B群脑膜炎球菌lpxL2基因敲除突变株的构建及初步鉴定

 应用基因敲除技术的方法和原理,通过PCR扩增B群脑膜炎球菌lpxL2基因及载体pGBK T7上的Kan抗性片段,lpxL2片段与puc-18载体连接得到重组质粒msb-puc,以重组质粒msb-puc为基础,分别通过反向PCR和酶切2种方法构建lpxL2基因中间片段的缺失,并在缺失位点连入Kan抗性表达盒,从而得到重组质粒mpK,mpK转化B群脑膜炎球菌,并用PCR的方法对转化子进行初步筛选鉴定,初步确定突变株1株.本研究通过基因敲除MenB中LPS合成途径相关基因lpxL2的方法,降低LPS毒性,为B群脑膜炎球菌OMV疫苗的研发做了铺垫.     

1％吡蚜酮缓释颗粒剂分析方法研究

研究用HPLC定量分析1％吡蚜酮缓释颗粒剂的方法.色谱条件为250 mm×4.6 mm,5 μm ODS不锈钢柱;流动相∶乙腈-水(20:80,V/V);流速:1 mL/min;可变紫外检测器:波长298 nm.本方法在质量浓度为0.99-39.6 mg/L范围内,方法线性相关系数为0.9996.回收率在100％-101.5％之间,变异系数＜2％.     

农药学重点实验室开放实验教学与创新人才培养探索实践

重点实验室是国家科技创新体系的重要组成部分,是高等院校进行科研活动的主力军。贵州大学绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地和教育部重点实验室充分利用我国西南山区特色资源,在绿色农药设计与合成、靶标发现与作用机制研究、有机合成方法学研究、有害生物持续控制研究等研究方向上形成了自己的特色和优势,取得了一批重要的研究成果,已成为我国新农药创制、农作物重大病虫害防控技术研究与人才培养的重要基地。围绕国家和地方经济建设对创新人才的迫切需求,充分利用实验室的项目优势、平台优势和技术力量,面向省内本科生和研究生开放,取得了良好的效果。本文通过对近几年实验室开放实验教学工作的总结,探讨了重点实验室开放实验教学在创新人才培养所起的作用。     

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子菌种稳定性研究

 为了解含重组质粒的大肠杆菌菌种连续传代及发酵罐培养中质粒的遗传稳定性,将GM-CSF菌种在含氨苄青霉素的琼脂平皿上连续划线传代培养,以及在不含安苄青霉素的培养基中进行发酵罐培养和42℃诱导表达.结果显示pBV220GM-CSF工程菌在氨苄青霉素选择压力下连续传代10,25,50和100次后质粒稳定、不丢失,而在不含氨苄青霉素的培养基中进行发酵罐大规模培养42℃诱导表达时,质粒稳定性下降,质粒易丢失,其表达量随诱导时间而变化.