传统中药百药煎中没食子酸测定方法的研究

没食子酸是传统中药百药煎的主要成分之一,本文开展了HPLC法测定百药煎中没食子酸含量的方法学研究。通过试验考察了提取溶剂、提取体积、提取时间、提取次数对没食子酸含量测定结果的影响,确定了最优的提取条件(20 mL 50%甲醇为提取溶剂,超声提取20 min,提取一次)。在此提取条件下,开展了HPLC测定法的线性范围、仪器精密度试验、溶液稳定性试验、重复性试验、准确度(回收率)试验和耐用性试验等研究,结果表明本文开发的HPLC是传统中药百药煎中没食子酸含量测定的良好方法。     

重组牛肠激酶轻链在大肠杆菌中的表达和纯化

密码子优化全基因合成了牛肠激酶轻链基因(sBEKLC),采用pET-39b( )构建了融合表达载体,在大肠杆菌中进行了成功表达.37℃在含30 mg/L卡那霉素的LB培养基中培养,当细胞密度(D600)达到0.5时,降低温度到28℃,加入终浓度为0.1 mM的异丙基硫代-βD-硫代半乳糖苷诱导外源蛋白表达,继续培养6 h后收集菌体,融合蛋白(DsbA-sBEKLC)产量达到151.2mg/L,相当于80.6 mg/L sBEKLC.使用渗透冲击技术从细胞周质中提取sBEKLC,经过亲和层析可从每升发酵液中得到6.8 mg sBEKLC,经检测sBEKLC具有生物活性.     

幼蟹培育池蟹稻共生技术研究

为了提高养殖幼蟹所带来的经济效益，我国于20世纪90年代组织开展了“蟹稻共生”技术的试验与推广工作。蟹稻共生开启了立体农业生态型种养技术的新模式，它已成为目前我国农业增加效率、农民增加收入的重要渠道，其发展形势非常迅猛。但关于幼蟹培育池蟹稻共生增产增效的原理，研究工作还十分落后。     

新型Argonaute蛋白的挖掘及体外活性表征

本研究旨在挖掘新的具有可编码核酸切割活性的Argonaute（Ago）核酸酶。利用已报 道的Ago核酸酶的氨基酸序列在NCBI中进行序列比对获得同源性较高的新型Ago蛋白作为候选 蛋白;以大肠杆菌为异源表达系统,对候选蛋白的基因进行密码子优化;表达后的目的蛋白利用亲 和层析进行分离和纯化;设计核酸定向切割体系以测试纯化蛋白的可编码核酸酶活性。结果显 示,序列比对共获得4个候选Ago蛋白,均可在大肠杆菌中可溶表达,再通过亲和层析得到了高纯 度的目的蛋白;纯化后的4个候选Ago蛋白经测试均具有可编码核酸内切酶活性。本研究建立的 Ago核酸酶的挖掘和体外活性表征的方法,可高效获取新型Ago,对于后继Ago核酸酶的研究工作 具有借鉴和参考价值。     

不同饲料组分作为固定化细胞载体制备丁酸纳饲料添加剂的可行性研究

本研究将米糠作为固定化载体,构建了一种新型的外置式纤维床反应器,应用于固定化发酵产丁酸实验。以酪丁酸梭菌为发酵菌株,进行了游离细胞和固定化细胞发酵比较。结果表明,固定化细胞分批发酵丁酸生产率为0.48 g·L~(-1)·h~(-1),比游离分批发酵提高了55%。重复分批发酵8个批次的丁酸浓度平均值为21.05 g/L,可以稳定多批次运行。米糠对丁酸钠的吸附模拟实验表明,米糠对丁酸钠的吸附量为0.02～0.08 g/g。固定化发酵后的米糠会吸附产物丁酸钠,吸附量为0.105 g/g,这有利于将反应后的米糠直接用来生产含丁酸钠的饲料添加剂。     

缩小城乡差距统筹城乡发展之初探

全面建设小康社会的难点在农村,构建和谐社会的难点也在农村。长期的城乡二元结构体制是导致我国城乡差距不断扩大的根本原因。切实贯彻“工业反哺农业,城市支持农村”的方针,努力破除城乡二元结构体制,缩小城乡差距,成为统筹城乡发展的重要选择。