根癌农杆菌介导AtNHX1基因转化小麦

利用根癌农杆菌对 3种基因型小麦进行了转化研究 .发现基因型对转化有明显影响 .将小麦品种烟优 36 1、烟 10 3、核生 3号的胚性愈伤组织用含报告基因NPTⅡ和抗盐基因Na H 反向转运AtNHX1的农杆菌菌株pROK2AT GV310 1感染和共培养后 ,用巴龙霉素 5 0 - 15 0mg L筛选抗性愈伤组织及转化植株 .对抗性植株的总DNA用AtNHX1基因的特异引物进行PCR检测 ,目的基因的PCR阳性频率为 1.3(烟 10 3)和 2 .9% (核生 3号 ) .Southern杂交证实外源基因已经整合到小麦的基因组中     

介绍一种优良的减数分裂实验材料及其制作方法——葱(Allium fistulosm L.)花粉母细胞减数分裂的观察

提要减数分裂的观察是生物学中基本的实验技术之一,多年来,在普通生物学、胚胎学以及细胞遗传学等生物学科的实验中,对于各类动植物减数分裂过程的研究虽有不少,但作为典型的材料并不多.我们自1979年以来摸索了许多动植物的材料,在植物方面,以葱的花粉母细胞为材料进行减数分裂的观察,取得了良好的效果,它比过去所使用的材料具有突出的优点,主要是:(一)染色体数目少(2n=16)而且粗大,对各种染料的染色着色力强,因而图象清晰,特别是前期I中各时期的特点明显.(二)葱为伞形聚散花序,其上有许多小花,各个小花由上而下逐渐发育成熟,因而取不同部位的小花花药做涂片,就可观察到减数分裂时染色体动态变化的全过程.(三)材料易得,数量大,仅少数花序就可供数十人实验用.在方法上,我们应用了甲苯胺兰染色法、地衣红及醋酸洋红染色法、孚尔根反应以及苯酚品红染色法,效果都较好,上述方法本文都作了简要介绍并对其优缺点作了扼要分析,以供实验者比较选择应用.我们还将比较好的制片进行显微照相附于本文之后,从这套照片中可以清楚地看到在减数分裂中染色体动态变化的连续过程.     

NaCl对拟南芥(Arabidopsis thaliana)生长与渗透调节的影响

对与拟南芥耐盐性相关的某些生理指标进行了研究。结果发现,随着盐浓度的增加,拟南芥的质膜透性增加,MDA含量、脯氨酸含量、可溶性糖含量、有机酸含量、游离氨基酸含量、根冠比、钠离子含量均增加,而渗透势、钾离子含量、干鲜重、含水量则下降。这表明,随着盐胁迫的加重,一方面拟南芥受到的伤害加重,另一方面植株通过合成脯氨酸、可溶性糖等渗透调节物质,增大根冠比以提高吸水能力等抗逆机制,以应对胁迫,提高耐盐性。     

植物谷胱甘肽转移酶和盐胁迫

谷胱甘肽转移酶 (GSTs)的种类不一 ,在植物异生代谢和内生代谢中都表现了一定的功能 ,通过转基因技术使之在植物体中过量表达显示它在植物耐盐过程中也起到了一定的作用 .     

盐地碱蓬△1-二氢吡咯-5-羧酸合成酶基因(SsP5CS)的克隆及表达特性

从盐地碱蓬(Suaeda salsa)中克隆了△1-二氢吡咯-5-羧酸合成酶基因的cDNA片段(S.salsa △1-pyrroline-5-carboxylate synthase gene,Ssp5CS).Southern杂交表明SsP5CS基因在盐地碱蓬基因组中只有一个拷贝;Northem杂交结果表明,不同盐处理(400mmol/L NaCl)时间下SsP5CS在盐地碱蓬叶中的表达量明显增加;同时盐胁迫条件下盐地碱蓬叶中的脯氨酸含量与对照相比显著的增加,并且其渗透调节能力也逐渐增强.推测SsP5CS基因可能在保护盐地碱蓬免受盐胁迫损伤的过程中起到重要作用.     

盐地碱蓬Δ~1-二氢吡咯-5-羧酸合成酶基因(SsP5CS)的克隆及表达特性

从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了Δ1 -二氢吡咯 -5 -羧酸合成酶基因的cDNA片段 (S .salsaΔ1 -pyrroline -5 -carboxylatesynthasegene,Ssp5CS) .Southern杂交表明SsP5CS基因在盐地碱蓬基因组中只有一个拷贝 ;Northern杂交结果表明 ,不同盐处理 (4 0 0mmol/LNaCl)时间下SsP5CS在盐地碱蓬叶中的表达量明显增加 ;同时盐胁迫条件下盐地碱蓬叶中的脯氨酸含量与对照相比显著的增加 ,并且其渗透调节能力也逐渐增强 .推测SsP5CS基因可能在保护盐地碱蓬免受盐胁迫损伤的过程中起到重要作用     

烟草MnSoD cDNA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

烟草锰超氧化物歧化酶(MnSOD)是一种由核基因编码并定位于线粒体的蛋白质,是植物体内清除超氧根阴离子的主要酶类．采用RT—PCR方法,从烟草(Nicotiana tubaccum)中克隆到MnSODeDNA基因(SodA),序列分析结果与文献报告的资料相比,核苷酸序列的同源性为99．9％,氨基酸序列的同源性为99．6％．该基因能在原核表达载体pBV221中正确表达,并表现出SOD酶活性．     

欧美107杨组织培养再生系统的建立

建立了欧美 10 7杨 (Populus×euramericana′Neva′)组织培养再生系统 .外植体选用新生 3周的嫩茎或嫩叶柄 ,经 0 .1%HgCl2 溶液或 5 %NaClO溶液表面消毒后 ,接种到含BA 0 .5mg L ,NAA 0 .1mg L的MS培养基上诱导不定芽 .再生苗接种在含IBA0 .5mg L的MS培养基上生根培养 .该品系叶片的再生率很低 ,幼茎和叶柄再生率较高 .无菌苗幼茎适用于基因转化再生实验 .     

海水农业：梦想与现实

海水农业定义为利用海水灌溉陆地种植作物。尽管它是一个古老的梦想,但其实验研究始于二战后生态学家Ｂｏｒｋｏ和园艺学家Ｂｏｙｋｏ。随着世界人口膨胀,淡水资源短缺形势日趋严峻,发展海水农业成为必然趋势,海水农业有两条途径,其一为培育耐盐传统作物如小麦和番茄,另一为驯化野生耐盐植物,即盐生植物,使之作物化,前一途径随着植物耐盐分子生物学与基因工程技术进展已露曙光;后一途径已取得有限成功如海蓬子与碱蓬的商业     

盐芥TOR基因的克隆及对盐芥生长发育的影响

雷帕霉素靶蛋白(TOR)在调节动植物的生长及新陈代谢方面起重要作用.为进一步研究植物中TOR的作用,对盐芥TOR基因进行克隆,采用聚合酶链式反应和cDNA末端快速扩增技术等分子生物学方法获得盐芥TOR基因的cDNA全长及基因组全长,构建了ThTOR基因沉默植物表达载体并成功获得盐芥ThTOR基因沉默的转基因株系.结果表...