基于兼并引物的PCR扩增特定基因的效果比较

根据NCBI上的DNA拓扑异构酶Ⅱ基因序列设计兼并引物,采用常规PCR、降落PCR、巢式PCR三种方法扩增糙皮侧耳和阿魏侧耳的拓扑异构酶Ⅱ部分基因序列,比较三种方法扩增效果的特异性、灵敏度.结果表明,巢式PCR的灵敏度和特异性都优于常规PCR和降落PCR,并且巢式PCR的灵敏度是常规PCR灵敏度的100倍以上,更加适合兼并引物扩增.这对利用兼并引物获取特异基因具有指导意义.     

华山松不同部位DNA提取方法比较研究

获得高质量的DNA通常是开展分子水平研究的关键一步.采用经典CTAB法、改良CTAB法、简易CTAB法、SDS微量法及Zigenhagen法对华山松的茎、叶及胚乳的DNA进行提取,并进行琼脂糖凝胶电泳检测、紫外分光光度计分析和标准差及标准误分析,结果表明:对于华山松针叶DNA提取,改良CTAB法提取DNA浓度适中,标准差和标准误最小,方法稳定性好;对于华山松茎段DNA提取,Zigenhagen法提取DNA浓度高,纯度好,标准差和标准误最小,方法的稳定性最好;对于华山松胚乳DNA提取,简易CTAB法提取的DNA浓度最高,纯度最好,标准差和标准误最小,方法的稳定性最好.这也说明对于同一植物的不同部位DNA的提取要采用不同的方法,需要在实践中加以摸索,获得最大的提取效果.     

不同添加剂对蛹虫草子实体生长情况及虫草素的影响

为了提高人工栽培过程中蛹虫草的子实体产量以及主要活性成分虫草素的含量,本实验通过分别添加不同剂量的2,4-D、亚硒酸钠、柠檬酸三铵、以及不同的维生素(VB1、VB3、VB6和叶酸),分析其对蛹虫草生长分化及虫草素合成的影响.结果表明:能增加蛹虫草子实体发育和产量的添加剂质量体积比为:2,4-D 0.1 g/L、亚硒酸钠25 mg/L、柠檬酸三铵1.6 g/L,而维生素的影响不大;亚硒酸钠、柠檬酸三铵对虫草素含量影响不明显,但2,4-D 0.4 g/L和VB3 1.0 g/L最能促进虫草素的形成.     

华山松ISSR反应体系的优化

为获得条带清晰、稳定和多态性高的华山松ISSR扩增结果,对引物、Mg~(2+)浓度和退火温度等因素进行了优化.确定了ISSR分析的最佳PCR条件:15μL反应体系中,10×PCR buffer反应缓冲液1.5μL,模板DNA 22.5 ng,Mg~(2+)2.2 mmol/L,d NTPs 0.23 mmol/L,引物0.93μmol/L,Taq DNA聚合酶0.027 U/μL.PCR反应程序为:经94℃预变性4min后,经过94℃变性30 s,Tm-4.8℃退火30 s,72℃延伸108 s共33个循环;循环结束后72℃延伸10 min.从44条ISSR引物中筛选出12条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物.对华山松ISSR实验优化体系的建立,为今后利用ISSR分子标记技术开展华山松种间遗传变异分析和构建遗传图谱等研究奠定了基础.     

二元稀溶液凝固平界面稳定性研究(Ⅱ)

本文考虑在液相中存在对流的情况下引入柱面波几何干扰,获得了确定界面稳定性的表达式q(ω)=δ(t)/δ(t);研究了二元稀溶液凝固平界面在柱面波干扰下的干扰频率不稳定区间及危险频率,与平面波干扰的情况相比较,得到了更为符合实际情况的结果。