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为构建泛素分子pcDNA3.1-Myc-ubiquitin真核表达载体,实现其在293T细胞中表达。采用人工合成ubiquitin基因序列并加入c-Myc标签序列及EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的方法,克隆至pcDNA3.1真核表达载体中。重组表达质粒经PCR和测序鉴定正确后,脂质体法转染入293T细胞。Western blot和间接免疫荧光法分析重组质粒在细胞中的蛋白表达及定位情况。菌落PCR及测序等分析结果显示:成功构建了pcDNA3.1-Myc-ubiquitin真核表达载体。免疫荧光和Western-Blot结果显示:Myc-ubiquitin重组表达质粒在293T细胞中获得高效表达且蛋白定位于胞浆。由此可知,成功构建pcDNA3.1-Myc-ubiquitin融合表达载体并在293T细胞中高效表达,为课题组进一步探讨与泛素化修饰相关的neuritin的作用机制及功能奠定基础。 相似文献
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通过查阅中国知网(CNKI)、Pubmed等国内外知名数据库,归纳了关于肌肉延迟性酸痛(DOMS)的治疗方法,常用的治疗方法有药物化学疗法和物理疗法。药物化学疗法主要介绍了抗炎类药物对DOMS的效果。物理疗法则介绍了按摩、光疗、水疗、热疗、超声波、振动、电刺激、激光疗法、冰疗、针刺等方法。通过这些方法对比可以得出,DOMS治疗方法的效果现今还不是很明确,建议研究者能够设计更多实验去完善证明。 相似文献
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