转番茄蛋白酶抑制剂Ⅱ基因烟草植株的培育及其抗虫特性分析

将分离的番茄蛋白酶抑制剂Ⅱ基因cDNA序列tin2和含有一个109bp内含子的基因组DNA序列tin2i,分别构建成植物表达载体pBCT2和pBT2.然后通过农杆菌介导转化烟草叶片外植体,获得了两类转基因烟草植株.分子生物学检测和胰蛋白酶抑制剂活性分析结果表明,tin2序列和tin2i序列都能够在转基因烟草中正确表达.抗虫活性检测结果显示,转tin2i序列的烟草植株的抗虫活性高于转tin2序列的烟草植株,推测这可能与tin2i序列中内含子的存在有关.     

培养条件对甜瓜（Cucumis melo L.）不定根离体诱导的效应

以甜瓜下胚轴为试材，建立了一套简便，快速的不定根离体诱导与调控体系，描述了不定根发育分化的组织学特性。研究结果表明：经过４８ｈ的诱导培养，甜瓜下胚轴切段韧皮部薄壁组织细胞开始分裂而成为不定根的发端；外源ＩＢＡ没有改变不定根原基分化与发育的进程，但增加不定根原基数量；高浓度外源ＫＴ促进木质部分化，抑制韧皮部薄壁细胞分裂，这一工作为采用ｍＲＮＡ差别显示或ＲＤＡ方法分离不定根相关基因及研究不定根发育分化     

经管类专业开展ERP实训教学的探讨

将ERP系统引入学校,作为经管类专业技能培养的重要手段之一,已经为许多高职院校所尝试。文章分析了ERP系统先进的管理思想和理念,从ERP的特点及技能培养的定位入手,提出了基于ERP系统的高职经管类专业技能培养的方法。     

开设ERP沙盘模拟对抗课程的探索与实践

ERP沙盘模拟对抗课程又名企业经营管理仿真教学系统,正以突出的实践性和应用性为高职院校所关注。该文结合开课实际情况就课程的定位、课程设置、教学组织、课程指导等方面作介绍。     

cDNA文库的差异筛选与抑制性减数杂交相结合分离胡萝卜体细胞胚根发育相关基因

应用cDNA文库差异筛选与抑制性减数杂交相结合的技术程序,并通过反向Northern分析进一步验证,成功地从解调控12h的胡萝卜体细胞胚的cDNA文库中,分离到7个在解调控12h特异表达的基因.其中4个含有完整的编码框,分别编码木质葡聚糖内转糖基化酶、脂肪酸去饱和酶、一种poly(A)结合蛋白和一种酰基转移酶.另外3个是5′端部分缺失的cDNA基因片段,分别编码三磷酸甘油醛脱氢酶、一种糖蛋白和一种与单链RNA/DNA结合的蛋白.对其中部分基因的Northern分析结果显示,它们的表达量在蔗糖调控下的胡萝卜体细胞胚根发育的不同时期均有显著变化,说明它们都是与胚根发育相关的基因.     

基于内部控制视角下的高校收费管理研究

伴随着高等教育事业的迅速发展,高校收费管理工作作为高校财务管理的一部分,发挥着越来越重要的作用。为进一步加强高校收费管理,针对当前高校收费管理中内部控制存在的问题,提出一些针对性的解决对策,从而保证高校收费工作的规范、健康、有序进行。     

osRACD基因表达与光敏核不育水稻光周期育性转换的相关性

为检测水稻低分子量GTP结合蛋白编码基因osRACD与光敏核不育水稻农垦58S光周期育性转换的相关性,用农杆菌介导转化和潮霉素抗性筛选获得了大量的转基因水稻植株.通过PCR、Southern杂交、RT-PCR和Northern检测等,证明反义osRACD基因和正义osRACD基因均已分别在转基因农垦58N和58S水稻植株的幼穗中得到了稳定的表达.成熟转基因植株的自交结实率统计分析表明,反义osRACD基因的表达大大降低了转基因58N水稻植株的育性,其平均结实率明显低于对照植株;而正义osRACD基因在转基因58S水稻植株的幼穗中表达后,使得长日下生长的、本来不育的58S植株的育性得到一定程度上的恢复,有的植株的结实率还高于短日下生长的对照植株;而且,osRACD基因表达水平越高的转基因58S植株,其对应的结实率也越高.降低幼穗中内源osRACD基因的表达水平会导致转基因58N水稻植株的育性降低,恢复长日下生长的转基因58S水稻植株幼穗中osRACD基因的表达,则可恢复其育性.这表明,osRACD基因的表达参与了农垦58S光周期育性转换的调控过程.这是第一个报道的参与光信号传导与光敏核不育水稻光周期育性调控的低分子量GTP结合蛋白的编码基因.     

转水稻osRACD反义基因拟南芥植株的育性分析

利用反义RNA技术,将水稻低分子量GTP结合蛋白基因osRACD反向置于CaMV 35 S启动子的调控下,构成反义基因表达载体pBID,并用真空渗透法转化拟南芥植株.转基因植株的荚果自花谢之后就停止生长,其后荚果便自顶端开始逐渐枯黄并死亡;而对照植株的荚果在花谢之后仍继续生长直到成熟.花粉离体萌发生长实验显示,转基因植株花粉萌发后的生长延伸过程受到抑制,形成短而略粗的花粉管;而对照植株花粉萌发后的生长状况正常,形成长圆柱形的花粉管.这些结果表明,osRACD基因的功能是参与控制花粉管的生长延伸过程,其编码的蛋白质可能是调控光敏核不育水稻58S育性的重要因子之一.     

不同发育状态下胡萝卜胚根基因的差异表达

研究表明,在真核生物中除少数看家基因外,大多数基因的表达不仅具有严格的时空特异性,而且在不同的发育阶段之间还存在着明显的异质性,在生物体的某一特定的发育阶段,细胞的RNA除了rRNA和tRNA之外,便是在这一特定时期表达的所有基因转录本的集合体。由此可见,处在不同发育阶段的mRNA,不论在数量上还是在种类上都存在着明显的差别。应用mRNA差别显示技术(mRNA differential display)可以从含有大约15000种mRNA的群体中,迅速地鉴别并克隆出差别表达的特定基因。     

胡萝卜体细胞胚DnaJ同源基因的分离及其表达特性分析

DnaJ/Hsp40蛋白是DnaK/Hsp70的辅助分子伴侣,它通过调节DnaK/Hsp70的ATPase活性来影响蛋白复合体的合成与组装.运用改进的cDNA代表性差示分析方法从解调控胡萝卜体细胞胚中分离出DnaJ基因同源区段,进而以它为探针筛选解调控12 h的胡萝卜体细胞胚cDNA文库,从胡萝卜中分离得到DnaJ蛋白同源基因DcJ1.序列分析表明它的编码区为1257 bp,编码418个氨基酸和1个终止密码子,包含3个保守的特征结构域.Southern杂交分析表明,DcJ1基因在核基因组中以单拷贝或低拷贝形式存在;而Northern杂交则显示该基因仅在根中特异表达,其表达强度随着胡萝卜体细胞胚的调控-解调控过程发生明显的变化,并且不受热激的诱导.由此可见,DcJ1基因的表达活性与胡萝卜体细胞胚根的早期发育之间存在着明显的相关性.