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修饰合成冬鲽抗冻肽基因的设计和克隆 总被引：7，自引：3，他引：4
动物界和植物界密码子使用频率不同,冬Ｄｉｅ抗冻肽中丙氨酸占６０％而且偏爱ＧＣＣ,３８个Ａｌａ密友子中２３个为ＧＣＣ。我们设计合成抗冻肽基因时采用了植物基因常用密码子,用甘薯信号肽序列取了抗冻肽的ｐｒｅ序列,省略了Ｐｒｏ序列,并 信号肽下游二、四、八拷贝正向串联的成太的修饰基因,经测序证实与设计完成一致。利用ＱＩＡ表达系统,在大肠杆菌中实现了ＤＨＦＲ－成熟抗冻肽单体和二体的融合表达。 相似文献
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我们设计和合成了切割蜜瓜成熟果实ACC氧化酶mRNA的GUC^86、GUC^388、GUC^534的三重锤头型核酶（HhRz)和阻断转录的反义RNA（AR） 基因,并构建了二、四、八联体HhRz和AR基因。为了在体外和体内检测HhRz是否切割ACC氧化酶mRNA,在E.cloliDE3rna-菌株中克隆了同域和跨域作用的（HhRz)n-AR和靶子ACC氧化酶mRNA表达系统。又构建了植物体组成型和诱导型（HhRz)n-AR表达载体。 相似文献
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美洲拟鲽（Pseudopleuronectes americanus）抗冻肽基因在大 … 总被引：3，自引：1，他引：2
将美洲拟鲽抗冻肽基因克隆于原核高效表达载体ｐＫＫ２３－３中,经酶切分析、ＰＣＲ检测筛选出重组克隆ｐＭＫ１１,转化大肠杆菌ＪＭ１０９和ＤＨ５α,ＩＰＴＧ诱导２￣３ｈ后,超声波裂解细菌产生,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱分子量９ｋＤａ处显示出一条明显的蛋白带,与美液拟鲽抗冻肽大小一致,表明美洲拟鲽抗冻肽基因在大肠杆菌中表达,为进一步天空抗冻肽基因在大肠杆菌中的表达水平及条件打下基础。 相似文献
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将美洲拟鲽抗冻肽基因克隆于原核高效表达载体ｐＫＫ２２３－３中,经酶切分析、ＰＣＲ检测筛选出重组克隆ｐＭＫ１１,转化大肠杆菌ＪＭ１０９和ＤＨ５α,ＩＰＴＧ诱导２～３ｈ后,超声波裂解细菌产物,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱分子量９ｋＤａ处显示出一条明显的蛋白带,与美洲拟鲽抗冻肽大小一致,表明美洲拟鲽抗冻肽基因在大肠杆菌中表达,为进一步研究抗冻肽基因在大肠杆菌中的表达水平及条件打下基础． 相似文献
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