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油菜素甾醇(BR)是一类重要的调控植物生长发育的激素.脱落酸(ABA)是一类重要的帮助植物适应逆境的激素.之前的研究表明BR和ABA信号对萌发率的调控存在拮抗作用,BR合成或信号缺失的突变体在萌发率上对ABA更加敏感.为了进一步研究BR与ABA信号通路互作的分子机制,采用化学诱变剂甲基磺酸乙酯(EMS)诱变bri1-301(BR受体BRI1的一个弱突变体),0.75μmol/L ABA的培养基上筛选对ABA不敏感的突变体.经过多次连续世代筛选,获得了大约40个稳定的株系,发现其中8个株系与abi1、abi5 ABA不敏感突变体的萌发率相似.通过利用PCR扩增ABI1、ABI2、ABI3、ABI4和ABI5基因并测序,鉴定到bri1-301背景下的4个ABA不敏感突变体abi2-8、hab2-1、abi3-21和abi4-13,表明ABA与BR信号的互作可以不依赖BR受体调控种子的萌发,为ABA与BR信号互作提供了遗传的证据. 相似文献
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油菜素甾醇(Brassinosteroids，BRs)是一种广泛存在于植物中的类固醇激素，在植物的生长发育过程中起重要作用.植物通过位于细胞膜上的富含丝/苏氨酸的类受体蛋白激酶BRI1感知BR信号.当感受到BR信号后，BRI1的负调控蛋白BKI1就会从细胞膜上解离，解除对BRI1的抑制，使BR信号向下传递.但是BKI1... 相似文献
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Rab蛋白家族在调控细胞囊泡的运输过程中发挥着重要作用.拟南芥中存在数量庞大的RabA亚族成员,它们参与调控植物不同阶段的生长发育过程.为了寻找拟南芥RabA亚族下游的调节蛋白或效应蛋白,进而阐明RabA在细胞活动中的角色,本研究选取RabA2b蛋白进行了深入研究.本研究首先构建过表达RabA2b的拟南芥植株,同时结合免疫共沉淀方法和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测到多个Hsp70蛋白家族成员与RabA2b蛋白共沉淀.为了进一步研究Hsp70成员与RabA2b的相互关系,将5个细胞质和细胞核定位的Hsp70s蛋白分别构建于植物表达载体,通过在烟草叶表皮细胞中瞬时表达Hsp70s和RabA2b发现它们共定位于细胞质膜、细胞质以及细胞核周围的丝状结构.同时,体外pull-down实验证明了5个Hsp70s蛋白都能与RabA2b蛋白直接相互作用.此外,双分子荧光互补实验(BiFC)进一步证实了Hsp70s与RabA2b在烟草叶表皮细胞中的相互作用,说明拟南芥中细胞质和细胞核定位的Hsp70s可以作为RabA2b的调节蛋白或效应蛋白一同调控植物的生长发育过程. 相似文献
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油菜素甾醇(Brassinosteroid,BR)是一类重要的调控植物生长发育的激素,BKI1在BR信号转导通路中具有正负调控的双重功能.为了深入研究BK11正/负调控BR信号通路的分子机制,本研究使用BKI1作为诱饵蛋白对拟南芥cDNA文库进行酵母双杂交筛选,获得了一段新的与BR信号通路组分BKI1相互作用的肽段,BLAST搜索显示该肽段与拟南芥ERD7的N端序列一致.生物信息学分析表明ERD7是一个植物特异表达基因,在单子叶、双子叶、以及低等植物中保持很高的一致性.酵母双杂交方法证实全长ERD7与BKI1能够相互作用,Pull-down分析证实这两个基因在植物体内直接相互作用,烟草细胞瞬时表达显示ERD7和BKI1能够共定位于细胞质和细胞膜.BKI1和ERD7相互作用的发现为进一步研究BKI1的调控机制奠定了基础. 相似文献
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Patellin 2(PATL2)蛋白是具有SEC14蛋白结构域的脂质转移蛋白,定位于细胞分裂后期的细胞板上,在细胞分裂过程中发挥重要的作用.同时,PATL2蛋白还受到植物激素和环境变化的调控,说明PATL2可能在植物激素和环境变化的调控下参与细胞分裂过程.为了深入了解PATL2蛋白的生物学功能,研究PATL2蛋白发挥作用的分子生物学机制,我们分析了它在植物体内的表达特点和与之相互作用的蛋白.我们通过免疫共沉淀与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析了过表达PATL2的转基因植株,并获得了多个可能与PATL2相互作用的蛋白,其中一个是细胞周期蛋白依赖性激酶CDKB2;2.通过观察PATL2启动子驱动的GUS报告基因在植物中的表达,发现PATL2基因在叶片、花瓣、花粉中广泛表达,但在角果中的表达非常有限,仅存在于角果的两端,这与已报道的CDKB2;2的组织分布部分相同.同时,烟草叶表皮细胞瞬时表达结果表明PATL2和CDKB2;2能够共定位于烟草叶表皮细胞的细胞膜和细胞质中.体外pull-down实验和双分子荧光互补实验(BiFC)实验分别确定了PATL2和CDKB2;2在植物体外和植物体内的相互作用. 相似文献
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