用线粒体Cytb基因序列探讨冬虫夏草寄主蝠蛾的系统进化关系

为探讨冬虫夏草寄主蝠蛾种属间的系统进化关系,采用CTAB法分别从18个冬虫夏草居群的虫草虫体头部和2种寄主蝠蛾中提取基因组DNA,PCR扩增获得冬虫夏草寄主线粒体Cytb基因片段序列.结合GenBank中的蝙蝠蛾科24种冬虫夏草寄主的同源序列,构建NJ系统树.结果表明,双栉蝠蛾属(Bipectilus)先于蝠蛾属(Hepialus)和类蝠蛾属(Hepialiscus)分化;蝠蛾属的冬虫夏草寄主种类众多形态各异,且均有特定的地理分布,蝠蛾属的种间遗传分化也较明显,蝠蛾属可能是多系起源;Cytb基因序列在冬虫夏草寄主蝠蛾种属间存在较丰富的变异,在蝠蛾属中除草地蝠蛾和金沙蝠蛾的该段序列完全一致外,其他种类蝠蛾种间变异率为0.23%—9.24%,Cytb基因序列可用于冬虫夏草寄主昆虫种的鉴定,但有必要获取更多种类的寄主昆虫来进一步验证.通过对冬虫夏草虫体头部提取的DNA进行PCR扩增获得其寄主蝠蛾Cytb基因序列的方法准确有效,有助于进一步获取更多的基因序列对更多的冬虫夏草居群和寄主种类进行系统发育、居群遗传结构及菌虫相互关系等研究.     

银杏外种皮中银杏酚酸对小菜蛾幼虫的拒食及毒杀作用

小菜蛾(Plutella zylostella L.)是一种全球性的重要害虫,其抗药性引起国际学术界的广泛关注,而开发高效、低毒、低残留、无污染的生物农药成为了国内外农药开发的主流．报道了从废弃的银杏(Ginkgo biloba L.)外种皮中分离到的银杏酚酸对小菜蛾的拒食和毒杀作用．实验采用皂化和酯化反应及柱层析方法从银杏外种皮中分离获得银杏酚酸,并对1～3龄小菜蛾幼虫进行生物测定．生测结果表明银杏酚酸对小菜蛾有较好的拒食和毒杀作用．当处理的质量浓度为6．25mg／L时3龄幼虫的非选择性拒食率在24,48h后分别达到77．8％,94．7％以上．处理时间达到48h时,1～2龄幼虫的LC50为1.31mg／L,3龄幼虫的LC50为6．07mg／L．这表明了银杏外种皮有很好的开发前景,将为今后新型植物农药的开发和银杏废弃物的综合利用提供依据．     

中药材连翘道地性的分子生物学探讨

运用随机扩增多态DNA(RAPD)方法研究了来自山西黎城、长治、平顺、壶关、屯留及安泽6个地区11个连翘地方栽培品系的亲缘关系,并用HPLC方法测定连翘主要指标成分———连翘甙含量的变异情况.RAPD分析结果表明,连翘栽培的地方品系间存在明显的DNA水平上的多样性变异,运用Philip3.6软件包以及Wagner算法,可分为A、B、C3个不同分支.连翘甙含量分析结果显示,2个遗传关系相近分支B和C的连翘甙含量差异不显著(t=0.44,p=0.67;平均连翘甙含量分别为0.53mg/g和0.67mg/g),这2个类群与第3个类群遗传差异大,连翘甙含量差异也很大(8.7mg/g).这种DNA分子多样性差异与化学指标成分含量差异的相关性说明连翘的遗传基础可能对化学指标成分的形成和积累有显著的影响.研究结果显示运用RAPD分析手段进行药材道地性研究具有可行性.研究结果不仅对于连翘的道地性研究和中药材GAP(GoodAgriculturalPractice)生产有一定的指导意义,而且对于其他道地中药材的研究也具有一定参考价值.     

