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利用RT-PCR方法从铜绿微囊藻PCC7806 mcy基因中扩增出目的基因片段,用TA克隆方法将基因片段插入pGEMT-T Easy中来制备质粒标准品.通过不同连续稀释倍数的质粒标准品成功构建了16srRNA和mcyH两基因的标准曲线,该法构建的两基因标准曲线r2分别为0.9916和0.9938,且质粒标准品具有较好的重复性,满足实时荧光定量RT-PCR的要求. 相似文献
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检测微囊藻毒素合成酶基凶mcyH的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT—PCR方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
利用RT—PCR方法从铜绿微囊藻PCC7806 mcy基因中扩增出目的基因片段,用TA克隆方法将基因片段插入pGEMT—T Easy中来制备质粒标准品.通过不同连续稀释倍数的质粒标准品成功构建了16srRNA和mcyH两基因的标准曲线,该法构建的两基因标准曲线r^2分别为0.9916和0.9938,且质粒标准品具有较好的重复性,满足实时荧光定量RT—PCR的要求. 相似文献
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