靶向hTERT的shRNA腺病毒载体的构建及其对MCF-7细胞hTERT表达的影响

设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列GGAACACCAAGAAGTTCATCT,构建siRNA表达质粒PgenesilhTERT;随后将shRNA表达框克隆到入门载体pENTRTM1A,构建重组质粒pENTR/U6-hTERT-polyA;使用同源重组方式在体外将该表达框重组到腺病毒载体pAd/PL-DEST,得到重组腺病毒质粒pAd/U6 –TERT-polyA;线性化的重组腺病毒质粒在HEK 293细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒rAd-hTERT.同时构建不针对任何基因的shRNA阴性对照rAd-HK,空病毒对照rAd-blank和只含EGFP的rAd -EGFP.四种病毒经酶切、电泳分析表明插入序列正确,腺病毒载体构建成功.Western blotting测定转染后各组hTERT蛋白的表达情况,证实转染rAd-hTERT 48 h后,hTERT的表达明显被抑制.实验表明基于Gateway技术的腺病毒介导的shRNA载体构建成功,rAd-hTERT可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞hTERT基因的表达.本研究为针对端粒酶的基因治疗奠定了实验基础.     

差商最速下降法及其收敛性

证明了精确线搜索下的差商最速下降法的整体收敛性,提出了非精确线搜索下的有关算法并证明了收敛性。     

差商变尺度法的收敛性分析

正如Giu和Murry(参见[1])指出的,差商变尺度法对于求解无约束最优化问题是十分有效的.关于该种方法的理论分析还限于研究差商误差与截断误差如何互相平衡(参见[1]).另一方面,Evtushenku论述了差商Newton法的收敛性条件,但也未论及差商     

浅谈英语习语

习语是语言特征的集中反映，是语言的精华和缩影，是民族个性和各种修辞的集中体现。习语使用恰当，可使可语言生动、形象、精炼，收到画龙点睛、锦上添花的效果。因此，掌握英语习语的类型、功能，及其来源，可以更好地了解英语习语、正确地运用英语习语，充分发挥英语习语中的作用。     

一种基于频差补偿的相位谱时延估计方法

针对影响射频窄带信号时延估计精度的3个主要因素：中频偏差、信号带宽及信噪比,提出了一种基于频差补偿的相位谱时延估计方法.其采用平方倍频法分别估计两路信号的中频,通过频差补偿消除中频偏差对时延估计精度的影响;利用线性调频Z变换（CZT）在有限带宽内增加时延估计的有效点数;并针对相位法自身的特点利用Kalman滤波器优秀的抗噪声特性提高时延估计的精度.理论分析和实验仿真均验证了该方法的有效性.     

山毛榉育苗技术

通过对山毛榉冬季和春季育苗的对比试验，分析存在的问题，对今后山毛榉育苗技术进行探讨。     

高压断路器机械振动信号特征与故障诊断方式

就目前的情况来看，我国发电装机容量和发电量在世界占据领先水平，且在近些年来呈现不断上升态势，在电力系统容量持续增长的背景下，促进了高电压开关设备数量持续增加。高压断路器作为其中最重要的开关设备之一，具有保护电压、隔离故障等的重要作用，且对于保证电力系统的安全稳定运行发挥着至关重要的作用。本文主要对W32-12型高压断路器机械振动信号特征与故障诊断方式进行研究，提出基于小波包-关联维数、EEMD-特征熵的高压断路器特征提取理论方法并进行仿真分析。     

对我院学生体育锻炼价值取向的研究

本文通过文献资料法、问卷调查法和数理统计法,以我院学生为研究对象,对高职学生体育锻炼价值取向进行研究,试图就目前高职学生体育锻炼价值取向进行专题分析。研究表明:目前高职学生参加体育锻炼的目的趋于休闲娱乐、增进健康、舒缓压力、提高运动能力、通过体育课程考试、结交朋友等方面;他们因性别、年级、从众心理程度不同而对具体的体育锻炼项目的价值取向上存在显著性差异。了解和掌握高职学生体育锻炼价值取向,有助于我们有的放矢地引导学生树立正确体育锻炼价值观,帮助他们培养终身体育意识和习惯。     

腺病毒介导的TRF2 RNAi表达载体诱导MCF-7细胞凋亡的研究

选择针对人TRF2 mRNA的特异性siRNA靶序列,设计、合成其相应的双链DNA,并构建成表达siRNA-TRF2的重组腺病毒载体rAd-shRNA-TRF2,转染人乳腺癌MCF-7细胞,以Western印迹法检测MCF-7细胞TRF2蛋白表达、MTT比色法绘制MCF-7细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞凋亡情况.实验结果表明:重组腺病毒载体rAd-shRNA-TRF2构建成功,转染MCF-7细胞后可明显抑制TRF2基因的表达,并抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡.说明通过RNAi技术抑制TRF2基因表达,进而诱导肿瘤细胞凋亡可能用于肿瘤的基因治疗.     

试析“红色“在英汉语言中文化联想意义的异同

颜色词在语言中具有丰富的联想意义,而不同语言的联想意义却迥然不同。红色在汉语中是一种吉祥,喜庆的颜色.它是一个积极词汇,而在英语中却常常与危险,战争、死亡、流血、等联系在一起来。