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抗棉铃虫组织蛋白酶B单克隆抗体的制备及鉴定 总被引：1，自引：1，他引：0
分别以棉铃虫组织表达的组织蛋白酶B和基因重组的大肠杆菌表达的组织蛋白酶B为抗原免疫BALB／c小鼠，选择血清抗体滴度高的免疫小鼠，取其脾细胞和Sp2／0骨髓瘤细胞进行细胞融合．经ELISA法筛选阳性克隆和有限稀释法克隆细胞，共获得分泌抗组织蛋白酶B的单克隆抗体杂交瘤细胞3株，分别命名为9D5，100E2和100H6．以ELISA法和Western blotting法对3株杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行了特异性鉴定，其中9D5和100E2能够同时识别两种不同来源的组织蛋白酶B，而100H6只能识别基因重组的大肠杆菌表达的组织蛋白酶B． 相似文献
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棉铃虫组织蛋白酶B在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
以棉铃虫（Helicoverpa armigera）组织蛋白酶B作外源基因重组构建克隆载体，自重组菌株HCB-DH10Bac、Histag-HCB-DH10Bac中提取穿梭质粒，脂质体法转染草地贪夜蛾卵巢细胞系Sf21细胞，转染液再感染细胞，收集感染3～4d的上清液，提取芽生病毒的DNA，PCR法鉴定外源HCB基因，感染上清进行SDS-PAGE、Western-blotting、蛋白酶活性检测．结果：感染上清中的芽生病毒的DNA作模板扩增出预期的1700bp片段，SDS-PAGE、westem-blotcing检测均在28ku处有明显表达产物，且表达产物有蛋白水解活性． 相似文献
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