重金属汞对植物生理活动的影响和钙离子的拮抗作用

汞对植物各方面的生理活动均有严重影响。植物吸收的汞大都积累在根部,这是由于汞与植物根部蛋白质相结合的结果。汞也可诱发生物的染色体突变。富集在作物体内的汞进而通过食物链危害人体。人类的轻度汞中毒可通过摄入含钙食品来缓解。探讨了汞对植物体细胞和生殖细胞的影响,并研究了钙离子对植物汞伤害的缓解作用。发现汞对植物体细胞和生殖细胞均有严重影响,钙离子对植物叶细胞和生殖细胞的汞伤害均有较高程度的拮抗作用,但对根细胞的汞伤害没有明显的缓解作用。     

大蕉冷诱导差减文库的构建与分析

以低温处理的大蕉幼苗cDNA为检测子,未处理的大蕉幼苗cDNA为驱赶子,利用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建了大蕉幼苗冷诱导差减cDNA文库,通过点杂交差异筛选cD-NA文库,得到约50个低温下表达增强的候选克隆,对其进行DNA测序和同源性比较,发现获得的ESTs在功能上主要涉及信号传导、表达调控、非生物胁迫防御、蛋白质加工和能量代谢等方面。该SSH文库的构建为克隆大蕉抗寒相关基因奠定了基础。     

胡萝卜抗冻蛋白在大肠杆菌中的高效表达

以pET—11a为载体构建了胡萝卜抗冻蛋白非融合表达的重组质粒，并在大肠杆菌菌株BL21(DE3，pLysS)中成功地进行了高效表达。表达的蛋白质以包涵体的形式存在，相对分子质量为36800。经正交试验得到了优化的诱导表达条件。包涵体经各种缓冲液洗涤纯化、溶解、复性和超滤浓缩后，经SDS—PAGE电泳检测，纯度达单一带水平。生物学活性研究表明，重组表达的胡萝卜抗冻蛋白具有很强的热滞活性和提高细菌耐寒性的作用。     

水稻第6染色体S5区重叠群构建、基因注释与OS-APH的克隆分析

以通过图位克降所获得的Cosmid克降R2119序列信息为基础，构建了一个长为586kb的粳稻第6染色体S5座位的BAC重叠群（JS5-BC）。通过生物信息学方法，对JS5-BC进行了基因注释，确定该区域含有46个基因位点。经功能预测，JS5-BC重叠群中仔在3个主要的基因家族，分别是木葡聚糖岩藻糖基转移酶、脂酶和黄素氧化还原酶。JS5-BC中注释基因的一个显著特点是功能相关基因密集存在，如与植物细胞壁的合成代谢相父的3个基因、与呼吸链能量代谢的黄素氧化还原酶的4个基因等都是如此。为了验证基因注释的可靠性，克降了广亲和品种Cp17品种的OSAPH基因的cDNA，并检测了该基因的表达模式，为注释基因提供了分子证据。