人凝血因子Ⅸ的线性B细胞表位预测及鉴定

为预测并鉴定人凝血因子IX(FIX)的线性B细胞表位.通过IEDB数据库及Discovery Studio软件预测FIX的B表位和白喉毒素T结构域(DTT)的B表位,用所预测的FIX的B表位替换某预测的DTT的B表位形成DTT-表位融合蛋白.通过基因工程技术制备各重组蛋白,并免疫小鼠,通过ELISA和Western-blot检测抗血清效价和特异性,通过等温量热滴定技术(ITC)测定抗体的亲和力.预测到4个FIX的B表位.用重组蛋白FIX-2-DTT免疫的小鼠产生了识别完整FIX的抗体,该抗体具有良好的特异性,其结合常数KD为106 M-1.表明FIX-2(306 NAAINKY312)是FIX的B表位,用重组蛋白FIX-2-DTT免疫小鼠能够产生特异性识别FIX且亲和力温和的抗体.     

人白介素6表位疫苗的设计及其免疫原性

构建人白介素6(h IL-6)表位疫苗,研究其免疫原性。利用在线预测工具预测h IL-6线性B表位(Ala69-Asn80);重叠延伸PCR法对h IL-6进行基因融合,克隆到质粒p GEX-6P-1,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达;亲和层析法纯化融合蛋白,鉴定其纯度达95%以上;皮下免疫BALB/c小鼠,ELISA法测定抗血清效价,表位(Ala69-Asn80)移植到白喉毒素转膜区(DTT,Ser305-Ile310),构建的表位疫苗可刺激机体产生针对h IL-6的抗体,抗血清效价达1.0×105。     

新型仿生亲和介质纯化工艺生产效率分析

抗体的捕获层析的成本在整个抗体纯化工艺中占有相当的比例.分析比较了新型小分子仿生亲和介质和常规蛋白A的动态载量、循环使用次数和线性流速等参数,并计算了相应的生产效率,发现新型小分子仿生亲和介质最高生产效率能达到蛋白A亲和层析介质最高生产效率的3⁶.9倍.     

VC＋＋语言多线程编程及其实现

提出从线程的创建、线程的调度、线程的优先级与线程的同步等几个方面的问题．较为全面详细地介绍了使用VC＋＋语言进行多线程编程的实现方法。     

中华眼镜蛇心脏毒素对疼痛及记忆的影响

通过热板法及醋酸扭体法观察中华眼镜蛇心脏毒素(CTX)对成年昆明种小鼠疼痛的影响,通过Y一型电迷宫及穿梭箱法研究CTX对东蓖若碱诱发成年昆明种小鼠学习记忆障碍的影响,利用跳台法研究CTX对东蓑若碱诱发成年BABL/C小鼠学习记忆障碍的影响,利用Morris水迷宫法研究CTX对对东蓖若碱诱发成年C57BL/6J小鼠学习记忆障碍的影响。实验发现,CTX能明显增加热刺激引起的疼痛闭值,明显减少醋酸引起的扭体次数,并能显著增加小鼠在Y型迷宫实验中的正确反应次数,减少在穿梭箱实验中小鼠重新训练至学会标准的训练次数及小鼠的反应时间,能增加小鼠在跳台法中的潜伏期,减少错误反应次数,减少小鼠在Morris水迷宫实验中的寻台时间和游泳路程,以上效果均表现出明显的剂量依赖性。以上结果提示,CTX有良好的镇痛作用以及对东莫若碱诱发的小鼠学习记忆障碍的改善作用,这可能是由于CTX与眼镜蛇神经毒素(NT)三维结构相似而导致了相似的生物学效应。     

磁性载体蛋白抗体阻断剂制备及性能测定

为了有效去除血清中的白喉毒素跨膜结构域抗体,提高检测的精准度,建立四氧化三铁纳米磁珠共价偶联载体蛋白对血清中载体蛋白抗体的去除方法,并评估去除效果;采用高温多元醇合成法制备表面包裹葡聚糖的四氧化三铁纳米颗粒,利用溴化氰将葡聚糖分子上的羟基活化为亚氨基碳酸酯,并与白喉毒素跨膜结构域通过氨基共价偶联,制得纳米磁珠-白喉毒素跨膜结构域抗体阻断剂;纳米磁珠-白喉毒素跨膜结构域抗体阻断剂与免疫过白喉毒素跨膜结构域-血管内皮生长因子或白喉毒素跨膜结构域-肿瘤坏死因子融合蛋白疫苗的小鼠抗血清进行孵育,以吸附去除白喉毒素跨膜结构域特异性抗体;对孵育前、后的抗血清进行酶联免疫吸附测定。结果表明:白喉毒素跨膜结构域抗体的去除率高达90%以上,检测精准度显著提高;在37℃条件下,仅需孵育1 h即可充分去除血清中的白喉毒素跨膜结构域抗体。     

一种靶向FAP的蛋白疫苗设计及其抗肿瘤保护研究

设计了一种成纤维细胞活化蛋白(FAP)催化结构域与白喉毒素跨膜结构域(DTT)融合的蛋白疫苗并研究了其抗肿瘤保护效果.通过基因重组,构建了FAP催化结构域与DTT的融合蛋白DTT-FAP.融合蛋白经大肠杆菌表达后,由GST柱进行亲和纯化.DTT-FAP免疫Balb/c小鼠后,接种结肠癌CT26实体瘤.ELISA检测血清效价,并研究其抗肿瘤保护效果.DTT-FAP引起了相应的免疫反应,血清效价约5×103.该疫苗显著抑制CT26肿瘤生长(p<0.01),并显著提高小鼠生存率(p<0.01).本研究首次构建了以FAP为靶点的蛋白疫苗DTT-FAP,该疫苗可引起小鼠针对人FAP的免疫反应,并对结肠癌CT26实体瘤有显著抗肿瘤保护效果.     

采用低浓度三氟乙酸去除溶解浆中木聚糖

采用低浓度三氟乙酸(TFA)与木浆反应,并通过响应优化器和正交试验分析得出最优工艺.结果表明:在TFA质量分数为0.15%,温度为116.8℃,反应时间为9 h条件下,可以去除所有残存木糖,而葡萄糖损失仅为3.2%.该工艺为除去溶解浆中少量的半纤维素提供了新方法.     

分子水平的仿生科学

本文讲座了在分子水平进行的模仿生物大分子生物功能的研究现状，研究技术，及其在基础研究和生物制品生产中的应用。