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将CDK2激酶第80位的Phe突变成Ala,使该激酶特异地利用ATP类似物N6-(2-苯乙基)-ATP(PE-ATP)筛选CDK2激酶的体内特异性底物.将pCMV-CDK2(F80A)-myc载体转染人宫颈癌细胞(HeLa),经持续G418选择和克隆化获得6株抗G418细胞系.Immunoblotting分析发现,挑选的6株细胞系中有4株表达带有myc标签的人突变CDK2蛋白质,其中2株表达量较高,可以作为筛选CDK2底物的细胞系。 相似文献
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