植物维管组织特异性定位启动子研究进展

组织特异性基因的启动子对该基因的组织特异性表达起重要作用 .本文综述了植物维管组织特异性定位表达启动子的研究进展 .研究表明 ,在植物维管组织特异性定位表达启动子中 ,顺式调控元件与反式作用因子协同作用 ,调控基因的表达 .     

应用液相色谱仪测定烟草4CL酶活性

应用液相色谱仪建立了烟草4CL酶活性测定方法,确定反应体积为0.2 mL,反应时间3 min应用该方法测定了4CL1转基因烟草的酶活性,结果表明反义Pt4CL1转基因烟草叶片的酶活性较野生型烟草叶片的4CL酶活性下降约22.7%～26.7%.     

重组毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶催化不同肉桂酸衍生物的酶促动力学研究

4-香豆酸:辅酶A连接酶是杨树木质素合成途径的关键酶之一,催化维管植物木质素合成羟基肉桂酸及其衍生物辅酶A酯化合物的形成.对毛白杨的重组Pt4CL1蛋白的不同肉桂酸衍生物底物的酶促动力学进行了分析,Pt4CL1对肉桂酸、4-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸具有催化活性,其中的4-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸,Km(μM)值分别为55.02±3.5、52.94±6、44.62±4,Vmax(nM.S-1)值分别为4.23±0.27、4.12±0.11、2.16±0.07;4-香豆酸,咖啡酸,阿魏酸的Kcat(S-1)值分别为44.73×10-3、43.57×10-3、7.61×10-3;对4-香豆酸,咖啡酸,阿魏酸的Kenz(M-1.S-1)值分别为823、812.98、170.55.Pt4CL1对肉桂酸的催化能力很弱,而对芥子酸没有催化活性.结果表明,Pt4CL1对4-香豆酸的催化效率最高,对咖啡酸的催化效率略低于4-香豆酸,而对阿魏酸的催化效率最低,对咖啡酸的催化效率略有很高的转化效率.     

北京城市园林中赤子爱胜蚓体内有机氯农药污染研究

选取北京具有代表性的23个公园及生活小区作为采样区,研究各采样区中赤子爱胜蚓体内持久性有机氯农药滴滴涕(DDTs)和六六六(HCHs)的含量和来源.结果表明,赤子爱胜蚓体中的DDTs和HCHs总浓度分别为18.97-11 129.75 μg·kg-1和0.65-44.78μg·kg-1.赤子爱胜蚓体内存在较高浓度DDTs暗示其可能对公园的生态系统和食物链有潜在危害.根据DDTs各异构体含量特征比(P,P'-DDE/p,p'-DDT平均值:5.07;o,p'-DDT/p,p'-DDT平均值:0.76).可以推断出部分园林环境中很可能有新的污染源存在.     

GRP1.8融合4CL1基因调控杨树木质素生物合成

将形成层定位启动子GRP1.8与毛白杨的4-香豆酸:辅酶A连接酶基因融合,叶盘法转化毛白杨741,southern杂交检测表明融合基因已经整合到转基因杨树的基因组中.通过实时定量PCR技术测定mRNA的表达量,GC-MS分析4CL底物香豆酸的含量和定量硫酸木质素含量,分析了4CL基因的过量表达对转基因杨树生理生长的影响.实验结果表明,整合了正义4CL1的转基因植株在茎中的酶活性比野生植株增加了30%,木质素含量增加了40%.     

红松体细胞胚胎培养技术体系的建立

以5个红松家系未成熟合子胚为材料,首次建立了红松体细胞胚胎(somaticembryo,SE)培养体系,为红松人工种子培育苗及基因转化奠定了基础实验表明:在GLH培养基上黑暗培养约6周后,5个红松家系未成熟胚的SE诱导率分别为46.31%、28.2%、26.57%、17.81%、9.652% 红松遗传类型、合子胚发育程度对SE诱导率影响均达到极显著的水平;遗传类型和合子胚发育程度之间的交互作用达到极显著水平,但合子胚发育程度与培养基类型间、遗传类型与培养基类型之间的交互作用不显著     

杨树木质部特异性定位表达4CL1启动子的结构与表达特性

4-香豆素COA连接酶(4CL1)是木质素代谢途径中的一个关键酶,对该基因启动子的表达特性与调控元件进行了研究:首先,对毛白杨4CL1启动子进行了生物信息学分析,结果表明该启动子包括3个顺式作用元件,box P(CCTTCACCAACCCCC),box A(CCGTTC),box L(TCTCACCAACC),这3个顺式作用元件在已知的木质素代谢途径相关酶系如苯丙氨合成酶(PAI)和4CL中普遍存在;其次,运用PCR方法对该启动子进行了剪切,获得一个长393 bp的启动子片断,该启动子片断包括以上3个顺式作用元件;最后,将该启动子片段与GUS报告基因构建了植物表达载体并转化烟草,成功获得转基因再生苗,结果发现转基因烟草的茎木质部呈现GUS染色阳性.研究结果表明,一个393 bp长度的4CL1启动子片断足以介导外源基因在木质部特异性定位表达.     

银川城市土壤中有机氯农药残留及其潜在风险

利用GC-ECD方法测定了银川市城市土壤(城市公园、绿地及郊区农田)中典型有机氯农药六氯苯、六六六和滴滴涕的含量和组成特征,结果表明,六氯苯的残留量为0.0729-1.244μg·kg-1(中值:0.350μg·kg-1),六六六的残留量为0.306-74.219μg·kg-1.(中值:0.852μg·kg-1),滴滴涕的残留量为0.284-1 068.428μg·kg-1(中值:2.236μg·kg-1).同其它地区相比,银川市城市土壤中六氯苯、六六六和滴滴涕的残留量很低,几乎不存在有机氯农药污染土壤的现象.不过,个别采样点存在滴滴涕污染的潜在生态风险,还需进一步探讨.