链球菌Fc结合蛋白G基因的克隆与原核表达

为研制SPG相关免疫试剂盒,设计了1对引物,从C群链球菌C40株基因组中扩增出了387 bp的细胞壁结合蛋白G(streptococcal protein G,SPG)基因,该基因编码125个氨基酸,包含了C1和C2两个Ig G结合结构域.构建了原核表达载体p ET28a(+)-SPG,IPTG诱导表达出分子质量约15.0 ku的SPG蛋白,并应用亲和层析柱纯化了SPG蛋白,Western blot分析表明纯化SPG蛋白具有生物学活性.     

重组SRH蛋白抑制SHR大鼠动脉粥样硬化发展的研究

利用SHR大鼠和正常WKY大鼠评价SRH,研究探讨融合蛋白SRH对高脂喂养诱导的自发性高血压症大鼠（Spontaneously hypertensive rat, SHR）动脉粥样硬化发展的影响.结果发现,正常大鼠和高脂喂养的SHR大鼠体外和体内均未见出血现象,重组SRH能够降低高脂喂养的SHR大鼠的血液凝血指标,减少血液中总胆固醇量,降低血压,减弱主动脉弓病变程度,对正常WKY大鼠则无任何影响.     

TMEPAI蛋白表达对溶酶体稳定性的影响

本研究旨在构建稳定表达TMEPAI细胞株,研究TMEPAI表达对溶酶体稳定性的影响.采用基因工程技术构建重组表达载体p EF-IRES-TMEPAI-Flag,经酶切、PCR检测及测序鉴定,证实表达质粒构建正确.将表达质粒转染A549肺癌细胞,经抗生素puromycin筛选单克隆阳性细胞株,采用免疫印迹实验(Western blot)和免疫荧光技术证实稳定表达TMEPAI细胞株构建成功.通过MTT法、流式细胞技术和吖啶橙染色实验表明,TMEPAI蛋白能够增强溶酶体的稳定性.