利用ISSR分析6种绞股蓝属植物的遗传多样性与亲缘关系

目的 对绞股蓝属(Gynostemma BL.)6种植物的遗传多样性与亲缘关系进行分析.方法 利用ISSR标记技术对57条引物进行初筛,选择其中适合的11条引物对材料进行遗传多样性分析,并根据遗传距离构建UPGMA聚类图.结果 11个ISSR引物共检测到120个位点,平均每个引物检测到10.91个位点,多态性比率(PPB)达到98.33%,6个物种的多态性比率分布于34.17%～1.67%之间,Shannon信息指数(Ⅰ)为0.414 5,Nei's基因多样性指数(He)为0.2707,G.pentaphyllum,G.Ccardiospermum,G.longipes,G.yixingense,G.laxuflorum的分类处理与形态学研究结果基本一致,G.pentagynum与G.longipes遗传距离最近.结论 ISSR分子标记适合于绞股蓝属植物遗传多样性研究.     

HPLC指纹图谱法鉴别远志及其伪品

目的 建立远志药材的HPLC指纹图谱,用以鉴别远志与其伪品.方法 采用高效液相法,色谱柱为Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸(25:75),流速1.0mL/min,检测波长310 nm.结果 建立了正品远志药材的对照指纹图谱,标示了共有指纹峰,可用于区别远志伪品.远志HPLC指纹图谱与其伪品的液相色谱图存在明显的差异.结论 方法简便、特异,可用于远志药材、饮片以及粉末的鉴别,具有较高的实用价值.     

庙台槭的居群遗传结构和遗传多样性

目的 研究庙台槭(Acer miaotaiense P．C．Tsoong)自然居群的遗传结构和种内遗传多样性。方法 选取20条RAPD随机引物对3个庙台槭居群的39个个体进行PCR扩增得到一系列0，1数据，用Popgen32，AMOVA和SPSS 9．0软件进行数据分析。结果 20条引物共检测到128个RAPD位点，庙台槭物种水平的多态性位点比率为53．13％，居群水平的多态位点比率分别为秦岭中段南坡居群42．90％，中段北坡居群18．75％，秦岭西段居群32．78％。聚类分析及主成分分析显示3个居群的个体有以彼此为中心的聚集趋势。庙台槭居群间基因流大小仅为Nm=0．7036。结论 庙台槭具有较低的遗传多样性，尤其是在居群水平上；庙台槭居群间已发生了强烈的遗传分化；庙台槭居群间的基因流很小，遗传漂变和随之而来的近交可能是刻划居群遗传结构的主要因素。     

华山新麦草小孢子发生及雄配子体的形成

采用石蜡切片、扫描电镜等方法对华山新麦草 (Psathyrostachys huashanica Keng.)小孢子发生和雄配子体形成过程进行了观察。结果表明 ,小孢子母细胞减数分裂为连续型 ,四分体为左右对称型 ,成熟花粉为 3 -细胞型 ,与小麦属特征一致。花粉发育后期的营养竞争可能是近二核时期花粉败育的主要原因。华山新麦草的花粉败育影响其有性生殖 ,但不能直接阻碍其有性生殖 ,因此 ,华山新麦草花粉败育可能不是致濒的主要原因。     

七筋菇基因组DNA提取方法的比较研究

目的对七筋菇基因组DNA提取和ISSR-PCR扩增模板浓度进行优化。方法以常规的CTAB法为基础,对七筋菇基因组DNA提取进行了优化:提取液中加入PVP(6%(w/v)),β-巯基乙醇的浓度提高至5%(w/v);第一次抽提后,重新加入提取液及抗坏血酸(20%(w/v)),65℃水浴30 min。结果所提样品DNA,A260/280,A260/230的平均光吸收值分别为1.78,1.99,浓度为105 ng/μL左右,ISSR扩增带多且清晰明亮,稳定性及多态性高,表明DNA纯度高;对扩增反应的最佳模板浓度进行研究表明,所提DNA模板稀释2倍效果最好(浓度为50 ng/μL)。结论改良后的CTAB法适于提取七筋菇植物的基因组DNA。     

猫屎瓜乳汁道形成过程中显微和超微结构变化以及与橡胶产生的关系

橡胶植物猫屎瓜的含胶结构是一种溶生的乳汁道。它是在果实发育过程中,由部分外表皮细胞经过凹陷、封闭转变为分泌表皮细胞,再由它们经过破毁、解体形成的溶生胞间道系统。通过组织化学和细胞学研究,在开花后10天内,幼果外表皮为同形组织,细胞内无橡胶颗粒;当凹沟出现后,外表皮开始分化为两类组织:外表皮和分泌表皮,只在后者细胞内产生橡胶颗粒,直至乳汁道形成。透射电镜观察表明,分泌表皮细胞内无黄色体和F-W复合体,其橡胶颗粒的产生与内质网槽库和电子致密小颗粒(多聚体)有关,而液泡中的纤丝结构又与团块状橡胶物质的形成有关。为此,猫屎瓜的含胶结构和橡胶产生方式既不同于巴西橡胶树等的乳汁管,又与杜仲等的含胶细胞不完全相同,有其特殊性。猫屎瓜的橡胶在分布上和形成时间上的局限性是和乳汁道的特殊形成方式密切相关的。此种特点,为研究橡胶的生物合成机理提供较好材料,并为今后提高该植物的橡胶产量提供了参考资料。     

HPLC法测定兔血浆中丹参素、原儿茶酸和原儿茶醛

目的建立兔血浆中丹参素、原儿茶酸和原儿茶醛,同时测定高效液相色谱测定方法。方法三氯乙酸沉淀法去除血浆中的蛋白,上清液乙酸乙酯萃取,反相高效液相色谱同时测定丹参素、原儿茶酸和原儿茶醛含量。结果丹参素、原儿茶酸和原儿茶醛检出限分别为0.03,0.08,0.04μg.mL-1,线性范围分别为0.06~40.0μg.mL-1,0.16~100.0μg.mL-1,0.08~50.0μg.mL-1,高、中、低浓度的提取回收率均在82.7%~102.0%之间,日内和日间测定的相对标准偏差在0.56%~4.84%之间。结论测定方法能同时对血浆中丹参素、原儿茶酸和原儿茶醛进行测定,且具有灵敏度高和专一性强的特点,能作为其药物动力学研究方法。     

制远志HPLC指纹图谱研究

以远志生品、蜜炙品、甘草配伍组为对照,研究制远志的HPLC指纹图谱,结合变异系数法和聚类分析,分析甘草炮炙对远志化学成分组成的影响．结果显示：制远志与远志、蜜远志和远志甘草（100∶ 6）配伍之间具有23个共有色谱峰,其相似度大于0.95;制远志与远志色谱峰面积保留时间曲线有显著性差异．制远志变异（CV≥2.02）最大,其变异与保留时间为44.89 min和65.90 min的2个色谱峰关系密切．表明甘草炮炙使远志化学成分组成发生了明显变化.