栽培黄芩生长过程中CHS和UBGAT表达及黄芩苷积累动态研究

分别采用荧光实时定量PCR和高效液相色谱法分析测定了4月到10月栽培黄芩生长过程中CHS(查尔酮合酶)及UBGAT(UDP-葡萄糖醛酸:黄芩素7-O-葡萄糖醛酸基转移酶)表达水平和黄芩苷含量的动态变化规律.结果表明CHS及UBGAT表达水平均在6月份和8月份达到高峰,而黄芩苷含量的最高峰出现在8月份.研究结果提示在黄芩栽培过程中,6月份和8月份是黄酮类合成和积累的关键时期,因此在这两个月加强田间管理对于提高黄芩药材的质量至关重要.     

中药材连翘道地性的分子物学探讨

运用随机扩增多态DNA（RAPD）方法研究了来自山西黎城、长治、平顺、壶关、屯留及安泽6个地区11个连翘地方栽培品系的亲缘关系，并用HPLC方法测定连翘主要指标成分-连翘甙含量的变异情况，RAPD分析结果表明，可分为A、B、C3个不同分支，连翘甙含量分析结果显示，2个遗传关系相近分支B和C的连翘甙含量差异不显著（t=0.44,p=0.67；平均连翘甙含量分别为0.53mg/g和0.67mg/g），这2个类群与第3个类群遗传差异大，连翘甙含量差异也很大（8.7mg/g），这种DNA分子多样性差异与化学指标成分含量差异的相关性说明连翘的遗传基础可能对化学指标成分的形成和积累有显著的影响，研究结果显示运用RAPD分析手段进行药材道地性研究具有可行性，研究结果不仅对于连翘的道地性研究和中药材GAP（Good Agricultural Practice)生产有一定的指导意义，而且对于其他道地中药材的研究也具有一定参考价值。     

反相HPLC法测定不同产地黄芩中黄芩苷的含量

应用RP HPLC法对不同产地黄芩的有效部位主成分黄芩苷进行含量测定,初步分析不同产地样品之间的质量差异.色谱条件为:zorbax5μmEclipseXDB C184.6mm×250mm柱,甲醇 0.4%(体积分数)磷酸流动相,280nm紫外检测.分析结果表明不同产地黄芩中黄芩苷的含量差异较大.     

加拿大一枝黄花挥发油成分及其抗菌活性

为研究加拿大一枝黄花挥发油的化学成分及其抗菌活性,采用水蒸气蒸馏法从上海江湾机场9月所产加拿大一枝黄花中提取挥发油,并用GC-MS技术结合计算机检索对其化学成分进行分析鉴定,用色谱峰面积归一化法计算各组分的相对质量百分数.现共鉴定了加拿大一枝黄花挥发油的28个成分,是总挥发油的85.88%,其主要成分为大香叶烯D(Germacrane D),D-柠檬烯(D-Limonene).另采用平板打孔法,测试了加拿大一枝黄花挥发油的抗菌活性.结果表明,加拿大一枝黄花挥发油对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌具有显著的抑制作用,对金黄色葡萄球菌作用不明显.大香叶烯D(Germacrene D)是其主要的抗菌活性成分.     

大孔树脂吸附和纯化蒲黄总黄酮的工艺研究

以主成分香蒲新苷及异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷含量为指标，研究了HZ802非极性大孔树脂吸附和纯化蒲黄总黄酮的工艺条件。结果表明HZ802非极性大孔树脂对蒲黄总酮有良好的吸附纯化性能，其优化的工艺条件为：样品溶液的浓度为50mg／mL(生药量／体积)；树脂用量为生药量的1．5倍(质量比)；纯化先用2倍树脂柱体积的水，再用2倍树脂柱体积φ=0．2的乙醇；总黄酮的洗脱用2倍树脂柱体积φ=0．5的乙醇；吸附和洗脱流速均为2mL／min。