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不同类型核受体对小鼠体细胞重构胚胎发育能力的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为探讨昆明白小鼠不同类型的卵胞质对小鼠体细胞核移植胚胎发育的影响, 采用C57BL/6小鼠耳成纤维细胞为核供体, 昆明白小鼠卵母细胞为核受体进行单次核移植, 同时采用将重构胚类合子核移入去核合子、重构胚2-细胞卵裂球细胞核移入去核MⅡ期卵的方法进行连续核移植, 通过将重构胚2-细胞卵裂球与正常昆明白小鼠2-细胞胚胎卵裂球交换融合得到四倍体胚胎. 对所得胚胎进行体外培养, 结果发现, 以去核的昆明白小鼠MⅡ期卵母细胞为核受体进行单次核移植所得到的重构胚胎发育率很低, 且只能发育到8-细胞阶段. 两种连续核移植重构胚发育率均有所提高, 但仅重构胚类合子核移入去核合子时有囊胚出现, 囊胚发育率为1.9%. 重构四倍体胚胎囊胚发育率却很高(62.3%), 染色体分析表明其中51.5%为真正的四倍体. 结果表明, 昆明白小鼠不同类型核受体对重构胚胎的发育能力有显著影响, 其去核卵母细胞胞质对体细胞核重编程的能力较弱, 而当其与正常受精卵胞质共同作用时可较好地对体细胞核重编程. 相似文献
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运用显微操作和免疫手术法, 对昆明鼠和C57BL/6鼠的囊胚进行内细胞团置换. 以切除内细胞团的昆明鼠胚胎滋养层为受体, 注射免疫手术得到的昆明鼠或C57BL/6鼠的内细胞团, 获得两种重构胚. 一种是由不同昆明鼠个体的滋养层和内细胞团构建的同品系异体重构胚, 共构建192枚. 移植入17只昆明鼠受体后, 生下2只昆明小鼠. 另一种重构胚是由切除内细胞团的昆明鼠胚胎滋养层与C57BL/6鼠胚胎内细胞团构建的异品系重构胚. 对此重构胚的成活率、细胞骨架和细胞数目进行了分析, 说明至少从这3个方面来说, 这种重构胚具有一定的发育潜能. 但将115枚异品系重构胚移植入昆明鼠受体后, 目前还没有后代出生. 说明来自不同个体胚胎的同品系滋养层和内细胞团重组后能够建立细胞连接, 进行信息传递并发育为正常个体, 而异品系重构胚发育能力较低. 这项研究有可能为解决动物克隆中着床率低和胎盘异常等问题提供参考方法. 相似文献
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用显微操作技术将Ca^2+特异荧光染料Calcium green^TM-1注射入GV期卵母细胞的细胞质内,在激光扫描共聚焦显微镜下观察生发泡破裂前Ca^2+的时间和空间分布的变化,利用Laser sharp软件进行分析,发现一种有规律的Ca^2+波动,其波动周期约为90s。卵母细胞内Ca^2+的分布并不均匀,核膜周围的Ca^2+浓度了高,细胞质中次之,而生发泡内部Ca^2+浓度最低。 相似文献
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克隆牛过程中电融合条件对附植前胚胎发育的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
实验比较了克隆牛过程中电融合条件的改善对附植前胚胎发育的影响. 电融合强度为140 V/mm,10 μs/次时的效率要较100 V/mm,20 μs/次和180 V/mm,10 μs/次时高,可以降低融合后重构胚死亡率,提高克隆牛囊胚发育率. 施加直流电脉冲前先给予5 V交流电场预处理数秒钟,然后在电极之间通以两个直流脉冲(140 V/mm, 10 μs/次,间隔0.1 s)与不用交流电预处理对融合率和重构胚的发育率无显著差异. 另外实验比较了甘露醇和山梨醇两种融合液对融合及重构胚发育的影响,结果表明囊胚发育率差异不显著,但山梨醇较甘露醇融合液更容易操作. 实验生出的4头克隆牛存活至今. 相似文献
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用松胞素 B( Cytochalasin B, C B)处理培养的 Hela 细胞,抑制胞质分裂,引起 Hela 细胞发生不正常分裂,可形成多极细胞(三极、四极等).通过荧光免疫染色法显示多极细胞有丝分裂中期的微管,使用激光共聚焦显微系统观察三极细胞纺锤体和中期染色体的空间相对关系,推测了纺锤体微管的分布与有丝分裂后期染色体分离的相关性.本方法还可用于研究有丝分裂期纺锤体微管对胞质分裂分裂沟形成的影响. 相似文献
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