中国无病毒果树研究的进展

病毒病对果树生产的危害日趋严重，各国对病毒病害的研究和防治极为重视。本文主要论述了中国在果树病毒的检测、脱除以及抗病毒基因工程、生长结果习性和生理生化特性等方面的研究进展和取得的成就，同时指出今后应注意的一些问题。     

与核桃早实性相关的RAPD标记筛选及其SCAR标记转换

利用构建的早实核桃和晚实核桃近等基因池DNA，筛选了180个10-mer随机引物，获得1个稳定的RAPD标记OPG15759。根据OPG15759的测序结果，将该RAPD标记成功转化为显性的SCAR标记SCG15759。PCR结果显示，G15759是与核桃早实性相关的分子标记，该标记对核桃的分子标记辅助育种具有重要意义。     

植物无标记转化的诱导表达Cre/loxP重组系统的构建

应用Cre/loxP系统位点专一性重组的特点构建诱导表达的定位重组系统,用以特异性的敲除转基因植物的标记基因.为了获得诱导表达启动子,从大豆基因组DNA中用pfu酶克隆热激蛋白启动子gmhsp17.5c,将其克隆到pUC118-HincⅡ载体并测序.结果表明,508nt的gmhsp17.5c与已报道序列(GenBank,AF544399)比较,核苷酸的同源性为99.8%.利用该诱导启动子分别构建了含gmhs p17.5c-cre基因组件和gmhsp17.5c-gus基因组的诱导型植物表达载体pC23HC和pC23HG.此外1个含有loxP-gus-loxP组件的组成型植物表达载体pC23LG被构建.通过对3个植物表达载体做多重酶切及亚克隆后测序分析表明载体pC23HC全长10947bp,载体pC23HG全长11396bp,载体pC23LG全长11900bp,符合预期设计.一套由pC23HC和pC23LG组成的植物无标记转化的诱导表达Cre/loxP重组系统被构建,为进一步将诱导表达的标记基因删除系统用于植物的无标记转化奠定基础.     

新疆主要梨品种亲缘关系的分子标记分析

为了分析新疆主要梨品种间的亲缘关系，从160个随机十聚体引物中筛选出12种RAPD引物分析18份材料，共扩增133条带，平均每个引物扩增约11条带，其中14条带为所有材料的共有带，有119个多态位点(占89．47％)，Nel相似系数在0．5～0．723，用PHYLIP构建UPGMA、NJ树，认为：1)对选用的形态学经典分类已较明确的新疆梨、白梨、砂梨、西洋梨、秋子梨，RAPD数据完全与其相符；2)几个芽变间高度相似；3)杂种新梨1号与砀山梨、杂种新梨6号与香梨、杂种早酥梨与苹果梨分别并类；4)苹果梨独立于供试的5个种之外，建议将该品种上升为种一级阶元；5)库尔勒香梨归属于新疆梨。     

一个烟草PR-1a启动子的克隆及序列分析

通过PCR扩增，从烟草Nicotiana tabacum cv Samsun中克隆了水杨酸诱导表达的病程相关蛋白PR-la基因的启动子TP12，以期用于构建诱导表达基因敲除系统，并用于无性繁殖植物的无标记基因转化。启动子的克隆产物经正反两向测序后，拼接分析结果表明，扩增得到的PR-1α基因启动子长1313个碱基，序列富含AT，其中A T占71．67％，与已报道的序列比较，核苷酸的相似性为98．6％。     

利用随机引物对PCR反应条件的筛选及优化试验

不同试验PCR反应的条件是不完全一致的，在PCR反应进行前就有必要对反应条件进行筛选和优化，因此，提出了对关键实验条件的正交筛选，结合反应的增强与抑制条件，从而筛选出适用于本实验室的最佳反应条件。     

甜瓜叶片的衰老与超氧化物歧化酶活性及脂质过氧化作用的关系

分别用全营养液、缺Cu-Zn营养液、缺Fe营养液、缺Mn营养液、10％NaCl营养液培养甜瓜幼苗,研究不同时间甜瓜叶片的超氧化物歧化酶(SOD)及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的变化。实验结果表明：随着胁迫时间的延长,SOD活性降低,MDA含量显著增高。证明甜瓜为Cu-Zn SOD。观察了SOD同工酶随胁迫时间的延长在叶片中的变化。讨论了离子胁迫过程中氧自由基对酶及质膜的损伤影响。     

梨属DNA提纯方法的比较研究

通过比较试验,使用ＳＤＳ－氯仿－异戊醇法,并添加ＢＭＥ及Ｖｃ,可简便,快速地从梨属成熟叶中提取大分子量能且很好地被酶切的ＤＮＡ,有效地去除了梨属植物组织中富含的多酚类、单宁、色素及多糖类杂质。     

番茄花药培养愈伤组织诱导及不定芽形成的研究

为了建立番茄花药愈伤组织诱导及分化的实验体系,通过花药离体培养并设计不同的试验处理,以6个番茄品种的花药为试材,研究了植物生长调节剂、蔗糖浓度、硝酸银浓度、基因型和培养基对番茄花药培养愈伤组织诱导率及不定芽形成的影响.结果表明:培养基中添加1.0mg/L的2,4-D和0.5mg/L的KT,里格尔87-5和石番9号愈伤组织诱导率都达最高;培养基中加入30g/L的蔗糖,里格尔87-5的愈伤组织诱导率达20.24%;培养基中加入10μmol/L的硝酸银,花药组织褐化率较对照降低了70.59%,当浓度超过50μmol/L,褐化率增高,出愈率略有降低;不同基因型愈伤组织发生率明显不同,相同培养条件下,里格尔87-5的诱导率高达21.43%,而粉B二号的诱导率仅有0.46%;培养基中加入175g/L的马铃薯汁、0.1%的活性炭,6个材料的愈伤组织平均诱导率较对照分别降低了35.14%、95.48%.番茄花药愈伤组织在MS+6-BA 2mg/L+ZT 0.5mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上可再分化成不定芽,不定芽诱导率达15.15%.     

同工酶在梨属系统发育分析中的应用

对新疆梨属的26份样本用POD和EST同工酶电泳，共产生23条带，Nei相似系数为0．316～1．000。构建UPG-MA、NJ树，对西洋梨系统、砂梨系统及部分秋子梨系统内品种能较好地确定其位置，对新疆梨系统、白梨系统、部分秋子梨系统品种及香梨的位置较难确定，且各系统之间相似系数亦较高，bootstrap支持率较低。