH 缓冲溶液和 OP 存在下,钴(Ⅱ)与该试剂能形成稳定的红色配合物。其λ_(max)=510nm,ε_(510) =6. 69×10~4L·mol~(-1) ·cm~(-1) ,钴(Ⅱ)∶试剂=1∶3,钴(Ⅱ)含量在0~0. 7μg/ml 范围内符合比尔定律。本文所拟定的分析方法用于维生素 B_(12) 中微量钴的测定,获得满意结果。 相似文献
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对LIJ-14型流量计实验装置进行了改进,在原装置上增加了循环泵、循环水箱及循环水管,选择了适宜流速,进行了泵的选型计算,收到了节水、提高测试结果准确度的效果. 相似文献
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实验室是学校开展教学科研的重要平台,是培养学生实验技能、知识创新和科技创新能力的必备场所.阐述高校化学实验室安全管理的重要性,并以朝阳师范高等专科学校为例提出实验室在人员配备及其安全意识,实验室管理制度、经费、硬件、危险化学品的使用和管理等方面存在的问题,有针对性地给出相应解决策略,以保障实验室安全运行,培养现代化人才,促进学校快速和谐发展. 相似文献
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SARS灭活疫苗对猴体的免疫原性及保护效果观察 总被引:2,自引:0,他引:2
秦鄂德 石慧颖 唐琳 王翠娥 常国辉 丁志芬 赵铠 汪建 于曼 司炳银 刘建源 陈则 吴东来 彭文明 孟庆文 刘伯华 韩伟国 尹训南 段鸿元 杨保安 战大伟 田龙 程晓洁 吴劲松 谭刚 李懿 李豫川 李双利 刘永刚 刘洪 邓永强 张雨 孔宪刚 范宝昌 姜涛 许树利 王笑梅 李昌文 吴晓红 吕富双 赵敏 祝庆余 《自然科学进展》2004,14(10):1105-1110
观察SARS灭活疫苗对猴体的免疫原性及保护效果,为进一步的临床研究奠定基础.将BJ01株SARS病毒感染的Vero细胞的培养液过滤澄清,经β-丙内酯灭活和超滤浓缩,然后经凝胶过滤和离子交换层析获得纯化的SARS灭活疫苗.经HPLC分析其纯度为97.6%,在电子显微镜下可观察到SARS病毒样颗粒.蛋白质印迹(westernblotting)分析表明,纯化SARS灭活疫苗可与SARS患者恢复期血清起反应.纯化的SARS灭活疫苗符合有关的质量标准.用SARS灭活疫苗免疫猴体可产生高效价的中和抗体,可阻止SARS病毒在猴体内增殖,且对SARS病毒攻击具有保护作用.在低中和抗体情况下,用SARS病毒攻击免疫猴后没有出现感染增强现象.猴体免疫SARS灭活疫苗后,无论正常剂量还是大剂量疫苗免疫,均未发现局部和全身副反应,表明SARS灭活疫苗对猴体是安全的. 相似文献
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通过载体表达siRNAs抑制禽流感病毒复制的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
禽流感病毒是养禽业危害最严重的病原微生物之一。为探讨小干涉RNA(siRNA)对A型禽流感病毒复制的干扰作用,以H5亚型AIV PB2基因为靶序列,设计合成了4对编码siRNAs的DNA序列,将其克隆到psiRNA-hH1neo载体中,构建siRNAs表达载体,鉴定正确后将重组质粒转染MDCK细胞,采用G418筛选建立抗性细胞系,用血凝(HA)试验和real time RT-PCR试验检测抑制效果, 在细胞水平筛选出具有高效抑制AIV复制的2个靶位点PB2-1154、PB2-342、为AIV的基因功能研究,抗病毒药物的开发和转基因动物的研究奠定了基础。 相似文献
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为解决学生在认识和研究植物生物学特性过程中的关于某些特例不在现有的概念和范畴中的困惑,以学生在课外探究实践活动中发现的榕树植物根系类型等特例难于归属的问题为例,通过搜集佐证资料,提出了值得商榷的增置混根系这一植物根系新类型的建议,并对相应概念进行了描述,由此提升了学生的生物科学素养. 相似文献