<非洲绿猴和食蟹猴主要肠道细菌的实时定量 PCR 检测及分析

摘要:目的 非洲绿猴具有不同于食蟹猴和恒河猴等猕猴的生物学特征,如脂质代谢、自发性高血压、SIV 感染不引起获得性免疫缺陷综合症( AIDS)等,本研究拟对食蟹猴和非洲绿猴肠道细菌的相对含量进行比较研究。 方法随机选取 SIV 抗体阴性的成年食蟹猴和非洲绿猴各 12 只,排除肥胖和疾病个体,收集其新鲜粪便样本,按 200 mg每份等分后进行液氮速冻,-80 ℃ 保存。 其中 1 份进行肠道细菌的实时定量 PCR 分析。 结果 与食蟹猴相比,非洲绿猴双歧杆菌、乳酸菌以及肠杆菌相对含量显著偏低( P<0. 05) ,而普氏菌以及丁酸盐产生菌 ———普拉梭菌和真细菌相对含量更高( P<0. 05) 。 结论 非洲绿猴产丁酸盐的细菌相对含量更高,反映出其肠道免疫细胞稳态和黏膜完整性具有不同于食蟹猴的进化适应特征,为深入研究非洲绿猴对 SIV 感染不致病的相关机制奠定了基础。     

比格犬深静脉穿刺置管模型的建立及应用

目的 建立比格犬深静脉穿刺置管模型,探讨其应用范围。方法 将8只成年比格犬随机分成股静脉穿刺置管组(股静脉组)和颈内静脉穿刺置管组(颈内静脉组),每组4只。对比格犬行1.5%～3%异氟烷和氧气混合吸入麻醉后,取仰卧位固定于手术台上,定位股静脉或颈内静脉,行经皮深静脉穿刺置管术并固定导管。结果 行深静脉穿刺置管术的8只比格犬全部置管成功,术中麻醉效果良好,股静脉穿刺置管较颈内静脉穿刺置管操作方便,手术时间短,术后便于护理,并发症少。结论 比格犬深静脉穿刺置管模型的建立,实现了血液灌流及血液净化等技术在实验动物身上的应用,为开展相关临床基础研究提供方便,也可应用于兽医对中毒犬行血液灌流或血液净化,对休克犬进行快速大量补液等。     

人源性肿瘤异种移植的小鼠模型在肿瘤精准医学中的应用

摘要: 人源性肿瘤异种移植( PDX) 的小鼠模型使用至今已有近半个世纪的历史,是肿瘤学研究领域中的重要工具之一。与传统细胞株荷瘤小鼠模型不同的是,PDX 小鼠模型最大程度上保留了患者体内肿瘤真实的基因组、转录组、蛋白组学以及异常的信号通路特征,被广泛用作肿瘤患者的替代模型进行个性化药物筛选等诸多方面的研究。近年来,随着肿瘤精准医学概念的提出,对PDX 小鼠模型的需求和利用正日益扩大,尤其是借助于PDX 小鼠模型进行肿瘤有效药物的筛选和评估,并逐步将其应用于指导肿瘤患者的个体化治疗,正逐步走向临床。本文就PDX小鼠模型制备的关键因素、临床应用和潜在的不足进行综述。     

骨关节炎动物模型的概述

摘要:骨关节炎( osteoarthritis,OA) 是一种常见的关节退行性疾病,患者易致残,严重危害个体健康和社会公共卫生。 临床上人类 OA 的致病原因复杂多样,且缺乏有效的根治疗法。 OA 的致病机理、防治策略以及药物筛选等相关科学研究依赖于 OA 动物模型的构建。 目前 OA 动物模型的造模方法主要分为自发性造模、诱发性造模、转基因造模三类。 近年来,越来越多的转基因 OA 模型被用于 OA 的相关研究中。 本文就 OA 动物模型进行概述,重点对已报道的转基因 OA 动物模型进行详细讨论,从而为探讨构建更为理想的转基因 OA 动物模型及 OA 相关研究提供线索及思路。     

犬细小病毒新抗原变异株VP2基因的克隆与序列分析

目的鉴定犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)新抗原变异株的病毒型,为研究CPV变异及制备CPV特异性诊断和治疗试剂奠定基础。方法从病毒细胞培养物中提取基因组DNA,设计合成针对VP2基因的1对特异引物,PCR扩增出VP2基因片段,克隆后测序,应用DNAstar进行序列分析。结果得到CPV-VP-2基因序列15份,其中CPV-2a 10份,CPV-2b 5份;FPV-VP-2基因1份。结论各序列与已发表的标准序列比较,同源性在98%以上,未形成明显分支。     

遗传性脐疝大鼠生物学特性的初步研究

目的 观察脐疝(umbilical hernia,UH)大鼠模型表型及部分生物学特性.方法 采用全同胞交配法对自发UH大鼠进行近交繁育,建立遗传性UH大鼠模型,观察表型特征、生长曲线、脏器系数、血常规、血液生化指标等生物学特征.结果 所培育的UH大鼠脐疝发病率保持100％,外观、解剖、病理等特征明显;雄性个体体质量自第...     

原代小鼠卵巢上皮细胞TP53基因敲除及其生物学特征变化

目的 利用CRISPR/Cas9慢病毒载体系统建立小鼠原代卵巢上皮细胞TP53基因稳定敲除细胞系,分析细胞增殖、细胞周期、克隆形成以及细胞转移侵袭能力的变化。方法 构建LentiCRISPRv2-sgRNA TP53基因敲除质粒,用293FT细胞进行慢病毒包装,转导小鼠原代卵巢上皮细胞,嘌呤霉素筛选出稳定敲除细胞系,进行PCR、蛋白免疫印迹以及免疫荧光鉴定。细胞增殖、细胞周期变化、克隆形成、细胞迁移侵袭能力分别用MTT、流式细胞分析、单层培养以及Transwell小室进行测定。结果 TP53基因敲除小鼠原代卵巢上皮细胞中P53表达缺失;TP53敲除引起细胞迅速增殖,DNA合成加速,克隆形成以及迁移侵袭能力增强。结论 获得了原代小鼠卵巢上皮细胞TP53基因稳定敲除细胞系,细胞生物学特征明显改变。