L-半胱氨酸产生菌恶臭假单胞菌TS1138的鉴定和诱变育种

从土壤中分离得到一株利用DL-2-氨基-△^2-噻唑啉4-羧酸合成L-半胱氨酸的TS1138菌株，通过形态学特征、生理生化特征、（G＋C）（摩尔分数）和16S rRNA基因序列对其进行了分类鉴定，确定TS1138菌株为恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）．该菌株具有将DL-2-氨基-△^2-噻唑啉-4-羧酸不对称地水解生成L-半胱氨酸的性能．采用了L-半胱氨酸产物的检测方法即18-磷钨酸法、薄层层析法和旋光度法．将TS1138菌株进行亚硝基胍诱变，得到TS1138菌株脱巯基酶缺失突变株TS1138-10，其产L-半胱氨酸能力较出发菌株提高了50％以上．TS1138-10的稳定性实验表明，该菌株的高产L-半胱氨酸能力具有稳定性的遗传特性．     

NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化假单胞菌TS-1138从ATC合成L-半胱氨酸

采用非均相反应制备NaCS(硫酸纤维素钠),考察了反应液中正丙醇-硫酸的最佳比例为25∶35,NaCS和PDMDAAC的最适滴制浓度分别为4%和3%;利用NaCS-PDMDAAC微胶囊对假单胞菌TS-1138进行固定化并进行连续培养,结果表明,菌体能在胶囊内很好的生长和繁殖,连续培养132h后菌浓可达到4.5×1011个/mL胶囊,是在相同条件下游离培养的6倍;固定化菌体以ATC为底物生成L-半胱氨酸的催化活性是游离培养菌体的2.5倍,并且固定化菌体的重复使用能力明显优于游离菌体.重新考察固定化菌体的最适催化反应时间为3h,在一定程度上弥补了微胶囊传质性相对较差的不足.