KF-80快速冷冻技术制备生物样品用于电镜X射线元素分析

新鲜生物样品经快速冷冻固定、冷冻超薄切片后进行电镜下形态观察和在位元素分析，以研究细胞生命活动某个瞬间的形态及元素组成和分布。KF－80快速冷冻仪用液氮使氟时昂－22保持在－160℃，将生物样品快速射入其中以达到快速冷冻固定的目的，在组织样品－大鼠胸主动脉平滑肌细胞和悬滴样品－兔红细胞的观察中证实两者的超微结构保存较好，虽有直径约0．1μm的小冰晶存在，但不影响形态观察和元素分析，平滑肌细胞X射线元素分析结果显示，胞质中钾含量高，钠含量低，核中磷含量高而硫含量低，说明此项技术术能保持胞质与核间元素分布的差异。     

应用电镜X射线显微分析技术研究缺血心肌细胞内钙分布

电镜X射线显微分析技术、文名电子探针X射线显微分析技术,是将电子光学成像技术同X射线元素分析技术相结合而发展起来的一项崭新的分析技术。它的主要特点是能对极小区域内物质的组成元素进行定性和定量分析测定,灵敏度达10~(-16)g(在lμm~3体积内)。生物医学研究领域应用这项技术可对在位细胞器内的元素进行分析。这类工作对生物医学的发展有重要意义。应用电镜X射线显微定量分析技术的障碍,主要在于被测试样品的制备技术较难掌握。在常规制备样品过程中采用的固定、脱水、包埋等步骤,会使许多与生理功能密切相关的离子产生移位和丢失,为防止这种情况发生,必须采用新鲜活组织进行快速冷冻固定,冷冻超薄切片等先进而复杂的技术。本文报道应用此项新技术,研究缺血心肌细胞内钙分布的结果。