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根据阔口游仆虫微管蛋白基因序列设计1对引物,扩增出692bp的γ-微管蛋白基因片段,将之重组到L4440载体中,重组质粒转化到RNAase缺陷型E.coli HT115菌株中,并用IPTG诱导双链RNA的表达,将经诱导后的重组菌喂食游仆虫,诱导出RNAi表型,具体表现为虫体变小、变圆,约两周后游仆虫全部死亡.电镜观察表明,经诱导后的游仆虫部分纤毛杆横切面显示结构为9+0,部分纤毛杆膨胀变形并开始瓦解,原高度有序的微管排列结构消失.进一步证实喂食法可有效地产生RNAi,γ-微管蛋白基因沉默后游仆虫无法维持正常形态并死亡,观察到纤毛杆的超微结构发生明显的变化,由此推测γ-微管蛋白的表达和细胞调控在游仆虫细胞微管骨架的装配及其细胞生命活动中起重要作用. 相似文献
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应用草履虫进行中药快速毒性实验,拟建立药物的单细胞动物快速毒性筛选实验的基本方法.分别进行慢性与急性毒性实验观察草履虫的应激性、运动状态、存活只数.结果显示,在慢性实验的48 h内,草履虫的存活数量与时间、质量浓度呈指数递增.当中药质量浓度为5 mg·mL~(-1)时,草履虫开始出现死亡.急性毒性实验6 h内,药物低质量浓度组未见草履虫死亡.而中、高质量浓度组,随着药物质量浓度、时间增加,毒性也增加.上述研究结果表明,急性毒性实验可快速获得药物安全剂量、最大耐受剂量、致死剂量、半数致死量等参数,可快速进行药物毒性评价和毒性药物筛选. 相似文献
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